以下是細胞生物學試劑詳細說明:
細胞凋亡DNA Ladder檢測試劑盒本試劑盒可應用于培養(yǎng)細胞凋亡檢測(不推薦用于檢測組織樣本)。細胞核染色質(zhì)DNA 斷裂是細胞凋亡的標志特征。在細胞發(fā)生凋亡時,核酸內(nèi)切酶被激活,選擇性降解染色質(zhì)DNA,形成50-300 kb 的大片段,并進而在核小體連接處斷裂,形成80-200 bp 或其整倍數(shù)的DNA片段,這些DNA 片段可從細胞中提取出來,通過瓊脂糖凝膠電泳,溴化乙啶染色呈現(xiàn)為梯狀條帶(DNALadder),并據(jù)此判斷細胞凋亡產(chǎn)生。我司細胞凋亡DNA Ladder 檢測試劑盒提供了一種簡便、快速地提取染色質(zhì)DNA 的方法,并增加對小片段DNA 的回收,從而增強了檢測的敏感性。
注意事項
. DNA Ladder 出現(xiàn)在細胞凋亡晚期,觀察細胞形態(tài)已發(fā)生皺縮出芽,染色質(zhì)完全凝聚,細胞核已固縮斷裂的凋亡晚期形態(tài),建議該種形態(tài)的凋亡細胞比例在30%以上時進行DNA Ladder 檢測或先進行Tunel檢測.
2. DNA Ladder 出現(xiàn)在一個較短的時間段,在凋亡早期取樣,則無DNA 降解的條帶,而在凋亡末期取樣則產(chǎn)生與細胞壞死相似的DNA 彌散條芾。因此取樣時間需根椐不同種類的細胞和誘導劑而摸索確定。
3. 貼壁細胞最好不用胰酶消化而用細胞刮收集。
4. 某些細胞不產(chǎn)生這種核小體間的DNA 斷裂,而是產(chǎn)生50-300kb 的大片段斷裂。
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于×05,,不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當,可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測?蓪⒁让赶蠹毎谋4嬖诤2%BSA 的PBS 中,防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導致熒光的淬滅,請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導處理的細胞作為對照,進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點:
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好?朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方,將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一,因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用,
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結(jié)合效果,大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
PLD Substrate (200 ul) PLD Substrate
AcLEVDAFC, Caspase4熒光底物 Caspase4 Substrate LEVDAFC
BiotinXNHS ( g) 6[[5[(3aS,4S,6aR)hexhydro2oxoHthieno[3,4d]imidazol4yl]oxopentyl]amino]2,5dioxopyrrolidinyl esterhexanoic acid; BiotinXNHS
STO609 (acetate) (5 mg) 7
N(2hydroxypentyl) metabolite (0 mg) ((2hydroxypentyl)Hindol3yl)(2,2,3,3tetramethylcyclopropyl)methanone; N(2hydroxypentyl) metabolite
QX3 bromide) (0 mg) QX3 bromide), 2[(2,6dimethylphenyl)amino]N,N,Ntriethyl2oxoethanaminium bromide
甲基綠shēng huà shì jì容量:公斤
989固化劑4xy7noxybenzenesulfonic acid
十二烷基基化0克
β βAlanine,99% 0 25G 通用試劑
L蘋果醋 L()Mclic ccid 9
ICarrageenanIOTAType卡拉膠類型V5克BR,98%
206錄 97%6Chlorohexanol
BLUEDUOPROTEINMARKERMIDRANGE蛋白Marker生物技術級COLDsigma
,7二;化七亞基 ,7DibroMohqptcnq;HqptcMqthylqnq dibroMidq 3
沒食子醋酯;棓醋酯;五棓子醋酯;3,4,5三羌基本加醋酯 Mqthyl gcllctq;Mqthyl 3,4,5trixy7noxybqnzoctq;3,4,5Trixy7noxybqnzoic ccid Mqthyl qstqr 99/4/
小鼠周期素依賴性激酶抑制因子A(CDKNA)ELISA試劑盒 ,英文名: CDKNA ELISA Kit
犬維生素A(VA)ELISA檢測試劑盒CanineVitaminA,VAELISAKit 96T/48T
犬透明質(zhì)酸酶(HAase )免疫試劑盒 Canine Hyaluronidase ,HAase ELISA Kit
英文名稱HumaumornecrosisfactorβELISAKIT人腫瘤壞死因子β(TNFβ)規(guī)格:96T/48T
超氧化物歧化酶(SOD)細胞裂解樣品制備試劑盒50次
ratgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA試劑盒大鼠促生長激素釋放激素(GRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠γ干擾素受體(IFN-γR)ELISA試劑盒 ,英文名: IFN-γR ELISA Kit
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA檢測試劑盒Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISAKit 96T/48T
人ras同源物基因家族成員b(RHOB)免疫試劑盒 human RHOB ELISA Kit
英文名稱MouseEndothelin-ELISAKit小鼠內(nèi)皮素(ET-)規(guī)格:96T/48T
埃蒙氏(EMMONS)真菌培養(yǎng)基00毫升
Rabbitsolubleadhesionmolecules,SamELISA試劑盒兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞凋亡DNA Ladder檢測試劑盒操作步驟:
、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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上海莼試生物技術有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology Co. Ltd. 專業(yè)服務于生命科學領域,擁有分子生物學、醫(yī)學、藥學、化學等方面的科研技術團隊,經(jīng)營科研生化試劑、分析試劑、實驗耗材,推出技術先進、質(zhì)量穩(wěn)定的科研產(chǎn)品。為全國乃至于世界各地科研機構(gòu)、工業(yè)、電子、醫(yī)療、科技等領域的客戶,提供系統(tǒng)的產(chǎn)品資源及配套技術服務。推出十幾個種類產(chǎn)品線,部分產(chǎn)品接受定制服務!
公司著力立足于生命科學領域,全力打造品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術服務鏈!