技術特點:
1準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結果與金標準測序法比對,結果一致性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需完全配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對,在延伸中產生熒光。
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件
14℃或-20℃
特點:
1.產品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速
2. 引物經過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果
【結果分析條件設定】
u 基線(Baseline)設定:應選擇該次實驗指數(shù)擴增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域(所有樣本熒光信號無較大波動),起始點(Start)應避開熒光采集起始階段的信號波動,終止點(End)應比最早出現(xiàn)指數(shù)擴增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán),建議基線設為6~15。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值線設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲線的最高點。
【質控標準】
1. 陰性質控品的檢測結果應為陰性,無指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct;
2. 陽性質控品的檢測結果應為陽性,有明顯的指數(shù)擴增期,Ct值應小于等于35;
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效。
【結果判斷】
1. 陽性:有明顯的指數(shù)擴增期,且Ct<38;
2.可疑:有明顯的指數(shù)擴增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復核一次,若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴增期,則判定為陽性,否則判定為陰性;
3. 陰性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現(xiàn)假陽性結果;
2. 試劑運輸、保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,可能會導致出現(xiàn)假陰性結果。
薄荷染料法PCR鑒定試劑盒注意事項:
建議加樣順序是陰性質控品、待檢樣本、陽性質控品。4. PCR擴增(擴增區(qū))
1) 儀器設置(以ABI Prism 7500為例)
將PCR反應管放入PCR儀內,按照對應順序設置陰性質控品(NTC)、陽性質控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM,Quencher Dye為None,參比染料(Passive Reference)為 None。
2 ) 擴增程序
40Cycles
50℃ 10min
95℃ 3min
95℃ 10sec
60℃ 1min
60℃采集熒光信號,反應體系為25 μl。
5羥色胺 5-Hydroxytryptamine 3.75 120 ng/mL 0.1
6酮前列腺素F1a 6-keto-prostaglandin F1a 15 480 pg/mL 1
8羥基脫氧鳥苷 8-Hydroxy-desoxyguanosine 1.5 48 ng/mL 0.1
8-異前列腺素F2α 8-iso-PGF2α 3.75 120 pg/mL 0.1
Ⅰ型膠原C端肽 C-telopeptide of typeⅠcollagen 0.25 8 ng/mL 0.1
Ⅱ型肺泡細胞表面抗原 Krebs Von den Lungen-6 25 800 U/mL 1
Ⅱ型膠原 Collagen TypeⅡ 0.25 8 ng/mL 0.1
Ⅱ型膠原C端肽 C-telopeptide of typeⅡcollagen 0.75 24 ng/mL 0.1
Ⅲ型膠原 Collagen TypeⅢ 0.375 12 ng/mL 0.1
Ⅲ型前膠原氨基N端肽 N-terminal procollagen Ⅲ propeptide 1 32 ng/mL 0.1
Ⅳ型膠原 Collagen TypeⅣ 1.25 40 ng/mL 0.1
Bcl-2相關X蛋白 Bcl-2 associated X protein 2.5 80 IU/mL 0.1
B細胞淋巴瘤因子2 B-cell leukemia;lymphoma 2 5 160 pg/mL 1
CD147分子 CD147 7.5 240 pg/mL 1
CD30分子 Cluster of differentiation 30 12.5 400 pg/mL 1
CD34分子 Cluster of differentiation 34 0.5 16 ng/mL 0.1
CD40配體 Cluster of differentiation 40 ligand 6.25 200 pg/mL 1
核糖核酸 RNA
5-甲基尿苷 1463-10-1
5-Methyluridine分子式:C10H14N2O6分子量:258.23
5-甲基尿嘧啶核苷 5-甲基鳥苷 5-甲基尿 5-甲基尿嘧啶核苷
5-甲基尿苷 1463-10-1
5-Methyluridine分子式:C10H14N2O6分子量:258.23
5-甲基尿嘧啶核苷 5-甲基鳥苷 5-甲基尿 5-甲基尿嘧啶核苷
5-甲基尿苷 1463-10-1
薄荷染料法PCR鑒定試劑盒5-Methyluridine分子式:C10H14N2O6分子量:258.23
5-甲基尿苷 1463-10-1
5-甲基尿嘧啶核苷 5-甲基鳥苷 5-甲基尿 5-甲基尿嘧啶核苷
5-Methyluridine分子式:C10H14N2O6分子量:258.23
5-甲基尿嘧啶核苷 5-甲基鳥苷 5-甲基尿 5-甲基尿嘧啶核苷
AMP鈉鹽 149022-20-8
Adenosine 5′-monophosphate sodium salt分子式:C10H12N5NA2O7P分子量:391.18
核苷酸5'-一磷酸腺苷鈉鹽 腺苷酸鈉 腺苷一磷酸二鈉 一磷酸腺苷二鈉
AMP鈉鹽 149022-20-8
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上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。
上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學,暨南大學,南京工業(yè)大學,曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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