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英文名:TMB-2HCl; 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine dihydrochloride
別名:TMB dihydrochloride;
品牌:Seebio
CAS:64285-73-0
級(jí)別:>99.0%
分子式:C16H20N2 . 2HCl.xH2O
分子量:331.27
外觀:tablet
用于酶聯(lián)免疫吸附分析的過(guò)氧化物酶底物
3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺 (TMB) 是一種適用于酶聯(lián)免疫吸附分析的過(guò)氧化物酶底物。底物產(chǎn)生一種可溶性淡藍(lán)色終產(chǎn)物,該產(chǎn)物可通過(guò)分光光度法在 370 或 620-650nm 處讀取?捎 2M H2SO4 終止 TMB 反應(yīng)(變成黃色),并在 450nm 處讀取數(shù)據(jù)。
白色或微紅色粉末,測(cè)定過(guò)氧化氫酶的TMB水溶性產(chǎn)品,2-8℃冷藏,避光.
TMB是一種脂溶性較強(qiáng)的基團(tuán),因此容易進(jìn)入細(xì)胞與細(xì)胞器中的HRP反應(yīng),且由于這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產(chǎn)生粗大的、深蘭色沉淀物,這使得TMB成為組化實(shí)驗(yàn)中的一種很好的發(fā)色團(tuán)。同時(shí)反應(yīng)產(chǎn)物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反應(yīng)進(jìn)行。
TMB的反應(yīng)產(chǎn)物為深藍(lán)色,利于光鏡觀察,且反應(yīng)產(chǎn)物越聚越大,常超出單個(gè)細(xì)胞器的范圍(而DAB則被限制在其內(nèi)),故TMB反應(yīng)的檢測(cè)閾較低。由于上述優(yōu)點(diǎn),目前TMB常用于光鏡及超微結(jié)構(gòu)水平的HRP及HRP-WGA神經(jīng)投射的研究。需要注意的是:TMB顯色液中的A液和B液應(yīng)在2h內(nèi)新鮮配制。另外,TMB是一種較強(qiáng)的皮膚刺激劑,并有致癌的潛在可能,故使用時(shí)應(yīng)帶手套及在通風(fēng)條件下操作。TMB經(jīng)HRP作用后共產(chǎn)物顯藍(lán)色,目視對(duì)比鮮明。TMB性質(zhì)較穩(wěn)定,可配成溶液試劑,只需與H2O2溶液混和即成應(yīng)用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有無(wú)致癌性等優(yōu)點(diǎn),因此在ELISA中應(yīng)用日趨廣泛。