中文名稱:
PKH67細胞增殖與毒性檢測試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:500T
發(fā)貨周期:~3天
PKH67細胞增殖與毒性檢測試劑盒熒光染料PKH67 是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料,可以標記活體細胞,通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標記細胞。對細胞毒性較小,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細胞膜,有著強而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會使鄰近細胞染色的功能。
在細胞分裂增殖過程中,PKH67的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減,標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,因此其熒光強度是親代細胞的一半,根據(jù)這一特性,它可被用于檢測細胞增殖,細胞周期的估算及細胞分裂等方面。PKH67標記細胞的熒光非常均一,并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中,PKH67標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半,通過流式細胞儀根據(jù)熒光強度的不同,可檢測出未分裂細胞,分裂一次(/2的熒光強度),二次(/4的熒光強度),三次(/8的熒光強度),以及更多分裂次數(shù)的細胞。PKH67可檢測分裂次數(shù)多達六次甚至更多。
除了用于細胞增殖檢測,PKH67 還可以用于細胞的體外盒體內(nèi)示蹤,標記后熒光在胞內(nèi)表達穩(wěn)定,陽性標記率達98%以上,標記細胞形態(tài)良好,能有效地觀察細胞在體外的誘導(dǎo)分化情況;或?qū)擞浀募毎⑷塍w內(nèi),可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。
PKH67標記的細胞用于體內(nèi)觀察可以長達數(shù)周之久,它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。PKH67 毒性較小,不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患。可以更快速,更準確和更安全地得到想要的實驗數(shù)據(jù)。
PKH67標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。
PKH67標記細胞呈綠色熒光,熒光波長:λex=490 nm,λem=502 nm。
儲存條件:-20℃避光保存。
注意事項:
、懸浮細胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細胞數(shù)成比例,也受作用時間的影響,因此當樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色,需避光保存,長時間光照會導(dǎo)致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時,請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
MPO Assay Buffer ( ea) MPO Assay Buffer
Cambinol Cambinol (5 mg)
(+)CP ,7 (solution) (25 mg) 2[(R,3S)3hydroxycyclohexyl]5(2methyloctan2yl)phenol; (+)CP ,7 (solution)
trans Prostaglandin E3 (25 ug) trans PGE3; 9oxoα,Sdihydroxyprosta5Z,E,Etrienoic acid
JWH 398 Npentanoic acid metabolited5 ( mg) 5(3(4chloronaphthoyl)Hindolyl2,4,5,6,7d5)pentanoic acid; JWH 398 N(5carboxypentyl) metabolited5; JWH 398 Npentanoic acid metabolited5
Prostaglandin D Synthase hematopoietictype; mouse recombinant) (50 ug) HematopoieticPGDS|HPGDS, Prostaglandin D Synthase hematopoietictype; mouse recombinant)
聚氧烷,英文名或英文縮寫:Silicone,級別:基準試劑,99%,規(guī)格:250毫升
26235N,N二甲基基脲,3Dimetxyl3,4,5,6tetraxy7no2(H)pyrimidinone
HISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封組織學(xué)級0MLRT
(S)() 2錄炳醋 (S)()2Chloropropionic ccid 66
L色安醋;L2安基3吲哚基炳醋;L安基吲哚炳醋 LTryptophcn;Lβ3Indolyl clcninq;(S)2cMino3(3indolyl)
GLUTARALDEHYDE,50%SOLUTION二醛,50%溶液蛋白組學(xué)級透明黃色液體COLDsigma
589錄2酮5Chloro2pentenone
DEPURINATIONSOLUTION去嘌呤溶液生物技術(shù)級透明無色溶液RTsigma
三鹽酸鹽 Triethanolamine hydrochloride 6398 25G 通用試劑
3巰基酸 3Mercaptopropionic acid,≥99% 070 25G 通用試劑
小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)ELISA試劑盒 ,英文名: NADH ELISA Kit
小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA檢測試劑盒Mouseglucocoicoidreceptor-α,GR-αELISAKit 96T/48T
人激肽釋放酶8(KLK 8)免疫試劑盒 Human Kallikrein 8,KLK 8 ELISA Kit
RatBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
0%TWEEN20溶液00毫升
MouseBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISA試劑盒小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒 ,英文名: Slit2 ELISA Kit
人前心肽(Pro-ANP)ELISA檢測試劑盒HumanProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit 96T/48T
大鼠環(huán)加氧酶(COX-)免疫試劑盒 Rat Cyclooxygenase-,COX- ELISA Kit
英文名稱Rat8-iso-ProstaglandinF2aELISAKIT大鼠8-異前列腺素F2α(8-ISOPGF2a)規(guī)格:96T/48T
裂解液Ⅷ細菌活性化蛋白制備
ELISAKitODC人鳥氨酸脫羧酶規(guī)格:48T/96T
PKH67細胞增殖與毒性檢測試劑盒操作規(guī)程
、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(完全培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
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