抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存?贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì)卓越,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
英文名稱 Anti-Protor-1
中文名稱
乳腺癌抑制基因Protor1抗體多少錢
別 名 Arhgap8; AU043908; C030017C09Rik; C78947; FLJ20185; FLJ20185k; MGC109513; MGC32512; PP610; Proline rich 5 (renal); Proline-rich protein 5; Protein observed with Rictor-1; Protor-1; PROTOR1; PRR5; PRR5_HUMAN; PTOR1; RP1-181C9.3.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 表觀遺傳學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 43kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Protor-1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存條件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
實驗流程:
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
人抗丁型肝炎病毒抗體(anti-HDV)ELISA試劑盒 Human anti-hepatitis D virus antibody, anti-HDV Elisa Kit96T/48T
人抗副流感病毒IgM抗體(anti-PIV IgM)ELISA試劑盒 Human anti-parainfluenza virus IgM antibody, anti-PIV IgM Elisa Kit96T/48T
人抗丙型肝炎病毒抗體(anti-HCV)ELISA試劑盒 96T/48T
人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)ELISA試劑盒 Human anti-typhus antibody Elisa Kit96T/48T
人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒 Human listeriolysin O, LLO Elisa Kit96T/48T
人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA試劑盒Human hepatitis B virus X Ag, HBxAg Elisa Kit96T/48T
人腺相關(guān)病毒(AAV)ELISA試劑盒Human adeno-associated virus, AAV Elisa Kit96T/48T
人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA試劑盒Human hepatitis B virus X interacting protein, HBXIP Elisa Kit96T/48T
人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒 Human Salmonella typhi antigen, St-Ag Elisa Kit96T/48T
人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA試劑盒Human T-lymphotropicvirusⅠ, HTLV-ⅠElisa Kit96T/48T
乳腺癌抑制基因Protor1抗體多少錢Serratia liquefaciens液化沙雷菌PCR試劑盒
Mycobacterium marinum海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Simian Virus 5 (SV5)猴病毒5 RT-PCR試劑盒
West Nile Virus(WNV)西尼羅病毒RT-PCR試劑盒
Bunostomum phlebotomum牛仰口線蟲PCR試劑盒
Acinetobacter spp.不動桿菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒
Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒流行株探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
Paracoccus denitrificans脫氮副球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Mycobacterium abscessus complex膿腫分枝桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒
Treponema pertenue極細(xì)密螺旋體染料法熒光定量PCR試劑盒
Bordetella parapertussis副百日咳波氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV)口蹄疫病毒SAT3亞型RT-PCR試劑盒
Treponema phagedenis潰蝕齒密螺旋體PCR試劑盒
Providencia alcalifaciens產(chǎn)堿普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Bovine Rotavirus Group B(BRAV-B)牛輪狀病毒B組RT-PCR試劑盒
Human Immunodeficiency Virus 1(HIV-1M-D)人免疫缺陷病毒1型M群D型RT-PCR試劑盒
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上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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