產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉片基因組DNA 提取試劑,得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個(gè)過程簡(jiǎn)單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時(shí)樣品的制備。
1. 快速,整個(gè)過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對(duì)植物組織進(jìn)行冰凍、機(jī)械處理、純化或者DNA的沉淀。運(yùn)輸及保存2. 一管式,在一個(gè)試管內(nèi)完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動(dòng)化,適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉片和種子。
使用及效果:將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
以下是PCR鑒定試劑盒訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱:
車前子染料法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Semen plantaginis
產(chǎn)品規(guī)格:50次
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:現(xiàn)貨
車前子染料法PCR鑒定試劑盒PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
應(yīng)用案例
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購(gòu)本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的長(zhǎng)為 86bp 的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 4 號(hào)管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20 μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分.
尿肌酐 Urine creatinine 0.75 24 μmol/L 0.1
尿激酶型纖溶酶原激活物 urokinase-type plasminogen activator 37.5 1200 pg/mL 1
尿素氮 Urea nitrogen 0.75 24 mmol/L 0.1
凝血酶抗凝血酶復(fù)合物 thrombin-antithrombin complex 15 480 pg/mL 1
凝血酶原片段F1+2 Prothrombin fragment 1+2 0.25 8 nmol/L 0.1
凝血因子Ⅱ coagulation factor Ⅱ 50 1600 U/L 10
皮質(zhì)醇 Cortisol 5 160 ng/mL 1
皮質(zhì)酮;腎上腺酮 Corticosterone 0.5 16 ng/mL 0.1
葡糖氨基葡聚糖 glycosaminoglycans 75 2400 ng/mL 10
前列環(huán)素 PGI2 5 160 pg/mL 1
前列腺素E2 Prostaglandin E2 20 640 pg/mL 1
前列腺素F2a Prostaglandin F2α 7.5 240 pg/mL 1
羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶 HMG-CoA reductase 2.5 80 U/L 0.1
羥脯氨酸 hydroxyproline 37.5 1200 ng/mL 1
去甲腎上腺素 Noradrenaline 3.75 120 ng/mL 0.1
醛固酮 Aldosterone 15 480 pg/mL 1
缺血修飾白蛋白 Ischemia modified albumin 3.75 120 U/mL 0.1
三磷酸脫氧核苷 2'-脫氧腺苷-5'-三磷酸二鈉 2'-脫氧酰苷5'-三磷酸二鈉 5'-脫氧三磷酸腺苷二鈉
腺嘌呤核苷 58-61-7
Adenosine分子式:C10H13N5O4分子量:267.24
9-beta-D-呋喃核糖基腺嘌呤 腺甙 腺苷 腺嘌呤核苷(腺苷) D-腺嘌呤核苷A313 CH
三磷酸脫氧腺苷鈉鹽 74299-50-6
2′-Deoxyadenosine 5′-triphosphate disodium salt分子式:C10H14N5NA2O12P3分子量:535.15
三磷酸脫氧核苷 2'-脫氧腺苷-5'-三磷酸二鈉 2'-脫氧酰苷5'-三磷酸二鈉 5'-脫氧三磷酸腺苷二鈉
腺嘌呤核苷 58-61-7
Adenosine分子式:C10H13N5O4分子量:267.24
5-溴-2'-脫氧尿苷 59-14-3
車前子染料法PCR鑒定試劑盒9-beta-D-呋喃核糖基腺嘌呤 腺甙 腺苷 腺嘌呤核苷(腺苷) D-腺嘌呤核苷A313 CH
5-Bromo-2-deoxyuridine分子式:C9H11BRN2O5分子量:307.1
5-溴去氧脲苷 溴尿苷 溴脲嘧啶苷 5-溴-2ˊ-脫氧尿核苷
5-溴-2'-脫氧尿苷 59-14-3
5-Bromo-2-deoxyuridine分子式:C9H11BRN2O5分子量:307.1
5-溴去氧脲苷 溴尿苷 溴脲嘧啶苷 5-溴-2ˊ-脫氧尿核苷
腺嘌呤核苷 58-61-7
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上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國(guó)科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!
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