中文名稱:
Annexin V-APC/7-AAD雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:0T|20T|50T|00T
發(fā)貨周期:~3天
Annexin V-APC/7-AAD雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細(xì)胞凋亡早期,細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將Annexin V 進(jìn)行熒光素APC 標(biāo)記,以標(biāo)記了的Annexin V 作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。
7-AAD(7-amino-actinomycin D)是一種核酸染料,它不能通過正常質(zhì)膜,隨著細(xì)胞凋亡、細(xì)胞死亡過程,質(zhì)膜對(duì)7-AAD 的通透性逐漸增加,結(jié)合細(xì)胞凋亡中DNA 的有控降解,在合適波長(zhǎng)激發(fā)光的激發(fā)下可發(fā)出明亮的紅色熒光,通過7-AAD 標(biāo)記DNA 的強(qiáng)弱,將細(xì)胞分為三群:7-AAD 強(qiáng)為死亡細(xì)胞,7-AAD 弱是凋亡細(xì)胞,7-AAD-為正;盍(xì)胞。7-AAD 同PI 有著相似的熒光特性,但其發(fā)射波譜較PI 窄,對(duì)其他檢測(cè)通道的干擾更小,在多色熒光分析中是PI 的最佳替代品,可與Annexin V- APC 聯(lián)合使用。
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)(不推薦用于檢測(cè)組織樣本)。
注意事項(xiàng):
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例,也受作用時(shí)間的影響,因此當(dāng)樣品較多時(shí)測(cè)定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色,需避光保存,長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí),請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
Potassium Phosphate Stock Solution (500 mM, pH 8。0) ( L) Potassium Phosphate Stock Solution (500 mM, pH 8。0)
L5,04 (50 mg) 2[4[3(4acetyl3hydroxy2propylphenoxy)propoxy]phenoxy]acetic acid
Mubritinib (00 mg) [4[4[[2[(E)2[4(trifluoromethyl)phenyl]ethenyl]4oxazolyl]methoxy]phenyl]butyl]H,2,3triazole; TAK 5; Mubritinib
(±)9HODE (00 ug) (±)9hydroxy0E,Zoctadecadienoic acid; (±)9HODE
Dynasore (25 mg) 3hydroxy2[(3,4dihydroxyphenyl)methylene]hydrazide2naphthalenecarboxylic acid; Dynasore
Biotinylated Bovine Serum Albumin (BiotinLCBSA) (3 biotin/BSA) Biotinylated Bovine Serum Albumin (BiotinLCBSA) (3 biotin/BSA)
遠(yuǎn)藤氏瓊脂培養(yǎng)基250克RT
6022嘧啶2Bromopyrimidine
磺胺嘧啶鈉shēng huà shì jì容量:00克
2.3二安基97% 2,3DIcMINOncphclqnq
蘇丹Ⅳshēng huà shì jì容量:250毫克
DL乳酸shēng huà shì jì容量:00克
Erythromycin 5g/25g原裝/00g原裝 INALCO5828
扶化釹25克RT
錄安T;錄亞明 T;錄安基本砜?jī)?nèi);N錄4本磺酰安內(nèi)鹽 ChlorcMinq T;ChlorcMinq T trihydrctq;wo7ium ptoluqnqsulfonchlorcMidq;NChloro4toluqnqsulfoncMidq wo7ium sclt;NChloroptoluqnqsulfoncMido wo7ium;Chlorczqnq;Chlorczonq;TolcMinq 7080204
;敲撗跄懰徕c Sodium Taurodeoxycholate (≥%,TLC) 209 G 通用試劑
小鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員(PV)ELISA試劑盒 ,英文名: PV ELISA Kit
犬血栓素B2(TXB2)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 96T/48T
犬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒 Canine Cardiac oponin Ⅰ,cTn-Ⅰ ELISA kit
英文名稱HumanHistoneDeacetylaseELISAKit人組織蛋白去乙;(HD)規(guī)格:96T/48T
超聲化鮭魚精單鏈DNA0毫升
RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISA試劑盒大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 ,英文名: β-EPR ELISA Kit
大鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA檢測(cè)試劑盒RatOsteoprotegerin,OPGELISAKIT 96T/48T
人PC4,SFRS互動(dòng)蛋白(PSIP)免疫試劑盒 Human PSIP ELISA kit
英文名稱MousesVCAM-ELISAKit小鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子(sVCAM-)規(guī)格:96T/48T
胞核微型RNA(Pre-RNA)超濾法分離試劑盒0次
rabbitTestoterone,TELISA試劑盒兔子睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Annexin V-APC/7-AAD雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(完全培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
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