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白前染料法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Rhizoma cynanchi stauntonii總訪問:221
國產(chǎn)/進(jìn)口:國產(chǎn)半年訪問:35
產(chǎn)地/品牌:博湖產(chǎn)品類別:定量PCR
型       號:50次 最后更新:2024-11-4
貨       號:BH20186-P
參考報(bào)價(jià):
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  • 產(chǎn)品介紹
  • 公司簡介
以下是PCR鑒定試劑盒訂購信息:
產(chǎn)品名稱:白前染料法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Rhizoma cynanchi stauntonii      
產(chǎn)品規(guī)格:50次
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:現(xiàn)貨
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉片基因組DNA 提取試劑,得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個(gè)過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時(shí)樣品的制備。
1. 快速,整個(gè)過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進(jìn)行冰凍、機(jī)械處理、純化或者DNA的沉淀。運(yùn)輸及保存2. 一管式,在一個(gè)試管內(nèi)完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動(dòng)化,適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉片和種子。
使用及效果:將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
應(yīng)用案例
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20  μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分.
環(huán)磷酸腺苷  cyclic adenosine monophosphate  1.5  48  nmol/L  0.1
黃體生成素  Luteinizing Hormone  5  160  ng/mL  1
激活素A  Activin A  1.25  40  ng/mL  0.1
卵泡抑素  Follistatin  0.375  12  ng/mL  0.1
免疫球蛋白A  Immunoglobulin A  10  320  μg/mL  1
免疫球蛋白G  Immunoglobulin G  25  800  μg/mL  1
免疫球蛋白M  Immunoglobulin M  75  2400  μg/mL  10
同型半胱氨酸  Homocysteic acid  0.5  16  μmol/L  0.1
褪黑素  Melatonin  0.5  16  pg/mL  0.1
褪黑素受體1A  Melatonin Receptor 1A  3.125  100  pg/mL  0.1
褪黑素受體1B  Melatonin Receptor 1B  2.5  80  pg/mL  0.1
褪黑素受體1C  Melatonin Receptor 1C  2.5  80  pg/mL  0.1
維生素D  vitamin D  1.5  48  ng/mL  0.1
心肌轉(zhuǎn)錄因子  Transcription factor GATA-6  50  1600  pg/mL  10
雄激素  androgen  0.25  8  ng/mL  0.1
乙酰CoA羧化酶  acetyl CoA carbosylase  12.5  400  pg/mL  1
抑制素B  inhibin B  1.5  48  pg/mL  0.1
1-2,5-二甲基-4-(2,5-二甲基苯偶氮)苯偶氮-2萘酚,蘇丹紅5B,溶劑紅27
油紅O   1320-06-5
Oil red O(C.1.26125)分子式:C26H24N4O分子量:408.51
1-2,5-二甲基-4-(2,5-二甲基苯偶氮)苯偶氮-2萘酚,蘇丹紅5B,溶劑紅27
油紅O   1320-06-5
Oil red O(C.1.26125)分子式:C26H24N4O分子量:408.51
1-2,5-二甲基-4-(2,5-二甲基苯偶氮)苯偶氮-2萘酚,蘇丹紅5B,溶劑紅27
油紅O   1320-06-5
Oil red O(C.1.26125)分子式:C26H24N4O分子量:408.51
油紅O   1320-06-5
白前染料法PCR鑒定試劑盒1-2,5-二甲基-4-(2,5-二甲基苯偶氮)苯偶氮-2萘酚,蘇丹紅5B,溶劑紅27
Oil red O(C.1.26125)分子式:C26H24N4O分子量:408.51
1-2,5-二甲基-4-(2,5-二甲基苯偶氮)苯偶氮-2萘酚,蘇丹紅5B,溶劑紅27
剛果紅   573-58-0
Congo red分子式:C32H22N6NA2O6S2分子量:696.66
直接剛果紅,煮大紅,直接朱紅,直接大紅,二苯基-4,4′-二(偶氮-2-)-1-氨基萘-4-磺酸鈉
剛果紅   573-58-0
白前染料法PCR鑒定試劑盒PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
bio-equip.com
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