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臺盼藍(lán)染色細(xì)胞存活率檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介:
臺盼藍(lán)染色細(xì)胞存活率檢測試劑盒(Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit)是利用正常的健康細(xì)胞能夠排斥臺盼藍(lán)不被染色即拒染特性,而喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞可以被臺盼藍(lán)染色的原理研制而成。嚴(yán)格來說,臺盼藍(lán)染色檢測的是細(xì)胞膜的完整性,通常認(rèn)為細(xì)胞膜喪失完整性,即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。臺盼藍(lán)染色后,通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù),就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的計(jì)算。
臺盼藍(lán)染色細(xì)胞存活率檢測試劑盒主要由Trypan Blue stain、細(xì)胞膜懸液組成,1ml規(guī)格試劑大約可以染色10次。
自備材料:
1、 胰蛋白酶消化液
2、 顯微鏡
3、 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板
操作步驟(僅供參考):
1、 收集細(xì)胞:
收集帖壁細(xì)胞時(shí)應(yīng)采用胰蛋白酶消化細(xì)胞,收集細(xì)胞。如果收集懸浮細(xì)胞,則可以直接收集細(xì)胞。把收集的細(xì)胞在1000~2000g離心1min,棄上清,用1ml或適當(dāng)試劑(B)重新懸浮起細(xì)胞沉淀。
2、 臺盼藍(lán)染色:
吸取100μl重懸的細(xì)胞到常規(guī)1.5ml或0.5ml離心管內(nèi),加入100μl Trypan Blue stain(2×)輕輕混勻,染色3min(染色時(shí)間可適當(dāng)延長,但不宜超過10min)。
3、 計(jì)數(shù):
吸取少量經(jīng)過染色后的細(xì)胞,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。通常如果要比較精確地進(jìn)行定量,每個(gè)細(xì)胞樣品至需要500個(gè)細(xì)胞,數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。細(xì)胞存活率計(jì)算公式如下:
細(xì)胞存活率=(細(xì)胞總數(shù)-藍(lán)色細(xì)胞數(shù))/細(xì)胞總數(shù)×100%
注意事項(xiàng):
1、 最好在超凈臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作,避免細(xì)菌污染。
2、 臺盼藍(lán)對人體有害,請注意小心操作。
3、 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。