血液單核白細(xì)胞/淋巴細(xì)胞分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

 

主要用途

 

YIJI血液單核白細(xì)胞/淋巴細(xì)胞分離試劑是一種旨在通過聚糖和泛影葡胺混合液，達(dá)到特定比重，然后離心分層以獲得純化完整的單核白細(xì)胞/淋巴細(xì)胞的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。可以被用于單核白細(xì)胞/淋巴細(xì)胞的分離、鑒定、染色、標(biāo)記、培養(yǎng)、DNA萃取、線粒體分離、細(xì)胞因子測定和細(xì)胞流式儀分析等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡易，分離出色，性能穩(wěn)定，細(xì)胞活性保證。

 

技術(shù)背景

 

全血溶液含有血清、各種蛋白因子、無核血紅細(xì)胞、血小板、多核白細(xì)胞和單核白細(xì)胞等。為了獲得純化完整的單核白細(xì)胞/淋巴細(xì)胞，采用Boyum（1968）的比重（1.077克/毫升）離心技術(shù)，可以方便快速地從全血和骨髓中分離。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

 

YIJI分離液（Reagent A）     50毫升

產(chǎn)品說明書  1份

 

保存方式

 

保存在4℃冰箱里，有效保證6月

 

用戶自備

 

PBS緩沖溶液（GMS12033）：用于清洗淋巴細(xì)胞

淋巴細(xì)胞完全培養(yǎng)液（GMS12137.1）：用于分離后淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)

白細(xì)胞凍存液（GMS10001.2）：用于分離后淋巴細(xì)胞的長期保存

15毫升錐形離心管：用于細(xì)胞操作的容器

50毫升錐形離心管：用于細(xì)胞操作的容器

2毫升無菌塑料吸管：用于抽吸淋巴細(xì)胞層液體

臺式離心機(jī)：用于沉淀細(xì)胞

 

實驗步驟

 

實驗開始前，室溫預(yù)熱YIJI分離液（Reagent A）。然后進(jìn)行下列操作。

 

• 準(zhǔn)備1個無菌的15毫升錐形離心管
• 加入5毫升YIJI分離液（Reagent A）
• 小心沿著管壁，接近分離液層面，非常緩慢地加入5毫升新鮮的EDTA抗凝的全血樣品在YIJI分離液（Reagent A）上面（注意：切記不要攪渾YIJI分離液（Reagent A））
• 小心放進(jìn)臺式離心機(jī)離心30分鐘，速度為1500g（注意：建議離心機(jī)設(shè)置加速和制動均為零）
• 小心取出離心管，切記不要震動
• 可見：最上層為血漿（為淡紅色通明），其次為薄薄的致密白色環(huán)狀層（Buffy Coat），然后為離心液層，最后為紅色沉淀在管底的紅細(xì)胞層
• 小心抽掉白色環(huán)狀層以上三分之二血漿液，切記不要攪動白色環(huán)狀層
• 用2毫升無菌塑料吸管小心吸取白色環(huán)狀層液體
• 移入到新的無菌的50毫升錐形離心管
• 加入48毫升用戶自備的PBS緩沖溶液
• 輕柔上下傾倒混勻
• 放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為200g
• 小心倒掉上清液
• 用手指輕彈離心管2至3下，使白細(xì)胞顆粒群松動
• （選擇步驟）加入5毫升用戶自備的淋巴細(xì)胞完全培養(yǎng)液，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)
• （選擇步驟）或加入1毫升用戶自備的白細(xì)胞凍存液，放進(jìn)－80℃凍存
• （選擇步驟）或即刻進(jìn)行各種后續(xù)實驗（包括白細(xì)胞分離、鑒定、染色、標(biāo)記、DNA萃取、線粒體分離、細(xì)胞因子測定和細(xì)胞流式儀分析等）

 

注意事項

 

• 本產(chǎn)品為10次操作（5毫升全血/次）
• 所有操作均須無菌狀態(tài)下進(jìn)行
• 操作時，須戴手套
• 操作時，在室溫下進(jìn)行
• 使用時，切莫污染母液
• 建議使用新鮮全血
• 全血樣品采集須使用血液抗凝液 （參見訂購信息）
• 如果血液出現(xiàn)凝塊，不宜進(jìn)行分離操作
• 全血樣品和YIJI分離液（Reagent A）的使用比例為1：1，即1毫升全血，加1毫升YIJI分離液（Reagent A）；如需要增加或減少全血量，則按比例相應(yīng)增加或減少YIJI分離液（Reagent A）
• 本產(chǎn)品細(xì)胞回收率70％以上，細(xì)胞存活率98％以上
• 本公司提供系列血液研究試劑產(chǎn)品

  

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

 

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離細(xì)胞活性保證

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