中文名稱(chēng):
Annexin V-FITC/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng):Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:0T|20T|50T|00T
發(fā)貨周期:~3天
Annexin V-FITC/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細(xì)胞凋亡早期,細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴(lài)性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V被作為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將Annexin V 進(jìn)行熒光素FITC 標(biāo)記,以標(biāo)記了的Annexin V 作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種核酸染料,它不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜,但對(duì)凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞,PI 能夠透過(guò)細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將Annexin V 與PI 匹配使用,就可以將處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)(不推薦用于檢測(cè)組織樣本)。
注意事項(xiàng):
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例,也受作用時(shí)間的影響,因此當(dāng)樣品較多時(shí)測(cè)定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色,需避光保存,長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí),請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
Potassium Phosphate Stock Solution (500 mM, pH 9。0) (250 mL) Potassium Phosphate Stock Solution (500 mM, pH 9。0)
PRIMAMET (5 mg) APR 2; 2(hydroxymethyl)2(methoxymethyl)azabicyclo[2.2.2]octan3one
2,4,6Trimethoxyamphetamine (hydrochloride) (5 mg) 2,4,6trimethoxyαmethylbenzeneethanamine, monohydrochloride; TMA6; 2,4,6Trimethoxyamphetamine (hydrochloride)
(±)9HODE cholesteryl ester (50 ug) (±)9hydroxy0E,Zoctadecadienoic acid, cholesteryl ester; (±)9HODE cholesteryl ester
2CG (hydrochloride) (5 mg) 2,5dimethoxy3,4dimethylbenzeneethanamine, monohydrochloride; 3,4Dimethyl2,5dimethoxyphenethylamine; 2CG (hydrochloride)
Biotinylated Bovine Serum Albumin (BiotinLCBSA) ( biotin/BSA) Biotinylated Bovine Serum Albumin (BiotinLCBSA) ( biotin/BSA)
SCHAEDLER瓊脂25克RT
22乙基,3己二醇;2乙基3丙基,32etxyl,3hexanediol;Ethohexadiol;Octylene glycol;Rutgers 6
紅細(xì)胞稀釋液(計(jì)數(shù)液)shēng huà shì jì容量:公斤
2.3二錄炳醇 2,3DICHLOROPROPcNOL 39
司盤(pán)60shēng huà shì jì容量:2~8℃25毫克
DL絲酸shēng huà shì jì容量:00克
35MonoethanolaMine;etxylolaMine;2AMinoethanol;βAMinoetxyl alcohol;ColaMine
本基瓊脂糖凝膠CL4Bshēng huà shì jì容量:00毫克
2甲基 ,≥.0% 25ML 通用試劑
間 4Iodoaniline,98% 0 5G 通用試劑
小鼠轉(zhuǎn)錄激活因子5(ATF5)ELISA試劑盒 ,英文名: ATF5 ELISA Kit
犬雌二醇(E2)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineEsadiol,E2ELISAKit 96T/48T
犬胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)免疫試劑盒 Dog TSLP ELISA Kit
英文名稱(chēng)Humaissue-typePlasminogenActivator(t-PA)ELISAkit人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
超強(qiáng)AP酶聯(lián)檢測(cè)封閉溶液0毫升
Ratglucoprotein30,gp30ELISA試劑盒大鼠糖蛋白30(gp30)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat growth factor (GH) ELISA Kit 大鼠生長(zhǎng)因子(GH)ELISA試劑盒
HumanpreptinELISAKit 人preptinELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanchaperonin0,CPN0ELISA試劑盒人伴侶蛋白0(CPN0)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米MON863品系基因定性檢測(cè)試劑盒20次
humanserine/cysteinepeptidaseinhibitorcladeAmember3G,Serpina3gELISAKit人絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G(Serpina3g)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
Annexin V-FITC/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(完全培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
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