細(xì)胞周期與凋亡檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品原理:本產(chǎn)品檢測(cè)原理基于碘化丙啶(Propidium, PI)染色方法分析細(xì)胞周期和凋亡。碘化丙啶是一種雙鏈DNA染料,其嵌入雙鏈DNA中可以產(chǎn)生熒光,并且熒光的強(qiáng)度和雙鏈DNA的量成正比。
在細(xì)胞周期中,G0和G期細(xì)胞有一套染色體,G2和M期細(xì)胞有兩套染色體,S期介于兩者之間。經(jīng)過(guò)碘化丙啶染色后,處在不同細(xì)胞周期中的細(xì)胞的熒光強(qiáng)度是不一樣的。假定G0和G期的細(xì)胞熒光強(qiáng)度為,那么G2和M期的細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為2,S期的細(xì)胞介于和2之間。
細(xì)胞凋亡時(shí),由于細(xì)胞核皺縮和DNA片段化,染色時(shí)DNA片段會(huì)從打孔的細(xì)胞膜處丟失,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),熒光強(qiáng)度小于,即Sub-G峰或者凋亡細(xì)胞峰。
細(xì)胞凋亡也可以用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞光散射的變化來(lái)檢測(cè)。凋亡前期,染色質(zhì)皺縮,細(xì)胞密度增加,前向角光散色顯著降低。凋亡后期,細(xì)胞產(chǎn)生凋亡小體,前向角光散射和側(cè)向角光散色都顯著降低。
產(chǎn)品適用:本試劑盒可用于培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或者懸浮細(xì)胞檢測(cè),也可用于組織細(xì)胞檢測(cè)。
保存條件:-20°避光條件下,保存年以上,4°避光條件下,可以保存2個(gè)月。
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑詳細(xì)說(shuō)明:
注意事項(xiàng)
. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿防護(hù)服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05,,不推薦用于檢測(cè)組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽(yáng)性,而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán),而影響檢測(cè)?蓪⒁让赶蠹(xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進(jìn)一步的損傷。
6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅,請(qǐng)不要固定樣品。
7. 因檢測(cè)細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測(cè)儀器不同,因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測(cè)均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對(duì)照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好?朔藝(guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨(dú)特的溶膠液/結(jié)合液配方,將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一,因此一個(gè)試劑盒可以運(yùn)用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購(gòu)買(mǎi)多種試劑盒的費(fèi)用,
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測(cè)pH值變化從而達(dá)到最佳結(jié)合效果,大大提高回收效率。
5.改進(jìn)的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
操作步驟:
、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的 完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。000~2000g 離心 min,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Mn(III)TBAP (25 mg) Mn(III)tetrakis(4benzoic acid) porphyrin chloride; Mn(III)TBAP
Trans (±)2Phenylcyclopropanamine, Hemisulfate; SKF trans355; 2PCPA Tranylcypromine Hemisulfate
CAY0408 (0 mg) 9oxo。alpha。,Rdihydroxycyclobutyl5Z,Edienoic acid; CAY0408
SNC 80 (5 mg) NIH 08; 4[(R)[(2S,5R)2,5dimethyl4(2propenyl)piperazinyl](3methoxyphenyl)methyl]N,Ndiethylbenzamide
WP066 ( mg) 3(6bromo2pyridinyl)2cyanoN[(S)phenylethyl]2Epropenamide; STAT Inhibitor III; WP066
Glycine,N,N’[[3’,6’bis(acetyloxy)3oxospiro[isobenzofuran(3H),9’[9H]xanthene]2’,7’diyl]bis(methylene)]bis[N[2[(acetyloxy)methoxy]2oxoethyl],bis[(acetyloxy)methyl] ester; Calcein acetoxyme Calcein AM
寶石紅蛋白染色試劑,英文名或英文縮寫(xiě):SYPRO red protein stain,級(jí)別:高,%,規(guī)格:500克
9032果膠酶(+4℃)Pectinase
美康唑,英文名或英文縮寫(xiě):Miconazole nitnate,級(jí)別:000~000,液體,6條帶,規(guī)格:克
知母皂苷A Timosaponin A (HPLC,≥%) 2004 0MG 標(biāo)準(zhǔn)品
拂青務(wù)菊酯 FLUCYTHRINcTq 702
MaleicHydrazide青鮮素克USP級(jí),%
過(guò)硼醋內(nèi)四水合物 wo7ium pqrborctq tqtrchydrctq 06007
4xy7noxy3nitnopxenylboronic acid pinacol ester 09084
N,N'二苯基聯(lián) N,N'Diphenylbenzidine,97% 53 5G 通用試劑
FMOCD絲酸/N芴甲氧羰基D絲酸/FmocDSerOH 特,98% 、5、25克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGF-BB ELISA Kit
小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA檢測(cè)試劑盒MousePepsinELISAKit 96T/48T
人激素敏感性脂肪酶(HSL)免疫試劑盒 Human hormone sensitive lipase,HSL ELISA Kit
Ratcalcium/calmodulin-dependeproteinkinase-Ⅱ,CAMK2ELISAKit大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
0%Formalin固著液50毫升
MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISA試劑盒小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠S00鈣結(jié)合蛋白A6(S00A6)ELISA試劑盒 ,英文名: S00A6 ELISA Kit
人糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T
細(xì)胞周期與凋亡檢測(cè)試劑盒大鼠和肽素(copeptin)免疫試劑盒 Rat Copeptin ELISA kit
英文名稱Rat5-lipoxygenaseELISAKit大鼠5-脂加氧酶(5-LO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鄰氨基卞啶同(AMAC)熒光輔助糖蛋白電泳(FACE)檢測(cè)試劑盒5次
vaspin人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑規(guī)格:48T/96T
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公司著力立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,全力打造品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈!