中文名稱:
Annexin V-APC/PI雙染雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Annexin V-APC/PI Apoptosis Detection Kit產(chǎn)品規(guī)格:20T|00T|50T
產(chǎn)品規(guī)格:0T|20T|50T|00T
發(fā)貨周期:~3天
在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細(xì)胞凋亡早期,細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將Annexin V 進(jìn)行熒光素APC 標(biāo)記,以標(biāo)記了的Annexin V 作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種核酸染料,它不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜,但對(duì)凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞,PI 能夠透過(guò)細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將Annexin V- APC 與PI 匹配使用,就可以將處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)(不推薦用于檢測(cè)組織樣本)。
Annexin V-APC/PI雙染雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例,也受作用時(shí)間的影響,因此當(dāng)樣品較多時(shí)測(cè)定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色,需避光保存,長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí),請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(完全培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
Potassium Phosphate Stock Solution (500 mM, pH 7。0) (500 mL) Potassium Phosphate Stock Solution (500 mM, pH 7。0)
L5,04 (5 mg) 2[4[3(4acetyl3hydroxy2propylphenoxy)propoxy]phenoxy]acetic acid
Mubritinib (0 mg) [4[4[[2[(E)2[4(trifluoromethyl)phenyl]ethenyl]4oxazolyl]methoxy]phenyl]butyl]H,2,3triazole; TAK 5; Mubritinib
(R)HEDE (250 ug) RhydroxyZ,Eeicosadienoic acid; (R)HEDE
Dynasore (0 mg) 3hydroxy2[(3,4dihydroxyphenyl)methylene]hydrazide2naphthalenecarboxylic acid; Dynasore
Ammonium sulfate saturated solution Ammonium sulfate saturated solution
甘露醇錄瓊脂shēng huà shì jì容量:250克
897022Bromo
精胺毫克保存:20℃
2,3二輕 99% 2,3Dixy7nofurcn 97
己二酸5克RT
DL蘋(píng)果酸鈉水合物,英文名或英文縮寫(xiě):wo7ium DLmaate trihydrate,級(jí)別:標(biāo)準(zhǔn)溶液,0ug/ml,u=6%,規(guī)格:00毫克
898CalciuM hydride
T3RNA聚合酶,英文名或英文縮寫(xiě):T3 RNA Polymerase,級(jí)別:BR,00300u/mg,液體,兔肌,規(guī)格:25克
異葒草素 Isoorientin,≥98% 62 0MG 通用試劑
二縮水甘... diglycidyl (≥%) 258 0G 通用試劑
小鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族M成員4(PM4)ELISA試劑盒 ,英文名: PM4 ELISA Kit
犬血栓前體蛋白(TpP)ELISA檢測(cè)試劑盒Caninethrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T
犬纖溶酶原激活物抑制劑(SERPINE)免疫試劑盒 Dog plasminogen activator inhibitor ,SERPINE ELISA kit
英文名稱humanHistamineELISAKIT人組胺(Histamine)規(guī)格:96T/48T
超氧化物歧化酶(SOD)標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定試劑盒5次
RatGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISA試劑盒大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat somatostatin (SS) ELISA Kit 大鼠生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒
HumanCollagenaseIELISAKit 人膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Annexin V-APC/PI雙染雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒HumanCeruloplasmin,CP/CERELISA試劑盒人銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米MON80品系試劑盒20次
HumanSerotonin,STELISAKit人血清素/血清胺(ST)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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