目錄號 規(guī)格 價格 說明書下載 M001-01A 28000U 120元 M001-01B A包裝×5 540元

· T4 DNA 連接酶說明
T4 DNA連接酶常用于催化雙鏈DNA平末端或互補粘性末端之間的連接反應(yīng)，也能催化雙鏈RNA 5’-磷酸末端和3’-羥基末端間的連接。還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA雜交雙鏈中的單鏈切口。以上反應(yīng)均需消耗ATP。

· T4 DNA 連接酶用途

DNA片段和載體DNA的連接。（參見欣百諾實驗方案）。
DNA片段和Linker或Adaptor DNA的連接。

· 產(chǎn)品特點

隨T4 DNA 連接酶附帶10×T4 DNA Ligation Buffer及獨特配方的2X Quick Ligation Buffer提供給您更多的選擇：而使用10×T4 DNA Ligation Buffer，16℃過夜連接可獲得最高的連接效率；使用快連buffer在室溫(25℃)下，僅需5分鐘即可完成粘性末端或平滑末端DNA片段的連接反應(yīng)。

· 質(zhì)量保證

本T4 DNA 連接酶經(jīng)多次柱純化，SDS-PAGE膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶；PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留，無核酸內(nèi)、外切酶污染。

· 使用建議

粘末端的連接反應(yīng): 插入片段和載體的摩爾濃度比特別重要，此比例在2-6之間最好，低于2:1就會導(dǎo)致較低的連接效率，高于6:1則會導(dǎo)致多個插入。摩爾比請按載體與插入片段DNA濃度及分子大小來計算。
平滑末端的連接反應(yīng)： 平滑末端的連接反應(yīng)與突出末端相比反應(yīng)較慢(其Km值約為突出末端的100倍)。進行平滑末端的連接反應(yīng)時，可提高DNA濃度，將使用酶量增加到突出末端量的2～5倍左右。
向粘�；蚴删�體進行連接反應(yīng)：可使載體和插入DNA的摩爾比調(diào)整為1:1，同時增大DNA濃度以便取得良好效果。(0.05-0.1 μg／ul以上)
反應(yīng)溫度： 該酶的最適溫度為37℃，由于熱穩(wěn)定性較差，因此長時間反應(yīng)時通常需在16℃下進行。若反應(yīng)1-2小時左右的話也可在室溫下進行反應(yīng)。
抑制劑：T4 DNA連接酶要求Mg2+，因此螯合Mg2+的EDTA的存在會阻礙反應(yīng)。將溶解于含有高濃度EDTA緩沖液中的DNA準備作為樣品使用時，最好先用滅菌蒸餾水或TE緩沖液進行置換。


· 快速連接步驟
1）取50 ng載體和3倍摩爾量的插入片段，用雙蒸水調(diào)整總體積為10 μl。
2）加入10 μl 2×Quick Ligation Buffer，混勻。
3）加入0.5-1 μl T4 DNA連接酶，充分但輕柔混勻（切勿劇烈震蕩，可能導(dǎo)致酶部分失活）。
4）稍事離心，置于室溫 (25℃) 作用5分鐘。
5）冰上放置，轉(zhuǎn)化（如不立即進行轉(zhuǎn)化實驗請凍存于-20℃）。　

· 其他說明
詳細內(nèi)容請參考說明書

  近岸蛋白質(zhì)科技有限公司(前身上海欣百諾生物)是一家專門從事重組蛋白質(zhì)領(lǐng)域研發(fā)外包的高技術(shù)服務(wù)企業(yè)，為國內(nèi)外客戶提供生物活性酶、細胞因子等各種重組蛋白質(zhì)表達、純化服務(wù)及工藝開發(fā)。 

  近岸總公司位于太湖之濱的吳江科技創(chuàng)業(yè)園，在吳江建立了重組蛋白質(zhì)生產(chǎn)基地，在上海張江開發(fā)區(qū)建立了現(xiàn)代化的蛋白質(zhì)研究中心，是上海市首批技術(shù)先進型服務(wù)企業(yè)，通過ISO9001:2008國際質(zhì)量管理體系認證。主要客戶來自全球16個國家和地區(qū)，包括6家全球前10位的制藥企業(yè)、數(shù)百家其他企業(yè)與科研機構(gòu)，公司產(chǎn)品及服務(wù)已被數(shù)十篇SCI學術(shù)論文引用。

    公司提供基因工程、蛋白質(zhì)表達、發(fā)酵純化、質(zhì)量檢測、蛋白結(jié)晶、活性檢測及后期加工處理等重組蛋白質(zhì)相關(guān)的全套技術(shù)服務(wù)，積累了兩千余種不同蛋白質(zhì)技術(shù)開發(fā)經(jīng)驗。公司擁有大腸桿菌、酵母、昆蟲細胞、哺乳動物細胞等表達體系和數(shù)十種純化手段，提供毫克至克級、從抗原到高純度活性蛋白。公司提供包括N端測序、質(zhì)譜、HPLC、活性檢測等多種質(zhì)量控制手段。

     8年來，基于公司出色的重組蛋白質(zhì)制備平臺，近岸蛋白質(zhì)科技研發(fā)生產(chǎn)的細胞因子、酶試劑產(chǎn)品憑借其優(yōu)良的品質(zhì)、極高的性價比贏得了國內(nèi)外客戶及銷售商的認可，目前在海外擁有十幾家細胞因子與生物試劑銷售商。

    用最專業(yè)的技術(shù)全力解決客戶問題是公司秉承的服務(wù)理念；用做藥的標準提供產(chǎn)品和服務(wù)是我們的質(zhì)量之本。近岸人秉承著讓生命科學研究更便捷、更高效、更可靠的宗旨，充分借鑒市場原有產(chǎn)品的優(yōu)點，并不斷加以改進，使我們的產(chǎn)品能更好的為生命科學工作者服務(wù)。