Annexin V-APC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細(xì)胞凋亡早期,細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將Annexin V 進(jìn)行熒光素APC 標(biāo)記,以標(biāo)記了的Annexin V 作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。\
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)(不推薦用于檢測(cè)組織樣本)。
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑詳細(xì)說明:
注意事項(xiàng)
. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿防護(hù)服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05,,不推薦用于檢測(cè)組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽性,而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán),而影響檢測(cè)?蓪⒁让赶蠹(xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進(jìn)一步的損傷。
6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅,請(qǐng)不要固定樣品。
7. 因檢測(cè)細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測(cè)儀器不同,因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測(cè)均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對(duì)照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好?朔藝(guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨(dú)特的溶膠液/結(jié)合液配方,將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一,因此一個(gè)試劑盒可以運(yùn)用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購(gòu)買多種試劑盒的費(fèi)用,
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測(cè)pH值變化從而達(dá)到最佳結(jié)合效果,大大提高回收效率。
5.改進(jìn)的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
操作步驟:
、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的 完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Potassium Phosphate Stock Solution (500 mM, pH 8。0) (250 mL) Potassium Phosphate Stock Solution (500 mM, pH 8。0)
PRIMAMET ( mg) APR 2; 2(hydroxymethyl)2(methoxymethyl)azabicyclo[2.2.2]octan3one
Mubritinib (5 mg) [4[4[[2[(E)2[4(trifluoromethyl)phenyl]ethenyl]4oxazolyl]methoxy]phenyl]butyl]H,2,3triazole; TAK 5; Mubritinib
(±)9HODE (500 ug) (±)9hydroxy0E,Zoctadecadienoic acid; (±)9HODE
Dynasore (5 mg) 3hydroxy2[(3,4dihydroxyphenyl)
Annexin V-APC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒methylene]hydrazide2naphthalenecarboxylic acid; Dynasore
Biotinylated Bovine Serum Albumin (BiotinLCBSA) (3 biotin/BSA) Biotinylated Bovine Serum Albumin (BiotinLCBSA) (3 biotin/BSA)
改良嶙酸鹽緩沖液shēng huà shì jì容量:RT0克
082芴2Bromofluorene
對(duì)胺00克
2,3二錄本加醋 2,3Dichlorobqnzoic ccid 203
癸酸500毫克
DL乳酸鈉5克2~8℃
(多聚蛋白胨)
二乙基乙酰與米酸酯,英文名或英文縮寫:Dietxyl acetamidomalonate,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:5毫克
2,2二羌基二流代6,6聯(lián) 6xy7noXY2NcPHTHYL DISULFIDq 6088
聚醇縮,英文名或英文縮寫:PVF,級(jí)別:AR,99%,規(guī)格:5克
小鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員2(PV2)ELISA試劑盒 ,英文名: PV2 ELISA Kit
犬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T
犬心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒 Canine cardiac isoform of opnin T,c ELISA Kit
英文名稱HumanmajorhistocompatibilitycomplexELISAKit人組織相容性復(fù)合物(MHC)規(guī)格:96T/48T
超強(qiáng)免疫化學(xué)封閉溶液0毫升
RatGlycatedhemoglobinAc,AcELISA試劑盒大鼠糖化血紅蛋白Ac(Ac)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 人維生素B6(VB6)ELISA試劑盒
HumanCollagenaseTypeIIELISAKit 人膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanc-fosELISA試劑盒人c-fosELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米MON863品系基因定量檢測(cè)試劑盒20次
Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit人絲氨酸/蘇氨酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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