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當(dāng)前位置 > 產(chǎn)品目錄 > PCR儀 > 定量PCR > 斑蝥染料法PCR鑒定試劑盒
斑蝥染料法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Mylabris總訪問:208
國產(chǎn)/進(jìn)口:國產(chǎn)半年訪問:33
產(chǎn)地/品牌:博湖產(chǎn)品類別:定量PCR
型       號(hào):50次 最后更新:2024-11-4
貨       號(hào):BH20196-P
參考報(bào)價(jià):
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銷售商: 上海博湖生物科技有限公司銷售部 查看該公司所有產(chǎn)品 >>
  • 產(chǎn)品介紹
  • 公司簡介
斑蝥染料法PCR鑒定試劑盒PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
以下是PCR鑒定試劑盒訂購信息:
產(chǎn)品名稱:斑蝥染料法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Mylabris
產(chǎn)品規(guī)格:50次
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:現(xiàn)貨
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉片基因組DNA 提取試劑,得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個(gè)過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時(shí)樣品的制備。
1. 快速,整個(gè)過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對(duì)植物組織進(jìn)行冰凍、機(jī)械處理、純化或者DNA的沉淀。運(yùn)輸及保存2. 一管式,在一個(gè)試管內(nèi)完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動(dòng)化,適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉片和種子。
使用及效果:將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
應(yīng)用案例
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 4 號(hào)管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20  μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分.
還原型谷胱甘肽  reduced glutathione  6.25  200  μg/mL  1
核因子κB  Nuclear factor-kappa B  37.5  1200  pg/mL  1
核因子κB抑制蛋白α  inhibitory subunit of NF-κBα  0.5  16  ng/mL  0.1
環(huán)磷酸鳥苷  Cyclic guanosine monophosphate  1  32  nmol/L  0.1
環(huán)磷酸腺苷  cyclic adenosine monophosphate  0.75  24  nmol/L  0.1
環(huán)氧合酶2  cyclooxygenase-2  3.75  120  U/L  0.1
活化蛋白C  activated protein C  62.5  2000  ng/mL  10
活性氧簇  reactive oxygen species  15  480  U/mL  1
肌球蛋白輕鏈磷酸酶  myosin light chain phosphatase  25  800  pg/mL  1
肌酸激酶  Creatine Kinase  5  160  U/L  1
肌酸激酶同工酶MB  Creatine Kinase MB isoenzyme  3.75  120  U/L  0.1
基質(zhì)金屬蛋白酶1  matrix metalloproteinase 1  0.25  8  ng/mL  0.1
基質(zhì)金屬蛋白酶13  matrix metalloproteinase 13  10  320  ng/mL  1
基質(zhì)金屬蛋白酶9  matrix metalloproteinase 9  1.5  48  ng/mL  0.1
激素敏感性脂肪酶  Hormone-sensitive lipase  50  1600  U/L  10
己糖激酶  Hexokinase  20  640  mU/L  1
甲狀腺素  thyroxine  1  32  pmol/L  0.1
Methyl orange分子式:C14H14N3NAO3S分子量:327.33
金蓮橙D 對(duì)二甲基氨基偶氮苯磺酸鈉 4-4-(二甲氨基)苯基偶氮基苯磺酸鈉鹽
甲基橙   547-58-0
Methyl orange分子式:C14H14N3NAO3S分子量:327.33
金蓮橙D 對(duì)二甲基氨基偶氮苯磺酸鈉 4-4-(二甲氨基)苯基偶氮基苯磺酸鈉鹽
染色劑
染色劑
無醛固色劑   
Dye-fixing agent,no分子式:分子量:
fluorescent whitenin分子式:C14H17NO2分子量:
熒光增白劑SWN   
斑蝥染料法PCR鑒定試劑盒熒光增白劑 SWR, WS, FBO, VPA, US, WNS, WN, 增白劑
聯(lián)苯胺紅 B   1937-35-5
aizen direct bordeaux gh;amanil bordeaux b分子式:C32H22N6NA2O7S2分子量:712.66262
直接棗紅 直接棗紅B 直接棗紅GB
阿爾新藍(lán) 8GX   33864-99-2
Ingrain Blue 1分子式:C56H68CL4CUN16S4分子量:1298.86
bio-equip.com
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