SF-SFM是一種適于昆蟲細胞培養(yǎng)的無血清無蛋白培養(yǎng)基，含有谷氨酰胺。
 
應用：
SF-SFM是一種無血清蛋白培養(yǎng)基，針對Sf9和Sf21昆蟲細胞系的無血清培養(yǎng)而開發(fā)和優(yōu)化。細胞可以從無血清或者添加血清的培養(yǎng)基中直接轉移到SF-SFM中進行傳代培養(yǎng)，而無需經(jīng)過適應。SF-SFM中的培養(yǎng)通�？梢赃_到1×10⁷ cells/ml的細胞密度，細胞活性大95%。
Sf9和Sf21細胞可在SF-SFM培養(yǎng)基中傳代超過20次而活性不降低。
每升培養(yǎng)基含42.1克干粉培養(yǎng)基，干燥避光，2-8°C保存
*注意：該產(chǎn)品僅適于科學研究或者進一步生產(chǎn)，不適于診斷或治療。
 
培養(yǎng)基應用：
·       適于培養(yǎng)Sf9和Sf21細胞
·       適于通過昆蟲細胞桿狀病毒表達系統(tǒng)表達外源蛋白
·       該培養(yǎng)基為無血清無蛋白培養(yǎng)基，并適于生物反應器大規(guī)模培養(yǎng)
·       可以支持昆蟲細胞長期傳代（>20 代）
·       可將其他無血清或者無血清培養(yǎng)基中的細胞直接轉移至該培養(yǎng)基中培養(yǎng)，無須經(jīng)過
傳代培養(yǎng)
·       使用該培養(yǎng)基可獲得高滴度野生型AcNPV
·       含有 Pluronic F-68、谷氨酰胺、碳酸氫鈉
·      42.1 g/L
 
運輸和儲存：
·     包裝中放置冰塊，低溫運輸。
·     干燥避光冷藏（2～8°C）。

細胞適應：
可以通過兩種方式將細胞適應至該培養(yǎng)基中：
1）將在其他培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞直接轉移至SF-SFM中；
2）逐量更換培養(yǎng)基。在細胞適應過程中應取對數(shù)生長中期的細胞，細胞活性>90%。
 
靜置培養(yǎng)：
將方瓶中培養(yǎng)上清去除，添加5 ml新鮮培養(yǎng)基至T-25方瓶中（15 ml/T-75方瓶）。反復吹打后，制備細胞懸液，使用新鮮培養(yǎng)基稀釋至合
適密度，1.2×10⁶ cells/T-25方瓶或者3.6×10⁶ cells/T-75方瓶，置于生化培養(yǎng)箱中， 27±0.5°C培養(yǎng)。正常情況下，經(jīng)過3～4天，匯合度達到100%，進行傳代。
 
懸浮培養(yǎng)：
搖床最高轉速可達135 rpm.
搖床應可放置在生化培養(yǎng)箱中，27±0.5°C，不需要設置濕度和氣體控制。
將搖瓶的蓋子旋松1/4，即可保證搖瓶中氣體交換充分。
在SF-SFM中，Sf9細胞最大細胞密度超過1×10⁷ cells/ml。在正常傳代培養(yǎng)過程中需要每天計數(shù)細胞密度和細胞活性，當活細胞密度達到～4.0×10⁶ cells/ml時，使用預熱后的新鮮培養(yǎng)基（～20°C）將細胞稀釋到1.0～1.5×10⁶ cells/ml。
 
細胞凍存與復蘇
 
凍存：
1.   準備處于對數(shù)生長中期的細胞，細胞活性>90%。
2.   確定需要的細胞數(shù)量和凍存液體積，凍存液中細胞密度應達到 0.5～1.0 × 10⁷ cells/ml。
3.   凍存液由82.5%SF-SFM，7.5% DMSO，10% 胎牛血清組成。凍存液4°C保存。
4.   將培養(yǎng)物100 g離心6 min，去除上清，使用凍存液重懸細胞。
5.   根據(jù)培養(yǎng)規(guī)模將細胞分裝于合適的凍存管中，如4.5 ml～5.0 ml/支。
6.   使用自動化凍存設備或者常規(guī)凍存盒進行凍存。
7.    細胞可以在液氮中長期穩(wěn)定保存，但不確定最長保存期限。
 
復蘇：
1.   將凍存管37°C水浴，迅速解凍，立即噴灑酒精降低其溫度。將解凍后的混合物轉移至250 ml搖瓶中，加入50 ml培養(yǎng)基，置于生化 培養(yǎng)箱中27°C 培養(yǎng)。.
2.   復蘇后前兩次傳代培養(yǎng)，細胞接種密度3×10⁵～1×10⁶ cells/ml最佳；之后可恢復正常傳代。
 
重要信息：
不同批次的SF-SFM培養(yǎng)基溶解后的顏色可能會發(fā)生變化，這主要是培養(yǎng)基中的水解物批間不一致導致的。培養(yǎng)基顏色對培養(yǎng)基的培養(yǎng)效果沒有影響。

 

公司簡介：
       武漢科昊佳生物成立于2011年是一家進口胎牛血清專業(yè)供應商,專注細胞生物學試劑開發(fā)、銷售、服務的高新技術企業(yè)。
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