抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存?贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質卓越,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
英文名稱 Anti-pan methyl Lysine
中文名稱
泛甲基賴氨酸抗體多少錢
別 名 pan methyl Lysine; pan methyl K.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse
產品類型 一抗
研究領域 細胞生物 信號轉導 表觀遺傳學
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human pan methyl Lysine
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產品應用 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存條件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
產品介紹 Lysine methylation occurs in three distinct states, having either one (me1), two (me2) or three (me3) methyl groups attached to the amine group of the lysine side chain. In eukaryotes, histone H3 trimethylated at lysine 4 (H3K4me3) is associated with active chromatin and gene expression.
實驗流程:
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上?捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
人他克莫司(FK506)ELISA試劑盒 Human Tacrolimus-FK506 Elisa Kit96T/48T
人水蛭素(HRD)ELISA試劑盒 Human Hirudin, HRD Elisa Kit96T/48T
人上皮特異性抗原(ESA)ELISA試劑盒 Human epithelial specific antigen, ESA Elisa Kit96T/48T
人上皮膜抗原(EMA)ELISA試劑盒 Human Epithelial membrane antigen, EMA Elisa Kit96T/48T
人凝聚素(CLU)ELISA試劑盒Human clusterin, CLU Elisa Kit96T/48T
人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒 Human anti-OJ-antibody, OJ/IleRS Elisa Kit96T/48T
人抗著絲點抗體(ACA/CENP)ELISA試劑盒Human Anticentromere Antibody, ACA/CENP Elisa Kit96T/48T
人肌細胞生成素(MYOG)ELISA試劑盒Human myogenin, MYOG Elisa Kit96T/48T
人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒Human antibody to group A streptococcal polysaccharide, ASP Elisa Kit96T/48T
人活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA試劑盒Human activated protein C resistance, APCR Elisa Kit96T/48T
泛甲基賴氨酸抗體多少錢Dermatophilus congolensis剛果嗜皮菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Human Papillomavirus 6 (HPV-6)人乳頭瘤病毒6 染料法熒光定量PCR試劑盒
Sammarez Reef病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
Flexal Virus(FLEV)弗萊克索病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
Aeromonas salmonicida滅鮭氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Swine Enteric Alphacoronavirus(SeACoV)豬腸道甲型冠狀病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
Penicillium cyclopium圓弧青霉PCR試劑盒
Mycoplasma genitalium生殖支原體染料法熒光定量PCR試劑盒
Haemophilus agni阿古尼嗜血桿菌PCR試劑盒
Culicoides spp.庫蠓通用探針法熒光定量PCR試劑盒
Staphylococcus pseudintermedius偽中間型葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Vibrio cholerae霍亂弧菌通用PCR試劑盒
Raillietina tetragona四角瑞氏絳蟲PCR試劑盒
Haemophilus suis豬嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Human Papillomavirus 58(HPV-58)人乳頭瘤病毒58 染料法熒光定量PCR試劑盒
Plasmodium falciparum鐮刀瘧原蟲(惡性瘧原蟲)探針法熒光定量PCR試劑盒
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上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。
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