技術(shù)特點(diǎn):
1準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對,結(jié)果一致性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測流程只需3小時(shí)。
4簡便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需完全配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,在延伸中產(chǎn)生熒光。
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件
14℃或-20℃
特點(diǎn):
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳
4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果
【結(jié)果分析條件設(shè)定】
u 基線(Baseline)設(shè)定:應(yīng)選擇該次實(shí)驗(yàn)指數(shù)擴(kuò)增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域(所有樣本熒光信號無較大波動(dòng)),起始點(diǎn)(Start)應(yīng)避開熒光采集起始階段的信號波動(dòng),終止點(diǎn)(End)應(yīng)比最早出現(xiàn)指數(shù)擴(kuò)增的樣本Ct值減少1~3個(gè)循環(huán),建議基線設(shè)為6~15。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾值線設(shè)定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲線的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
1. 陰性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陰性,無指數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或無Ct;
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性,有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期,Ct值應(yīng)小于等于35;
3. 以上要求需在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足,否則該次實(shí)驗(yàn)視為無效。
【結(jié)果判斷】
1. 陽性:有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期,且Ct<38;
2.可疑:有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復(fù)核一次,若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期,則判定為陽性,否則判定為陰性;
3. 陰性:無指數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染、試劑污染、樣品交叉污染會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
2. 試劑運(yùn)輸、保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
白薇染料法PCR鑒定試劑盒注意事項(xiàng):
建議加樣順序是陰性質(zhì)控品、待檢樣本、陽性質(zhì)控品。4. PCR擴(kuò)增(擴(kuò)增區(qū))
1) 儀器設(shè)置(以ABI Prism 7500為例)
將PCR反應(yīng)管放入PCR儀內(nèi),按照對應(yīng)順序設(shè)置陰性質(zhì)控品(NTC)、陽性質(zhì)控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM,Quencher Dye為None,參比染料(Passive Reference)為 None。
2 ) 擴(kuò)增程序
40Cycles
50℃ 10min
95℃ 3min
95℃ 10sec
60℃ 1min
60℃采集熒光信號,反應(yīng)體系為25 μl。
免疫球蛋白E Immunoglobulin E 15 480 μg/mL 1
免疫球蛋白G Immunoglobulin G 0.75 24 mg/mL 0.1
免疫球蛋白G1 Immunoglobulin G1 0.5 16 mg/mL 0.1
免疫球蛋白G2 Immunoglobulin G2 250 8000 μg/mL 10
免疫球蛋白G2a Immunoglobulin G2a 125 4000 μg/mL 10
免疫球蛋白M Immunoglobulin M 5 160 μg/mL 1
凝聚素 Clusterin 1.5 48 ng/mL 0.1
凝血因子Ⅷ coagulation factor Ⅷ 62.5 2000 U/L 10
皮質(zhì)醇 Cortisol 5 160 ng/mL 1
熱休克蛋白96 Heat Shock Protein 96 62.5 2000 pg/mL 10
絨毛膜促性腺激素 Chorionic Gonadotrophin 0.25 8 mIU/mL 0.1
三葉因子3 Trefoil Factor-3 50 1600 pg/mL 10
腎損傷分子1 Kidney injury molecule 1 5 160 pg/mL 1
松弛肽;松弛素 Relaxin 15 480 pg/mL 1
外源性α干擾素 Exogenous Interferon α 3.125 100 pg/mL 0.1
外源性γ干擾素 Exogenous Interferon γ 6.25 200 pg/mL 1
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子1 signal transduction-Smad1 0.5 16 pg/mL 0.1
復(fù)紅, 2-氨基-5-(4-氨基-3-磺苯基)(4-亞氨基-3-磺基-2,5-環(huán)己二烯-1-亞基)甲基-3-甲基苯磺酸二鈉鹽,品紅S,酸性紫19
甲基紅 493-52-7
Methyl red分子式:C15H15N3O2;(CH3)2NC6H4N=NC6H4CO2H分子量:269.30
甲紅,烷紅,甲烷紅,對二甲氨基偶氮苯鄰羧酸,酸性紅2
甲基紅 493-52-7
Methyl red分子式:C15H15N3O2;(CH3)2NC6H4N=NC6H4CO2H分子量:269.30
甲紅,烷紅,甲烷紅,對二甲氨基偶氮苯鄰羧酸,酸性紅2
甲基紅 493-52-7
Methyl red分子式:C15H15N3O2;(CH3)2NC6H4N=NC6H4CO2H分子量:269.30
中性紅 553-24-2
白薇染料法PCR鑒定試劑盒甲紅,烷紅,甲烷紅,對二甲氨基偶氮苯鄰羧酸,酸性紅2
Neutral red分子式:C15H17CIN4分子量:288.78
堿性紅5,3-氨基-7-二甲基氨基-2-甲基吩嗪鹽酸鹽
中性紅 553-24-2
Neutral red分子式:C15H17CIN4分子量:288.78
堿性紅5,3-氨基-7-二甲基氨基-2-甲基吩嗪鹽酸鹽
中性紅 553-24-2
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上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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