中文名稱:
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-FITC/PI)
英文名稱:Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:20 rxn
發(fā)貨周期:~3天
Annexin V-FITC/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是用FITC標(biāo)記了的Annexin V作為探針,來檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的發(fā)生,可用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀或其他熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。
其檢測(cè)原理為:在正常的活細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphotidylserine,PS)位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在早期凋亡的細(xì)胞中,PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-Ⅴ(膜聯(lián)蛋白-V)是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與PS高親和力結(jié)合?赏ㄟ^細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。
另外,本試劑盒中還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用來區(qū)分存活的早期細(xì)胞和壞死或晚期凋亡細(xì)胞。PI是一種核酸染料,它不能透過正常細(xì)胞或早期凋亡細(xì)胞的完整的細(xì)胞膜,但可以透過凋亡晚期和壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此,將Annexin V與PI聯(lián)合使用時(shí),PI 則被排除在活細(xì)胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡細(xì)胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞同時(shí)被FITC 和PI 結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽性(Annexin V+/PI+)。
儲(chǔ)存條件:4℃,有效期一年。
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-FITC/PI)注意事項(xiàng):
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例,也受作用時(shí)間的影響,因此當(dāng)樣品較多時(shí)測(cè)定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色,需避光保存,長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí),請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(完全培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
PBS Stock Solution (0X, pH 7。4) (500 mL) Phosphatebuffered Saline; PBS Stock Solution (0X, pH 7。4)
ABFUBINACA 3fluorobenzyl isomer (0 mg) N[(S)(aminocarbonyl)2methylpropyl][(3fluorophenyl)methyl]Hindazole3carboxamide
(R)methyl Prostaglandin D2 (5 mg) 9。alpha。,Rdihydroxyoxomethylprosta5Z,Edienoic acid; (R)methyl PGD2; (R)methyl Prostaglandin D2
(±)8,9DHET (250 ug) (±)8,9dihydroxy5Z,Z,Zeicosatrienoic acid; (±)8,9DiHETrE; (±)8,9DHET
PB22 (0 mg) pentyl8quinolinyl esterHindole3carboxylic acid; QUPIC; PB22
Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Endotoxin Low, pH – 7.0 Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Endotoxin Low, pH – 7.0
鉍shēng huà shì jì容量:25克
32883,4二錄三扶3,4Dichlorobenzotrifluoride
十氫奈克
2,2’雙4,4’二羧醋二鉀鹽 2,2'Biinoneolinq4,4diccrboxylic ccid diwo7ium sclt 9884
草酸高鐵克2~8℃
DMFAN,N二甲基甲先胺25克BR,98%
二安基青化內(nèi) % wo7ium dicycncmidq 4
4NBocamino3metxoxypxenylboronic acid 6
苦杏仁苷 Amygdalin (≥98%,HPLC) 298836 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
D甘露醇/甘露醇/甘露糖醇/已六醇/木密醇/D甘露糖醇/DMannitol AR,99% 00克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠脂多糖(LPS)ELISA試劑盒 ,英文名: LPS ELISA Kit
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA檢測(cè)試劑盒Monkeytumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISAKit 96T/48T
犬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)免疫試劑盒 Canine Coicosterone,CO ELISA Kit
英文名稱HumanProinsulinELISAKit人胰島素原(PI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
化大鼠腎上腺髓質(zhì)素(AM)基因重組表達(dá)載體(pGEFP-AM)測(cè)序引物對(duì)2OD
Rathiston-H2bELISA試劑盒大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素2A(IL2A)ELISA試劑盒 ,英文名: IL2A ELISA Kit
人C型尿肽(CNP)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit 96T/48T
大鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CF)免疫試劑盒 Rat Ciliary Neuroophic Factor,CF ELISA Kit
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-FITC/PI)英文名稱Ratα-AcidglycoproteinELISAKit大鼠α-酸性糖蛋白(α-AGP)規(guī)格:96T/48T
咖啡三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitSM人鞘0脂規(guī)格:48T/96T
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