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                                                              English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
                                                              當(dāng)前位置 > 產(chǎn)品目錄 > 試劑 > 分子生物學(xué)試劑 > Pfu DNA 聚合酶
                                                              Pfu DNA 聚合酶
                                                              英文名稱:總訪問:689
                                                              國產(chǎn)/進(jìn)口:國產(chǎn)半年訪問:26
                                                              產(chǎn)地/品牌:novoprotein產(chǎn)品類別:分子生物學(xué)試劑
                                                              規(guī)       格:E002 最后更新:2014-2-25
                                                              貨       號:
                                                              CAS   號:
                                                              參考報(bào)價(jià):
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                                                              • 公司簡介

                                                              目錄號 規(guī)格 備注 價(jià)格 說明書下載
                                                              E002-01A 250U 含dNTP 230元
                                                              E002-01B A包裝×5 含dNTP 1035元
                                                              E002-02A 250U 不含dNTP  180元
                                                              E002-02B A包裝×5 不含dNTP  810元
                                                               
                                                              · Pfu DNA 聚合酶內(nèi)容 (250 U)

                                                              Pfu DNA聚合酶(5 U/μl) 50 μl
                                                              dNTP 混合液 (各10 mM) 250 μl
                                                              10 × Pfu Buffer with Mg2+ 1 ml

                                                               

                                                              · Pfu DNA 聚合酶說明
                                                              本酶為Pyrococcus furiosus中分離的pfu DNA pol 基因在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)后經(jīng)多次純化分離而得。Pfu DNA聚合酶具有3’-5’外切酶(校正)活性,當(dāng)聚合反應(yīng)發(fā)生堿基錯配時(shí),聚合酶的校正活性可將錯配的堿基切除。Pfu DNA聚合酶為使用范圍最廣的高保真DNA聚合酶,其錯誤率僅為1.3x10-6,推薦Pfu DNA聚合酶用于需高保真的PCR反應(yīng)。

                                                              · Pfu DNA 聚合酶用途
                                                              用于要求保真度比較高的PCR反應(yīng),包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突變、全基因合成等(參見 Sinobio 實(shí)驗(yàn)方案)。

                                                              · Pfu DNA 聚合酶產(chǎn)品特點(diǎn)
                                                              高保真:Pfu DNA聚合酶是使用最廣泛的高保真酶,其保真度為普通Taq酶的10倍。
                                                              靈敏:可從0.05ng人基因組DNA模板中擴(kuò)增出特定基因片段(圖例一)。
                                                              快捷:PCR反應(yīng)所必需試劑全集于一管之中,數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配置。
                                                              便利:10μl, 25μl 或50μl體系全部適用。

                                                              · 質(zhì)量保證
                                                              經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE檢測純度大于95%;
                                                              PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留,無核酸內(nèi)、外切酶污染。

                                                              · Pfu DNA 聚合酶使用建議

                                                              Pfu DNA聚合酶產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端,無3’端"A"突出,其PCR產(chǎn)物的克隆有兩種方案。
                                                              1. PCR前引物進(jìn)行5’端加磷修飾或?qū)CR產(chǎn)物磷酸化處理后再直接克隆于平滑末端的載體中(參見 Sinobio實(shí)驗(yàn)方案)。
                                                              2. 將產(chǎn)物3’末端加A后再與T-Vector連接(參見 Sinobio 實(shí)驗(yàn)方案)。
                                                              3. 由于Pfu DNA聚合酶的校對活性可引起引物從3′端被部分降解。因此在設(shè)計(jì)引物時(shí)應(yīng)適當(dāng)增加引物的長度,理想的引物長度為20-30堿基。另外為了減少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解,盡量在冰上配置反應(yīng)體系,并最后加入Pfu酶。

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