中文名稱：CFSE細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：500T
發(fā)貨周期：～3天
熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料，可以標(biāo)記活體細(xì)胞。CFSE是一種帶有琥珀酰亞胺(NHS)的熒光染料，可以結(jié)合細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。CFSE在結(jié)構(gòu)上將酚羥基部位改造成AM 體，所以自身不發(fā)熒光，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細(xì)胞膜，在活細(xì)胞內(nèi)與胞內(nèi)蛋白共價(jià)結(jié)合，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的CFSE的AM 部位能被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解發(fā)出綠色熒光。CFSE的琥珀酰亞胺(NHS)和細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基部位結(jié)合，固定在細(xì)胞內(nèi)，不會漏出細(xì)胞外。CFSE 進(jìn)入細(xì)胞后定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，在細(xì)胞核的熒光最強(qiáng)。
在細(xì)胞分裂增殖過程中，CFSE的熒光強(qiáng)度會隨著細(xì)胞的分裂而逐級遞減，標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中，因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細(xì)胞增殖，細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。CFSE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中，CFSE標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中，熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半，通過流式細(xì)胞儀(FL 通道)根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同，可檢測出未分裂細(xì)胞，分裂一次(/2的熒光強(qiáng)度)，二次(/4的熒光強(qiáng)度)，三次(/8的熒光強(qiáng)度)，以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFSE可檢測分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多。經(jīng)CFSE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細(xì)胞染色的功能。
CFSE標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長達(dá)數(shù)周之久，它常被用來做活體細(xì)胞檢測實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長期活動的實(shí)驗(yàn)。CFSE 毒性小，不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患。可以更快速，更準(zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
CFSE標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測。最常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測，也可以用于成纖維細(xì)胞、NK 細(xì)胞等其它細(xì)胞的增殖檢測。
CFSE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，熒光波長：λex=496 nm,λem=56 nm。流式檢測時(shí)的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時(shí)的發(fā)射波長為56nm，使用流式細(xì)胞儀檢測時(shí)可以采用FL detection channel。CFSE標(biāo)記的細(xì)胞除了流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞增殖外，還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。
儲存條件：CFSE須-20℃避光保存，注意防潮。
有效期：六個(gè)月。


CFSE細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒注意事項(xiàng)：
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時(shí)間的影響，因此當(dāng)樣品較多時(shí)測定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時(shí)間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
Mouse Monoclonal AntiRabbit IgG （500 dtn）     Mouse Monoclonal AntiRabbit IgG
MTSSL （50 mg）     2,5dihydro2,2,5,5tetramethyl3[[（methylsulfonyl）thio]methyl]Hpyrrolyloxy
ZIETDProRed 620     ZIETDProRed 620
Ketorolac （ g）     5benzoyl2，3dihydroHpyrrolizinecarboxylic acid； Acular LS |Acular PF |RS 3|Sprix ； Ketorolac
Heptadecanoyl Ethanolamide （00 mg）     N（2hydroxyethyl）heptadecanamide； Heptadecanoyl Ethanolamide
（2E）3（6Bromo2pyridinyl）2cyanoN[（S）phenylethy]2propenamide     EZSolution WP066
wo7iumFluoride扶美國藥典級白色蓬松粉末RT不sigma
50扶化銨AMMoniuM fluoride
2′脫氧尿苷shēng huà shì jì容量：克
3炔基本迷 3qTHYNYLcNISOLq  07
0ul吸頭shēng huà shì jì容量：KU
BOCL谷酸shēng huà shì jì容量：00克
8鋁Aluminium nitnate nonahydrate
錄多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：00毫升
2,6二甲基對 2,6Dimethylbenzoquinone,99% 52 G 通用試劑
磺胺地索辛 Sulfadimethoxine (≥98.5%,TLC) 2 0G原裝 通用試劑
小鼠血幼素(HJV)ELISA試劑盒 ，英文名： HJV ELISA Kit
兔子端粒酶(TE)ELISA檢測試劑盒rabbittelomerase,TEELISAKit 96T/48T
犬表達(dá)于SiSo細(xì)胞系的受體結(jié)合型抗原(EBAG9)免疫試劑盒 Dog Receptor-binding cancer aigen expressed on SiSo cells,EBAG9 ELISA kit
英文名稱HumancarbonicanhydraseELISAKit人酶(CA)規(guī)格：96T/48T
大米淀粉化學(xué)萃取試劑盒20次
RatLeptospiraIgG,LepIgGELISA試劑盒大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠Sesin小鼠2蛋白(SESN2)ELISA試劑盒 ，英文名： SESN2 ELISA Kit
人抗凝血酶受體(A)ELISA檢測試劑盒Humanai-thrombieceptor,AELISAKit 96T/48T
CFSE細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)免疫試劑盒 Rat Erythropoietin receptor,EPOR ELISA Kit
英文名稱RatSerotonin5-HydroxyyptamineELISAKit大鼠5-羥色氨(5-HT)規(guī)格：96T/48T
裂解液ⅩI非變性細(xì)胞蛋白制備
ELISAKitBDNF人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子規(guī)格：48T/96T

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