沉香染料法PCR鑒定試劑盒PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
以下是PCR鑒定試劑盒訂購信息:
產(chǎn)品名稱:
沉香染料法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Lignum aquilariae resinatum
產(chǎn)品規(guī)格:50次
運輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:現(xiàn)貨
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品及特點:
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉片基因組DNA 提取試劑,得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進(jìn)行冰凍、機(jī)械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內(nèi)完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉片和種子。
使用及效果:將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
應(yīng)用案例
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20 μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分.
生長抑素 Somatostatin 3.75 120 pg/mL 0.1
瘦素 Leptin 0.5 16 ng/mL 0.1
四氫葉酸 tetrahydrofolic acid 1.5 48 ng/mL 0.1
松弛素 Relaxin 15 480 pg/mL 1
髓過氧化物酶 myeloperoxidase 15 480 U/L 1
髓磷脂堿性蛋白 myelin basic protein 0.25 8 ng/mL 0.1
髓鞘堿性蛋白抗體 myelin basic protein 0.375 12 ng/mL 0.1
胎盤生長因子 Placental growth factor 5 160 pg/mL 1
糖胺聚糖 glycosaminoglycan 75 2400 ng/mL 10
天冬氨酸蛋白酶 aspartic protease 0.25 8 ng/mL 0.1
天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 Aspartate aminotransferase 10 320 U/L 1
同型半胱氨酸 Homocysteic acid 0.5 16 μmol/L 0.1
透明質(zhì)酸 Hyaluronic acid 6.25 200 ng/mL 1
晚期糖基化終末產(chǎn)物受體 Receptor for advanced glycation end products 0.125 4 ng/mL 0.1
胃泌素 Gastrin 10 320 pg/mL 1
細(xì)胞間粘附分子1 intercellular adhesion molecule 1 7.5 240 ng/mL 1
細(xì)菌脂蛋白 bacteriallipoprotein 25 800 ng/mL 1
腺嘌呤核苷 58-61-7
Adenosine分子式:C10H13N5O4分子量:267.24
9-beta-D-呋喃核糖基腺嘌呤 腺甙 腺苷 腺嘌呤核苷(腺苷) D-腺嘌呤核苷A313 CH
腺嘌呤核苷 58-61-7
Adenosine分子式:C10H13N5O4分子量:267.24
9-beta-D-呋喃核糖基腺嘌呤 腺甙 腺苷 腺嘌呤核苷(腺苷) D-腺嘌呤核苷A313 CH
煙酰胺腺嘌呤雙核苷酸 53-84-9
β-Nicotinamide adenine dinucleotide分子式:C21H27N7O14P2分子量:663.43
輔酶I 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 煙酰胺腺嘌呤二核甘酸輔酶 β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 二磷酸吡啶核苷酸
β-Nicotinamide adenine dinucleotide分子式:C21H27N7O14P2分子量:663.43
煙酰胺腺嘌呤雙核苷酸 53-84-9
沉香染料法PCR鑒定試劑盒輔酶I 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 煙酰胺腺嘌呤二核甘酸輔酶 β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 二磷酸吡啶核苷酸
煙酰胺腺嘌呤雙核苷酸 53-84-9
β-Nicotinamide adenine dinucleotide分子式:C21H27N7O14P2分子量:663.43
輔酶I 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 煙酰胺腺嘌呤二核甘酸輔酶 β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 二磷酸吡啶核苷酸
煙酰胺腺嘌呤雙核苷酸 53-84-9
β-Nicotinamide adenine dinucleotide分子式:C21H27N7O14P2分子量:663.43
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上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!
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