本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人NGAL抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的人NGAL與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人NGAL抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素�？谷薔GAL抗體與結(jié)合在包被抗體上的人NGAL結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值，人NGAL濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中人NGAL的濃度。

試劑盒組成

樣品收集:
1. 血清：全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。
2. 血漿：抗凝劑推薦使用EDTA-Na2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂樣品。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。
5. 其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測
具體處理方法可參考：http://www.elabscience.cn/index.php/resources/view/aid/17671.jsp  
6. 樣品應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。
7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測的可保存于4℃，若不能及時(shí)檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1個(gè)月內(nèi)檢測)，或-80℃（6個(gè)月內(nèi)檢測），避免反復(fù)凍融。
8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品最高值，請根據(jù)實(shí)際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋（建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定稀釋倍數(shù)）。

試驗(yàn)所需自備物品:
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙 

結(jié)果判斷:
1.以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2. 推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度，乘以稀釋倍數(shù)；亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
3. 若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限，應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測，計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

更多詳情;請點(diǎn)擊官網(wǎng)： http://www.elabscience.cn

公司簡介
名稱：武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司
網(wǎng)址：www.elabscience.cn
電話：400-999-2100
郵箱：marketing@elabscience.cn
地址：武漢市高新大道858號光谷生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)園二期B18棟

        武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司（Elabscience Biotechnology Co.,Ltd.）成立于2011年，是一家專注于為客戶提供細(xì)胞檢測試劑、工具及解決方案的高新技術(shù)企業(yè)，總部位于國家生物產(chǎn)業(yè)基地——武漢光谷生物城，建有美國分公司與休斯頓研發(fā)中心，主要產(chǎn)品為流式抗體、細(xì)胞功能檢測試劑盒、代謝測定試劑盒、ELISA試劑盒、蛋白抗體類試劑，均通過ISO9001國際認(rèn)證及歐盟CE認(rèn)證，已暢銷至全球150多個(gè)國家和地區(qū)。

        武漢伊萊瑞特是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體的綜合性生物公司，擁有普諾賽（Pricella）、戴安（DIA•AN）、伊萊瑞特（Elabscience）、優(yōu)恩（Uni-science）四個(gè)子品牌，業(yè)務(wù)范圍涉及流式抗體、細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑、細(xì)胞功能檢測、細(xì)胞代謝檢測、抗體蛋白原料、臨床用IVD產(chǎn)品等

        公司現(xiàn)有辦公面積12000㎡+，專業(yè)實(shí)驗(yàn)室15000㎡+，擁有萬級GMP凈化車間和質(zhì)量管理體系，形成完備的實(shí)驗(yàn)硬件設(shè)施和技術(shù)體系�，F(xiàn)有員工700余人，由碩博比例超30%的高學(xué)歷人才領(lǐng)隊(duì)，組成專業(yè)的研發(fā)和技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊(duì)。

        Elabscience®集中上下游產(chǎn)業(yè)鏈優(yōu)勢，自主建立了蛋白表達(dá)、免疫學(xué)、細(xì)胞模型與功能檢測、細(xì)胞代謝檢測、抗體制備等五大特色技術(shù)平臺，通過卓越的研發(fā)實(shí)力與高標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量管控體系，為全球科研用戶提供專業(yè)可靠的實(shí)驗(yàn)試劑與科研服務(wù)。
        未來，Elabscience®將以細(xì)胞檢測試劑為基石，以流式檢測為突破口，加速新品研發(fā)與市場拓展，持續(xù)提升客戶體驗(yàn)，助推生命科學(xué)及健康領(lǐng)域取得新突破。

超14300篇+SCI文獻(xiàn)選擇

自2012年第一篇引用文獻(xiàn)問世，至2023年12月末，Elabscience®已協(xié)助各地科研工作者發(fā)表超14,300篇SCI文獻(xiàn)，包括行業(yè)頂級期刊Nature Medicine, Nature, Cell, Signal Transduction and Targeted Therapy, Circulation, Molecular Cancer, Immunity, Advanced Materials等，總影響因子（IF）68686，其中IF≥30的文獻(xiàn)超40篇，最高影響因子為66.849，發(fā)文單位包含北京大學(xué)、中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)、浙江大學(xué)、斯坦福大學(xué)、耶魯大學(xué)、柏林夏里特大學(xué)等國內(nèi)外各大高校。
每年引用文獻(xiàn)數(shù)量持續(xù)增長，保持逐年30%+高增長率，可以預(yù)見，Elabscience®產(chǎn)品將幫助更多科研工作者發(fā)表高質(zhì)量SCI論文。

公司發(fā)展歷程：

• 2011   公司成立，ELISA試劑盒進(jìn)入國內(nèi)市場
• 2012    搭建五大技術(shù)平臺，國際市場擴(kuò)張
• 2015    榮獲國家"高新技術(shù)企業(yè)"認(rèn)證，抗體和蛋白進(jìn)入市場
• 2016    美國分公司成立，代謝檢測試劑盒進(jìn)入市場
• 2017    入駐光谷生物城，流式研發(fā)平臺搭建
• 2018    流式抗體正式推入市場，細(xì)胞和相關(guān)試劑盒進(jìn)入市場
• 2019    被CiteAb評為 "值得推薦的ELISA試劑盒供貨商"
• 2021    被CiteAb評為 "值得推薦的抗體供貨商"
• 2022    入選國家級 "專精特新小巨人"