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柏子仁染料法PCR鑒定試劑盒注意事項：
建議加樣順序是陰性質控品、待檢樣本、陽性質控品。4. PCR擴增（擴增區(qū)）
1) 儀器設置（以ABI Prism 7500為例）
將PCR反應管放入PCR儀內，按照對應順序設置陰性質控品(NTC)、陽性質控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM，Quencher Dye為None，參比染料(Passive Reference)為 None。
2 ） 擴增程序
40Cycles
50℃ 10min
95℃ 3min
95℃ 10sec
60℃ 1min
60℃采集熒光信號，反應體系為25 μl。
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件
14℃或－20℃
特點：
1.產品僅用于科研即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結果
【結果分析條件設定】
u 基線（Baseline）設定：應選擇該次實驗指數(shù)擴增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號無較大波動），起始點（Start）應避開熒光采集起始階段的信號波動，終止點（End）應比最早出現(xiàn)指數(shù)擴增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán)，建議基線設為6~15。
u 閾值(Threshold)設定：將閾值線設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲線的最高點。
【質控標準】
1. 陰性質控品的檢測結果應為陰性，無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct；
2. 陽性質控品的檢測結果應為陽性，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值應小于等于35；
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足，否則該次實驗視為無效。
【結果判斷】
1. 陽性：有明顯的指數(shù)擴增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本；對于可疑樣本建議復核一次，若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判定為陽性，否則判定為陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑運輸、保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，可能會導致出現(xiàn)假陰性結果。
1準確可靠，臨床雙盲對照試驗＞1000例，結果與金標準測序法比對，結果一致性大于99%。
2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速：整個檢測流程只需3小時。
4簡便：試劑盒提供預混好的試劑，使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需完全配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對，在延伸中產生熒光。
建議加樣順序是陰性質控品、待檢樣本、陽性質控品。4. PCR擴增（擴增區(qū)）
1) 儀器設置（以ABI Prism 7500為例）
將PCR反應管放入PCR儀內，按照對應順序設置陰性質控品(NTC)、陽性質控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM，Quencher Dye為None，參比染料(Passive Reference)為 None。
2 ） 擴增程序
40Cycles
50℃ 10min
95℃ 3min
95℃ 10sec
60℃ 1min
60℃采集熒光信號，反應體系為25 μl。
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件
14℃或－20℃
| 產品名稱 | 柏子仁染料法PCR鑒定試劑盒 |
| 英文名稱 | Seman platycladi |
| 規(guī)格 | 50次 |
特點：
1.產品僅用于科研即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結果
【結果分析條件設定】u 基線（Baseline）設定：應選擇該次實驗指數(shù)擴增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號無較大波動），起始點（Start）應避開熒光采集起始階段的信號波動，終止點（End）應比最早出現(xiàn)指數(shù)擴增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán)，建議基線設為6~15。
u 閾值(Threshold)設定：將閾值線設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲線的最高點。
【質控標準】
1. 陰性質控品的檢測結果應為陰性，無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct；
2. 陽性質控品的檢測結果應為陽性，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值應小于等于35；
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足，否則該次實驗視為無效。
【結果判斷】
1. 陽性：有明顯的指數(shù)擴增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本；對于可疑樣本建議復核一次，若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判定為陽性，否則判定為陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑運輸、保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，可能會導致出現(xiàn)假陰性結果。
白細胞介素22 Interleukin 22 10 320 pg/mL 1
白細胞介素23 Interleukin 23 1.5 48 pg/mL 0.1
白細胞介素4 Interleukin 4 2 64 pg/mL 0.1
白細胞介素6 Interleukin 6 25 800 pg/mL 1
白細胞介素8 Interleukin 8 1.5 48 pg/mL 0.1
半胱氨酸蛋白酶抑制劑;胱抑素C Cystatin C 50 1600 ng/mL 10
胞漿型磷脂酶A2 cytosolic phospholipase A2 31.25 1000 pg/mL 1
表皮生長因子 Epidermal growth factor 15 480 pg/mL 1
丙二醛 malondialchehyche 0.375 12 nmol/mL 0.1
補體蛋白3 Complement 3 2.5 80 μg/mL 0.1
不對稱二甲基精氨酸 asymmetrical dimethylarginine 0.0375 1.2 μmol/L 0.1
腸脂肪酸結合蛋白 intestinal fatty acid binding protein 25 800 pg/mL 1
超氧化物歧化酶 Super Oxidase Dimutase 6.25 200 U/mL 1
成纖維細胞生長因子2 fibroblast growth factor-2 6.25 200 pg/mL 1
傳染性胃腸炎病毒抗體 Transmissible Gastroenteritis virus antibody 5 160 U/L 1
雌二醇 Estradiol 2.5 80 pg/mL 0.1
雌激素 estrogen 7.5 240 pg/mL 1
Acid Orange 74分子式：C16H11CRN5NAO8S分子量：508.34
3-(4,5-二氫-3-甲基-5-氧代-1-苯基-1H-吡唑-4-基)偶氮-2-羥基-5-硝基苯磺酸根羥基鉻酸鈉
酸性橙74 10127-27-2
Acid Orange 74分子式：C16H11CRN5NAO8S分子量：508.34
3-(4,5-二氫-3-甲基-5-氧代-1-苯基-1H-吡唑-4-基)偶氮-2-羥基-5-硝基苯磺酸根羥基鉻酸鈉
金蓮橙O 547-57-9
Tropaeolin O分子式：C12H9N2NAO5S分子量：316.27
4-(2,4-二羥基苯基)偶氮苯磺酸鈉,酸性橙6，間苯二酚磺,間苯二酚品黃，偶氮間苯二酚磺酸鈉
金蓮橙O 547-57-9
柏子仁染料法PCR鑒定試劑盒4-(2,4-二羥基苯基)偶氮苯磺酸鈉,酸性橙6，間苯二酚磺,間苯二酚品黃，偶氮間苯二酚磺酸鈉
Tropaeolin O分子式：C12H9N2NAO5S分子量：316.27
金蓮橙O 547-57-9
Tropaeolin O分子式：C12H9N2NAO5S分子量：316.27
4-(2,4-二羥基苯基)偶氮苯磺酸鈉,酸性橙6，間苯二酚磺,間苯二酚品黃，偶氮間苯二酚磺酸鈉
分散橙13 6253-10-7
Disperse Orange 13分子式：C22H16N40；C6H5N=NC10H6N=NC6H40H分子量：352.39
分散橙 M-B,分散橙 SE-B
技術特點：白細胞介素23 Interleukin 23 1.5 48 pg/mL 0.1
白細胞介素4 Interleukin 4 2 64 pg/mL 0.1
白細胞介素6 Interleukin 6 25 800 pg/mL 1
白細胞介素8 Interleukin 8 1.5 48 pg/mL 0.1
半胱氨酸蛋白酶抑制劑;胱抑素C Cystatin C 50 1600 ng/mL 10
胞漿型磷脂酶A2 cytosolic phospholipase A2 31.25 1000 pg/mL 1
表皮生長因子 Epidermal growth factor 15 480 pg/mL 1
丙二醛 malondialchehyche 0.375 12 nmol/mL 0.1
補體蛋白3 Complement 3 2.5 80 μg/mL 0.1
不對稱二甲基精氨酸 asymmetrical dimethylarginine 0.0375 1.2 μmol/L 0.1
腸脂肪酸結合蛋白 intestinal fatty acid binding protein 25 800 pg/mL 1
超氧化物歧化酶 Super Oxidase Dimutase 6.25 200 U/mL 1
成纖維細胞生長因子2 fibroblast growth factor-2 6.25 200 pg/mL 1
傳染性胃腸炎病毒抗體 Transmissible Gastroenteritis virus antibody 5 160 U/L 1
雌二醇 Estradiol 2.5 80 pg/mL 0.1
雌激素 estrogen 7.5 240 pg/mL 1
Acid Orange 74分子式：C16H11CRN5NAO8S分子量：508.34
3-(4,5-二氫-3-甲基-5-氧代-1-苯基-1H-吡唑-4-基)偶氮-2-羥基-5-硝基苯磺酸根羥基鉻酸鈉
酸性橙74 10127-27-2
Acid Orange 74分子式：C16H11CRN5NAO8S分子量：508.34
3-(4,5-二氫-3-甲基-5-氧代-1-苯基-1H-吡唑-4-基)偶氮-2-羥基-5-硝基苯磺酸根羥基鉻酸鈉
金蓮橙O 547-57-9
Tropaeolin O分子式：C12H9N2NAO5S分子量：316.27
4-(2,4-二羥基苯基)偶氮苯磺酸鈉,酸性橙6，間苯二酚磺,間苯二酚品黃，偶氮間苯二酚磺酸鈉
金蓮橙O 547-57-9
柏子仁染料法PCR鑒定試劑盒4-(2,4-二羥基苯基)偶氮苯磺酸鈉,酸性橙6，間苯二酚磺,間苯二酚品黃，偶氮間苯二酚磺酸鈉
Tropaeolin O分子式：C12H9N2NAO5S分子量：316.27
金蓮橙O 547-57-9
Tropaeolin O分子式：C12H9N2NAO5S分子量：316.27
4-(2,4-二羥基苯基)偶氮苯磺酸鈉,酸性橙6，間苯二酚磺,間苯二酚品黃，偶氮間苯二酚磺酸鈉
分散橙13 6253-10-7
Disperse Orange 13分子式：C22H16N40；C6H5N=NC10H6N=NC6H40H分子量：352.39
分散橙 M-B,分散橙 SE-B
1準確可靠，臨床雙盲對照試驗＞1000例，結果與金標準測序法比對，結果一致性大于99%。
2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速：整個檢測流程只需3小時。
4簡便：試劑盒提供預混好的試劑，使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需完全配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對，在延伸中產生熒光。
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