血白細胞分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

 

主要用途

 

YIJI血白細胞分離試劑是一種旨在通過化學(xué)方法來溶解采集在EDTA等處理的全血樣品中的血紅細胞，然后離心去除以獲得純化完整白細胞的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的�？梢员挥糜诎准毎�分離、鑒定、染色、標記、培養(yǎng)、DNA萃取、線粒體分離、細胞因子測定和細胞流式儀分析等研究。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡易，分離出色，性能穩(wěn)定，白細胞活性保證。

 

技術(shù)背景

 

全血溶液含有血清、各種蛋白因子、無核血紅細胞、血小板、多核白細胞和單核白細胞等。為了獲得純化的完整白細胞，必須去除非白細胞成分，特別是紅細胞。采用溶解方法可以獲得總白細胞，而采用比重離心技術(shù)，則可以獲得較為單一的白細胞種類。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

 

YIJI分離液（Reagent A）     100毫升

YIJI保存液（Reagent B）     100毫升

產(chǎn)品說明書  1份

 

保存方式

 

保存在4℃冰箱里，有效保證6月

 

用戶自備

 

白細胞完全培養(yǎng)液（GMS12052.2）：用于分離白細胞的培養(yǎng)

白細胞凍存液（GMS10001.2）：用于白細胞的長期保存

15毫升錐形離心管：用于細胞操作的容器

臺式離心機：用于沉淀細胞

 

實驗步驟

 

實驗開始前，室溫預(yù)熱的YIJI分離液（Reagent A），同時4℃預(yù)冷YIJI保存液（Reagent B）。然后進行下列操作。

 

• 準備1個無菌的15毫升錐形離心管
• 輕輕混勻新鮮的EDTA等抗凝的全血樣品
• 移出2毫升全血樣品到15毫升錐形離心管
• 加入10毫升室溫預(yù)熱的YIJI分離液（Reagent A）
• 輕輕上下傾倒離心管5次，確保充分混勻
• 室溫下孵育4分鐘，期間輕輕上下傾倒離心管數(shù)次（注意：肉眼可能觀察到血液顏色由不透明紅色到清澈紅色的變化）
• 放進臺式離心機離心5分鐘，速度為300g
• 小心抽掉上清液，留下500微升液體，以防抽掉白細胞顆粒群
• 用手指輕彈離心管2至3下，使白細胞顆粒群松動
• 即刻加入5毫升4℃預(yù)冷的YIJI保存液（Reagent B）
• 用移液管輕輕抽吸5至10次，使白細胞顆粒群松散和充分混勻
• （選擇步驟）移出10微升白細胞混勻物到血細胞計數(shù)器樣品池里
• （選擇步驟）在一般光學(xué)顯微鏡下，觀察并計數(shù)
• 放進臺式離心機離心5分鐘，速度為300g
• 小心抽掉上清液
• 用手指輕彈離心管2至3下，使白細胞顆粒群松動
• （選擇步驟）加入5毫升用戶自備的白細胞完全培養(yǎng)液，進行細胞培養(yǎng)
• （選擇步驟）或加入1毫升用戶自備的白細胞凍存液，放進－80℃凍存
• （選擇步驟）或即刻加入5毫升4℃預(yù)冷的YIJI保存液（Reagent B），進行后續(xù)實驗（包括白細胞分離、鑒定、染色、標記、DNA萃取、線粒體分離、細胞因子測定和細胞流式儀分析等）

 

注意事項

 

• 本產(chǎn)品為10次操作（2毫升全血/次）
• 所有操作均須無菌狀態(tài)下進行
• 操作時，須戴手套
• 建議使用新鮮全血
• 建議全血樣品和YIJI分離液（Reagent A）充分混勻，否則造成血紅細胞的不完全溶解
• 建議全血樣品和YIJI分離液（Reagent A）孵育時間不得超過5分鐘，以防白細胞損害
• 全血樣品和YIJI分離液（Reagent A）的使用比例為1：5，即1毫升全血，加5毫升YIJI分離液（Reagent A）；如需要增加或減少全血量，則按比例相應(yīng)增加或減少YIJI分離液（Reagent A）
• 每毫升全血平均可獲得2.5 X 10⁶白細胞
• 本公司提供系列血液研究試劑產(chǎn)品

  

質(zhì)量標準

 

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定白細胞分離效果滿意
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定活性保證

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