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| 銷售商： 西安百螢生物科技有限公司 | 查看該公司所有產品 >> |
| Ex (nm) | 503 | Em (nm) | 527 |
| 分子量 | - | 溶劑 | Water |
| 存儲條件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
實時聚合酶鏈反應（real-time PCR），也稱為定量聚合酶鏈反應（qPCR），是一種基于聚合酶鏈反應（PCR）的流行的分子生物學實驗室技術。它可以在PCR期間（即實時）檢測目標DNA分子的擴增情況，而不是像常規(guī)PCR那樣在結束時進行檢測。實時PCR可以定量（定量實時PCR）和半定量（即高于或低于一定數(shù)量的DNA分子）（半定量實時PCR）使用。實時PCR中有兩種檢測PCR產物的常用方法，包括（1）結合任何雙鏈DNA的非特異性熒光染料； （2）由寡核苷酸組成的序列特異性DNA探針，所述寡核苷酸用熒光報告物標記，僅在探針與其互補序列雜交后才允許檢測。對于第一種方法，對DNA結合染料進行PCR的實時檢測有兩個要求，即（a）與雙鏈DNA結合時增強熒光；（b）對PCR的抑制作用小。 SYBR Green主要用于各種qPCR應用中。我們最近開發(fā)了新一代的SYBR Green Q4ever Green，用于解決SYBR Green的一些局限性，例如酶抑制。 Q4ever Green可以在PCR中使用，幾乎沒有PCR抑制作用，并提高了靈敏度。 Q4ever Green可用于檢測任何雙鏈DNA序列的擴增。假設您的PCR引物設計合理且反應特性良好，則無需探針，可以減少測定設置和運行成本。作為SYBR Green，主要缺點是它可能產生假陽性信號。即因為Q4ever Green染料與任何雙鏈DNA結合。它也可以與非特異性雙鏈DNA序列結合。設計良好的引物不擴增非靶序列，并進行熔解曲線分析，這一點非常重要。
產品說明書
實驗方案
儲存在-20°C，避光。 按建議存放時，產品自收到之日起至少穩(wěn)定12個月。
工作溶液配制
Q4ever Green工作溶液（50X）
使用水或TE緩沖液稀釋2000X Q4ever Green儲備溶液以制成50X Q4ever Green儲備溶液。
操作步驟
建議使用以下協(xié)議。 如果需要，可以調整方案以達到最佳效果。
設置PCR反應如下：
5 µL 10X聚合酶緩沖液（不含鎂）
2.5 µL的50 mM MgCl2
2 µL 50X Q4ever Green工作溶液
2 µL的5 mM dUTP
1-5個單位的DNA聚合酶
加入所需的cDNA
每個引物100-1000 nM（正向和反向引物的終濃度）
用dH2O將最終體積調整為50 µL。
在熱循環(huán)熒光計上執(zhí)行實時PCR并記錄熒光信號。
