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人IL-1ra/IL-1F3酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
英文名稱(chēng):Human IL-1ra/IL-1F3 (Interleukin 1 Receptor Antagonist) ELISA Kit總訪問(wèn):274
國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口:國(guó)產(chǎn)半年訪問(wèn):2
產(chǎn)地/品牌:Elabscience(伊萊瑞特)產(chǎn)品類(lèi)別:免疫學(xué)/診斷檢測(cè)試劑
規(guī)       格:96T 最后更新:2019-4-3
貨       號(hào):E-EL-H0089c
CAS   號(hào):
參考報(bào)價(jià):詢價(jià)
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銷(xiāo)售商: 武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司 查看該公司所有產(chǎn)品 >>
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本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人IL-1ra/IL-1F3抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的人IL-1ra/IL-1F3與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人IL-1ra/IL-1F3抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素?谷薎L-1ra/IL-1F3抗體與結(jié)合在包被抗體上的人IL-1ra/IL-1F3結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過(guò)氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值,人IL-1ra/IL-1F3濃度與OD450值之間呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中人IL-1ra/IL-1F3的濃度。

試劑盒組成

中文名稱(chēng)

英文名稱(chēng)

規(guī)格

保存

ELISA酶標(biāo)板(可拆卸)

Micro ELISA  Plate(Dismountable)

8×12 / 8×6*

4℃/-20℃ #

凍干標(biāo)準(zhǔn)品

Reference Standard

2/1 支*

4℃/-20℃ #

標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液

Reference Standard & Sample Diluent

1瓶 20mL/12mL*

4℃

濃縮生物素化抗體

Concentrated Biotinylated Detection Ab

1支 120μL/70μL*

4℃/-20℃ #

生物素化抗體稀釋液

Biotinytated Detection Ab Diluent

1瓶 10mL/6mL*

4℃

濃縮HRP酶結(jié)合物

Concentrated HRP Conjugate

1支 120μL/70μL*

4℃(避光)

酶結(jié)合物稀釋液

HRP Conjugate Diluent

1瓶 10mL/6mL*

4℃

濃縮洗滌液(25×)

Concentrated Wash Buffer (25×)

1瓶 30mL/16mL*

4℃

底物溶液(TMB)

Substrate Reagent

1瓶 10mL/6mL*

4℃(避光)

反應(yīng)終止液

Stop Solution

1瓶 10mL/6mL*

4℃

封板覆膜

Plate Sealer

5/3 張*

 

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

Product  Description

1 份

 

質(zhì)檢報(bào)告

Certificate of Analysis

1 份

 

特別說(shuō)明
*: [96T/48T](打開(kāi)包裝后請(qǐng)及時(shí)檢查所有物品是否齊全完整)
#: 一周內(nèi)使用可存于4℃,需長(zhǎng)時(shí)間存放或多次使用建議存于-20℃.   

 

 

樣品收集:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原,無(wú)內(nèi)毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血,高血脂樣品。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè)。
5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè)
具體處理方法可參考:http://www.elabscience.cn/index.php/resources/view/aid/17671.jsp  
6. 樣品應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。
7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃,若不能及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)),或-80℃(6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)),避免反復(fù)凍融。
8. 如果您的樣品中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品最高值,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋?zhuān)ńㄗh先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù))。

試驗(yàn)所需自備物品:
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙 

結(jié)果判斷:
1.以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2. 推薦使用專(zhuān)業(yè)的曲線制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,乘以稀釋倍數(shù);亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
3. 若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測(cè),計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

 

更多詳情;請(qǐng)點(diǎn)擊官網(wǎng): http://www.elabscience.cn

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