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人卵巢癌細胞
COC1
英文名稱:Human Ovarian Cancer Cells總訪問:96
國產(chǎn)/進口:國產(chǎn)半年訪問:2
產(chǎn)地/品牌:廈門/逸漠IMMOCELL產(chǎn)品類別:細胞株/菌種
規(guī)       格:T25瓶/1*10^6 最后更新:2024-2-20
貨       號:IM-H006
參考報價:1200
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  • 產(chǎn)品介紹
  • 公司簡介
細胞介紹
CoC1細胞建系于1993年(熊世鋼等)。細胞于原代培養(yǎng)至第17天首次傳代,以后反復傳代,生物學特性穩(wěn)定?杀磉_多種腫瘤標志物和野生型P53蛋白、突變型P53蛋白。裸鼠接種產(chǎn)生分化差的腺癌。?
?
細胞特性
1)?來源:卵巢癌
2)?形態(tài):圓形或橢圓形,懸浮生長
3)?含量:>1x106 個/mL
4)?污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)?規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
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運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式
(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;
(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
(3)收到細胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。
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細胞用途:
僅供科研使用。
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細胞接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2) 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時,最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度?醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4) 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。
5) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基)。
6)
備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。??收到細胞后第一次傳代建議1:2傳代 。
?
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)
?準備RPMI-1640? 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗1%。
2)
?培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)?凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.?細胞處理:
1)?復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至6ml。
2)?細胞傳代:如果細胞密度達80%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 將細胞懸液按1:2到1:5比例分到新皿中或者瓶中,補加培養(yǎng)基至6ml,放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為例;
1,細胞凍存時,取上清,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min ,1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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