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草豆蔻染料法PCR鑒定試劑盒注意事項：
建議加樣順序是陰性質(zhì)控品、待檢樣本、陽性質(zhì)控品。4. PCR擴增（擴增區(qū)）
1) 儀器設(shè)置（以ABI Prism 7500為例）
將PCR反應(yīng)管放入PCR儀內(nèi)，按照對應(yīng)順序設(shè)置陰性質(zhì)控品(NTC)、陽性質(zhì)控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM，Quencher Dye為None，參比染料(Passive Reference)為 None。
2 ） 擴增程序
40Cycles
50℃ 10min
95℃ 3min
95℃ 10sec
60℃ 1min
60℃采集熒光信號，反應(yīng)體系為25 μl。
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件
14℃或－20℃
特點：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果
【結(jié)果分析條件設(shè)定】
u 基線（Baseline）設(shè)定：應(yīng)選擇該次實驗指數(shù)擴增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號無較大波動），起始點（Start）應(yīng)避開熒光采集起始階段的信號波動，終止點（End）應(yīng)比最早出現(xiàn)指數(shù)擴增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán)，建議基線設(shè)為6~15。
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值線設(shè)定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴增曲線的最高點。
【質(zhì)控標準】
1. 陰性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陰性，無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct；
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小于等于35；
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足，否則該次實驗視為無效。
【結(jié)果判斷】
1. 陽性：有明顯的指數(shù)擴增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本；對于可疑樣本建議復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判定為陽性，否則判定為陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸、保存不當(dāng)或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，可能會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
1準確可靠，臨床雙盲對照試驗＞1000例，結(jié)果與金標準測序法比對，結(jié)果一致性大于99%。
2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速：整個檢測流程只需3小時。
4簡便：試劑盒提供預(yù)混好的試劑，使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結(jié)果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結(jié)合必需完全配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對，在延伸中產(chǎn)生熒光。
建議加樣順序是陰性質(zhì)控品、待檢樣本、陽性質(zhì)控品。4. PCR擴增（擴增區(qū)）
1) 儀器設(shè)置（以ABI Prism 7500為例）
將PCR反應(yīng)管放入PCR儀內(nèi)，按照對應(yīng)順序設(shè)置陰性質(zhì)控品(NTC)、陽性質(zhì)控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM，Quencher Dye為None，參比染料(Passive Reference)為 None。
2 ） 擴增程序
40Cycles
50℃ 10min
95℃ 3min
95℃ 10sec
60℃ 1min
60℃采集熒光信號，反應(yīng)體系為25 μl。
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件
14℃或－20℃
| 產(chǎn)品名稱 | 草豆蔻染料法PCR鑒定試劑盒 |
| 英文名稱 | Semen alpiniae katsumadai |
| 規(guī)格 | 50次 |
特點：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果
【結(jié)果分析條件設(shè)定】u 基線（Baseline）設(shè)定：應(yīng)選擇該次實驗指數(shù)擴增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號無較大波動），起始點（Start）應(yīng)避開熒光采集起始階段的信號波動，終止點（End）應(yīng)比最早出現(xiàn)指數(shù)擴增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán)，建議基線設(shè)為6~15。
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值線設(shè)定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴增曲線的最高點。
【質(zhì)控標準】
1. 陰性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陰性，無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct；
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小于等于35；
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足，否則該次實驗視為無效。
【結(jié)果判斷】
1. 陽性：有明顯的指數(shù)擴增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本；對于可疑樣本建議復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判定為陽性，否則判定為陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸、保存不當(dāng)或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，可能會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
超敏C反應(yīng)蛋白 high sensitivity C-Reactive Protein 0.5 16 mg/L 0.1
超氧化物歧化酶 Super Oxidase Dimutase 6.25 200 U/mL 1
成纖維生長因子 Fibroblast growth factor 50 1600 pg/mL 10
成纖維細胞生長因子23 fibroblast growth factor-23 3.75 120 pg/mL 0.1
雌二醇 Estradiol 15 480 pg/mL 1
促甲狀腺激素 Thyroid Stimulating Hormone 0.625 20 mU/L 0.1
促卵泡素 follicle-stimulating hormone 0.25 8 mIU/mL 0.1
促腎上皮質(zhì)激素釋放激素 corticotropin releasing hormone 0.5 16 ng/mL 0.1
促腎上腺皮質(zhì)激素 adrencocorticotropic hormone 2.5 80 pg/mL 0.1
催產(chǎn)素受體 Oxytocin receptor 1.5 48 pg/mL 0.1
催乳素 prolactin 25 800 mIU/L 1
單核細胞趨化蛋白1 Monocyte chemotactic protein 1 2.5 80 pg/mL 0.1
膽固醇7α羥化酶 cholesterol 7α hydroxylase 0.75 24 U/L 0.1
膽固醇酯 cholesterol ester 0.25 8 mmol/L 0.1
蛋白多糖 proteoglycans 12.5 400 ng/mL 1
蛋白激酶A Protein kinase A 15 480 U/L 1
蛋白激酶B Protein kinase B 15 480 U/L 1
Uridine 5′-diphosphate sodium salt from分子式：C9H12N2NA2O12P2分子量：448.12
5'-二磷酸尿苷鈉鹽 二磷酸尿苷二鈉(UDP) 尿嘧啶核苷-5'-二磷酸二鈉鹽
尿苷-5'-二磷酸鈉鹽 21931-53-3
Uridine 5′-diphosphate sodium salt from分子式：C9H12N2NA2O12P2分子量：448.12
5'-二磷酸尿苷鈉鹽 二磷酸尿苷二鈉(UDP) 尿嘧啶核苷-5'-二磷酸二鈉鹽
鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽 36051-31-7
Guanosine 5'-triphosphate trisodium salt分子式：C10H13N5NA3O14P3分子量：589.13
鳥苷-5′-三磷酸鈉鹽 鳥苷三磷酸溶液 鳥苷三磷酸二鈉鹽 GTP/鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽
鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽 36051-31-7
鳥苷-5′-三磷酸鈉鹽 鳥苷三磷酸溶液 鳥苷三磷酸二鈉鹽 GTP/鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽
草豆蔻染料法PCR鑒定試劑盒Guanosine 5'-triphosphate trisodium salt分子式：C10H13N5NA3O14P3分子量：589.13
鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽 36051-31-7
Guanosine 5'-triphosphate trisodium salt分子式：C10H13N5NA3O14P3分子量：589.13
鳥苷-5′-三磷酸鈉鹽 鳥苷三磷酸溶液 鳥苷三磷酸二鈉鹽 GTP/鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽
鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽 36051-31-7
Guanosine 5'-triphosphate trisodium salt分子式：C10H13N5NA3O14P3分子量：589.13
鳥苷-5′-三磷酸鈉鹽 鳥苷三磷酸溶液 鳥苷三磷酸二鈉鹽 GTP/鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽
技術(shù)特點：超氧化物歧化酶 Super Oxidase Dimutase 6.25 200 U/mL 1
成纖維生長因子 Fibroblast growth factor 50 1600 pg/mL 10
成纖維細胞生長因子23 fibroblast growth factor-23 3.75 120 pg/mL 0.1
雌二醇 Estradiol 15 480 pg/mL 1
促甲狀腺激素 Thyroid Stimulating Hormone 0.625 20 mU/L 0.1
促卵泡素 follicle-stimulating hormone 0.25 8 mIU/mL 0.1
促腎上皮質(zhì)激素釋放激素 corticotropin releasing hormone 0.5 16 ng/mL 0.1
促腎上腺皮質(zhì)激素 adrencocorticotropic hormone 2.5 80 pg/mL 0.1
催產(chǎn)素受體 Oxytocin receptor 1.5 48 pg/mL 0.1
催乳素 prolactin 25 800 mIU/L 1
單核細胞趨化蛋白1 Monocyte chemotactic protein 1 2.5 80 pg/mL 0.1
膽固醇7α羥化酶 cholesterol 7α hydroxylase 0.75 24 U/L 0.1
膽固醇酯 cholesterol ester 0.25 8 mmol/L 0.1
蛋白多糖 proteoglycans 12.5 400 ng/mL 1
蛋白激酶A Protein kinase A 15 480 U/L 1
蛋白激酶B Protein kinase B 15 480 U/L 1
Uridine 5′-diphosphate sodium salt from分子式：C9H12N2NA2O12P2分子量：448.12
5'-二磷酸尿苷鈉鹽 二磷酸尿苷二鈉(UDP) 尿嘧啶核苷-5'-二磷酸二鈉鹽
尿苷-5'-二磷酸鈉鹽 21931-53-3
Uridine 5′-diphosphate sodium salt from分子式：C9H12N2NA2O12P2分子量：448.12
5'-二磷酸尿苷鈉鹽 二磷酸尿苷二鈉(UDP) 尿嘧啶核苷-5'-二磷酸二鈉鹽
鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽 36051-31-7
Guanosine 5'-triphosphate trisodium salt分子式：C10H13N5NA3O14P3分子量：589.13
鳥苷-5′-三磷酸鈉鹽 鳥苷三磷酸溶液 鳥苷三磷酸二鈉鹽 GTP/鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽
鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽 36051-31-7
鳥苷-5′-三磷酸鈉鹽 鳥苷三磷酸溶液 鳥苷三磷酸二鈉鹽 GTP/鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽
草豆蔻染料法PCR鑒定試劑盒Guanosine 5'-triphosphate trisodium salt分子式：C10H13N5NA3O14P3分子量：589.13
鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽 36051-31-7
Guanosine 5'-triphosphate trisodium salt分子式：C10H13N5NA3O14P3分子量：589.13
鳥苷-5′-三磷酸鈉鹽 鳥苷三磷酸溶液 鳥苷三磷酸二鈉鹽 GTP/鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽
鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽 36051-31-7
Guanosine 5'-triphosphate trisodium salt分子式：C10H13N5NA3O14P3分子量：589.13
鳥苷-5′-三磷酸鈉鹽 鳥苷三磷酸溶液 鳥苷三磷酸二鈉鹽 GTP/鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽
1準確可靠，臨床雙盲對照試驗＞1000例，結(jié)果與金標準測序法比對，結(jié)果一致性大于99%。
2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速：整個檢測流程只需3小時。
4簡便：試劑盒提供預(yù)混好的試劑，使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結(jié)果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結(jié)合必需完全配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對，在延伸中產(chǎn)生熒光。
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