自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件
14℃或－20℃

產(chǎn)品名稱	赤小豆染料法PCR鑒定試劑盒
英文名稱	Semen phaseoli
規(guī)格	50次

特點：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果
【結(jié)果分析條件設(shè)定】
u 基線（Baseline）設(shè)定：應(yīng)選擇該次實驗指數(shù)擴增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號無較大波動），起始點（Start）應(yīng)避開熒光采集起始階段的信號波動，終止點（End）應(yīng)比最早出現(xiàn)指數(shù)擴增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán)，建議基線設(shè)為6~15。
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值線設(shè)定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴增曲線的最高點。
【質(zhì)控標準】
1.   陰性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陰性，無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct；
2.   陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小于等于35；
3.   以上要求需在一次實驗中同時滿足，否則該次實驗視為無效。
【結(jié)果判斷】
1.   陽性：有明顯的指數(shù)擴增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本；對于可疑樣本建議復核一次，若復核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判定為陽性，否則判定為陰性；
3.   陰性：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1.   實驗室環(huán)境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2.   試劑運輸、保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，可能會導致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
赤小豆染料法PCR鑒定試劑盒注意事項：
建議加樣順序是陰性質(zhì)控品、待檢樣本、陽性質(zhì)控品。4. PCR擴增（擴增區(qū)）
1)      儀器設(shè)置（以ABI Prism 7500為例）
將PCR反應(yīng)管放入PCR儀內(nèi)，按照對應(yīng)順序設(shè)置陰性質(zhì)控品(NTC)、陽性質(zhì)控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM，Quencher Dye為None，參比染料(Passive Reference)為 None。
2  ）    擴增程序
40Cycles
50℃ 10min
95℃ 3min
95℃ 10sec
60℃ 1min
60℃采集熒光信號，反應(yīng)體系為25 μl。 技術(shù)特點：
1準確可靠，臨床雙盲對照試驗＞1000例，結(jié)果與金標準測序法比對，結(jié)果一致性大于99%。
2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速：整個檢測流程只需3小時。
4簡便：試劑盒提供預(yù)混好的試劑，使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結(jié)果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結(jié)合必需完全配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對，在延伸中產(chǎn)生熒光。

 

上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China） 是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。

上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China） 先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學，暨南大學，南京工業(yè)大學，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒；另有針對各種動物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。

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