中文名稱：Annexin V-PE/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：50T|00T
發(fā)貨周期：～3天
產(chǎn)品背景：
細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，它在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和一些疾病發(fā)生過程等方面起著十分重要的作用。
在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。在體內(nèi)，巨噬細(xì)胞可以識別翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細(xì)胞清除，因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應(yīng)，而在細(xì)胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應(yīng)。
AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的PS 高親和力特異性結(jié)合。PS 外翻發(fā)生在細(xì)胞核破裂，DNA 片段化以及凋亡相關(guān)蛋白出現(xiàn)之前，這使得Annexin V 與PS的結(jié)合成為凋亡早期的一種重要檢測標(biāo)志事件。
檢測原理：
在正常的活細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸(phosphotidylserine，PS)位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在早期凋亡的細(xì)胞中，PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。
Annexin-Ⅴ能與PS 高親和力結(jié)合�？赏ㄟ^細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。用標(biāo)記了PE的AnnexinⅤ作為熒光探針，利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。細(xì)胞壞死的過程中也會發(fā)生細(xì)胞膜損傷，壞死的細(xì)胞會結(jié)合Annexin V-PE。
Annexin V-PE 通常與細(xì)胞膜非滲透性核酸熒光染料聯(lián)合使用以檢測凋亡細(xì)胞。常用的染料是7-AAD。正常細(xì)胞和早期凋亡細(xì)胞的細(xì)胞膜是完整的，核酸染料7-AAD 不能透過完整的細(xì)胞膜，但在凋亡中晚期的細(xì)胞和壞死細(xì)胞，7-AAD 能夠透過細(xì)胞膜與細(xì)胞核結(jié)合呈現(xiàn)紅色。
7-AAD/Annexin V-PE試劑盒將AnnexinⅤ與7-AAD匹配使用，可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞區(qū)分開來。壞死細(xì)胞可以同時與Annexin V-PE和7-AAD 結(jié)合顯色，而7-AAD 則被排除在活細(xì)胞(PE陰性)和早期凋亡細(xì)胞(PE陽性)之外。在沒有巨噬細(xì)胞的情況下，凋亡的最后階段會像細(xì)胞壞死一樣發(fā)生整個細(xì)胞的解體，從而使凋亡晚期的細(xì)胞也同時被PE和7-AAD 結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽性。
儲存條件：染色液2-8℃避光保存；結(jié)合液2-8℃保存；長期不用-20℃保存。
Annexin V-PE染色液避免反復(fù)凍融，凍融2次以上可能會失效。長期保存分裝后-20℃保存。
有效期：一年。


Annexin V-PE/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測試劑盒注意事項：
、懸浮細(xì)胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當(dāng)樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
Myriocin （25 mg）     2amino3，4dihydroxy2（hydroxymethyl）oxo6eicosenoic acid； ISP|Thermozymocidin； Myriocin
AT （hydrochloride） （ mg）     4[（2,6dichlorobenzoyl）amino]N4piperidinylHPyrazole3carboxamide hydrochloride
JWH 0 （solution） （25 mg）     （butylHindol3yl）naphthalenylmethanone； JWH 0 （solution）
PHA 62 （ mg）     （3Z）5[[（2,6dichlorophenyl）methyl]sulfonyl]3[[3,5dimethyl4[[（2R）2（pyrrolidinylmethyl）pyrrolidinyl]carbonyl]Hpyrrol2yl]methylene],3dihydro2Hindol2one
Tanshinone IIA （5 mg）     6，7，8，9tetrahydro，6，6trimethylphenanthro[，2b]furan0，dione； NSC |NSC |TSA； Tanshinone IIA
pGB Bcl2 siRNA Vector Mix     pGB Bcl2 siRNA Vector Mix
對叔丁基鄰本二酚，英文名或英文縮寫：TBC，級別：BS，規(guī)格：500毫克
D葡萄糖二鈉鹽(20℃) 9899%NA
Butylparaben對羥基本酸丁酯公斤 行空級
LA鱗酰DL炳三醇棕櫚酰內(nèi) ,2DIHqXcDqCcNOYLSNGLYCqRO3[PHOSPHORcC(GLYCqROL)] wo7ium ScLT
單叔丁基琥珀醋酯 MONOTqRTBUTYL SUCCINcTq 97% 06
FmocProOHN叔丁芴甲氧羰基L脯酸25克特，99%
0034聯(lián)本4ETHYNYL,'BIpxenYL
本基3甲基5吡唑酮shēng huà shì jì容量：2～8℃5U
對基N,N二乙基... N,NDiethylpphenylenediamine sulfate... 6283632 25G 通用試劑
二乙基二硫代基甲... Sodium diethyldithiocarbamate trihydrate 206253 25G 通用試劑
小鼠合酶運(yùn)輸因子(NOSIN)ELISA試劑盒 ，英文名： NOSIN ELISA Kit
兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA檢測試劑盒rabbitiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 96T/48T
犬促甲狀腺素(TSH)免疫試劑盒 Canine Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA Kit
英文名稱HumanCeruloplasmin(CP)ELISAKit人銅藍(lán)蛋白(CP)規(guī)格：96T/48T
大量總RNA氯化銫化試劑盒0次
RatLactoferrin,LTF/LFELISA試劑盒大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠Toll樣受體9(TLR9)ELISA試劑盒 ，英文名： TLR9 ELISA Kit
人凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA檢測試劑盒HumancoagulationfactorⅩⅢ,FⅩⅢELISAKit 96T/48T
大鼠活性氧(ROS)免疫試劑盒 Rat Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit
Annexin V-PE/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測試劑盒英文名稱RatCXCL0ELISAKit大鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子0(CXCL)規(guī)格：96T/48T
離體培養(yǎng)愈傷組織再生(callogenesis)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
ELISAKitgelson人凝膠原蛋白規(guī)格：48T/96T

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