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SK-MEL-2_人黑素瘤細胞
英文名稱:SK-MEL-2總訪問:93
國產/進口:國產半年訪問:1
產地/品牌:格寧生物產品類別:細胞株/菌種
規(guī)       格:1ml/vial 最后更新:2024-10-9
貨       號:SNB-TC-0840
參考報價:2000
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  • 產品介紹
  • 公司簡介
SK-MEL-2_人黑素瘤細胞
產品信息
細胞名稱: SK-MEL-2_人黑素瘤細胞
種屬來源:   
性別年齡: 60歲,男性
種屬來源:   皮膚
生長特性: 貼壁生長
細胞形態(tài):  多邊形細胞樣
細胞規(guī)格1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養(yǎng)條件:  EMEM +10% fetal bovine serum
37 ℃, 5% CO2
凍存條件90% FBS + 10% DMSO
傳代方法:1:3傳代, 2-3天傳1代
細胞培養(yǎng)操作
干冰運輸:收到細胞后需立即轉入液氮保存、或者-80°C冰箱短期凍存、或者直接復蘇
常溫運輸:收到細胞后,請立即將細胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出,并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代
細胞傳代:細胞密度達80% - 90%,即可進行傳代培養(yǎng)
 
培養(yǎng)瓶中細胞操作步驟
 對于貼壁培養(yǎng)的細胞,寄送前,我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶,以減少產品運輸過程中貼壁細胞的脫落。
  1. 收到細胞后,請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細菌污染。因為運輸過程中存在顛簸,且有些細胞對溫度變化也很敏感,可能存在一些細胞脫落漂浮的情況,這些細胞仍是活細胞,請勿丟棄,可離心富集后傳代使用。
  2. 對于貼壁細胞,在生物安全柜環(huán)境中,用真空泵去除培養(yǎng)瓶中多余的培養(yǎng)基,至剩余5-8mL 左右,隨后根據培養(yǎng)基選擇合適的CO2含量的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),擰松瓶蓋。如果細胞已經長滿培養(yǎng)瓶,請立即傳代。
  3. 對于懸浮的細胞,在生物安全柜環(huán)境中,轉移培養(yǎng)瓶中的細胞至離心管,150 g 離心 5 分鐘,去除上清后,用5 mL培養(yǎng)基吹散細胞,轉移至新的培養(yǎng)瓶中,隨后置于合適的CO2含量的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
 
凍存管細胞操作步驟
注意: 為保證細胞的高活率,請收到產品后,立即解凍培養(yǎng)。
  1. 將凍存管置于37℃水浴中來回晃動,迅速解凍。為避免污染,確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速,大約1分鐘。
  2. 一旦凍存管中液體融化后,立即取出,采用酒精噴拭凍存管表面。從此步開始,后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。
  3. 將凍存管中的液體轉移到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。
  4. 用完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞并轉移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細胞復蘇的存活率,請將培養(yǎng)基在37℃水浴預熱后使用。
  5. 將細胞置于含有合適CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
 
貼壁細胞傳代培養(yǎng)
  1. 吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基,加入PBS潤洗一次。
  2. 加入1 mL 0.25 (w/v) Trypsin-EDTA 溶液,并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育,直至細胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3-5分鐘。
  3. 加入2mL完全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶,并輕輕吹打將細胞從培養(yǎng)瓶表面吹落,并使細胞分散。
  4. 將細胞懸液收集到15mL離心管里,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。取適量的培養(yǎng)基將細胞重懸,轉移到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
懸浮細胞傳代可參考以下方法:
 一、直接傳代法
    1、待懸浮細胞長滿至 80%~90%(細胞懸液變黃),即可傳代;
    2、用吸管吸棄細胞懸液 1 / 2~1 / 3;
    3、加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
 二、離心傳代法(在發(fā)現有細胞碎片的情況下)
    1、將細胞懸液轉移到離心管內;
    2、150 g 離心 5 min,棄去上層清液;
    3、使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細胞;
    4、吸管吸取適量細胞懸液,裝入新的培養(yǎng)瓶,再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
 
細胞凍存操作
1. 1000rpm離心5分鐘去掉上清。加1 mL血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,    DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1 x 106/mL,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
2. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80°C冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。
 
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售后服務
24小時內有支原體污染、細菌污染,免費補發(fā);
一個月內,客戶免責,有問題,免費補發(fā)一株;
一個月內,STR鑒定如有錯誤(提供第三方證明),可全額退細胞款并補償鑒定;
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