AO/PI雙染試劑盒AO/PI 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是采用DNA探針雙染細(xì)胞核的方法檢測(cè)細(xì)胞的狀態(tài)。吖啶橙(Acridine Orange,AO)為一種熒光染料,該染料具有膜通透性,能透過(guò)細(xì)胞膜,使核DNA和RNA染色。其激發(fā)波長(zhǎng)為488nm,吸收波長(zhǎng)為55nm。它與細(xì)胞中DNA和RNA 結(jié)合量存在差別,復(fù)合物可發(fā)出不同顏色的熒光,紅色熒光為AO-DNA(F>600nm),綠色熒光為AO-RNA或單鏈DNA(F>530nm)。
在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過(guò)正常細(xì)胞膜,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。
Propidium Iodide是一種DNA結(jié)合性染料,其激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為488nm和630nm,產(chǎn)生紅色熒光,但無(wú)膜通透性,不能透過(guò)活細(xì)胞膜,只能染死細(xì)胞。因此,在熒光顯微鏡下觀察,正常細(xì)胞不能著色,早期凋亡細(xì)胞呈微弱紅光,晚期凋亡細(xì)胞紅光加強(qiáng),壞死細(xì)胞呈強(qiáng)紅色熒光。
儲(chǔ)存條件:染色液2-8℃避光保存。試劑C 2-8℃保存。
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑詳細(xì)說(shuō)明:
注意事項(xiàng)
. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿防護(hù)服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05,,不推薦用于檢測(cè)組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽(yáng)性,而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán),而影響檢測(cè)。可將胰酶消化后細(xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進(jìn)一步的損傷。
6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅,請(qǐng)不要固定樣品。
7. 因檢測(cè)細(xì)胞的類(lèi)型、凋亡誘導(dǎo)劑種類(lèi)、使用的檢測(cè)儀器不同,因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測(cè)均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對(duì)照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好?朔藝(guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨(dú)特的溶膠液/結(jié)合液配方,將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一,因此一個(gè)試劑盒可以運(yùn)用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購(gòu)買(mǎi)多種試劑盒的費(fèi)用,
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測(cè)pH值變化從而達(dá)到最佳結(jié)合效果,大大提高回收效率。
5.改進(jìn)的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
操作步驟:
、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的 完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。000~2000g 離心 min,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
N(2phenylethyl)Indomethacin amide ( mg) N(2phenylethyl)(4chlorobenzoyl)5methoxy2methylHindole3acetamide; N2PIA; N(2phenylethyl)Indomethacin amide
cisDichlorodiammine platinum(II), cisPlatinum(II) diammine dichloride, CisDiamineplatinum (II) dichloride Cisplatin
GYY 47 (0 mg) (pmethoxyphenyl)morpholinophosphinodithioic acid; GYY 47
Arctiin (50 mg) Arctigenin4Glucoside|NSC 3527; (3R,4R)4[(3,4dimethoxyphenyl)methyl]3[[4(βDglucopyranosyloxy)3methoxyphenyl]methyl]dihydro2(3H)furanone
PB22 5hydroxyquinoline isomer (0 mg) quinolin5yl pentylHindole3carboxylate; PB22 5hydroxyquinoline isomer
R))JWH 0 N3hydroxybutyl) metabolite (00 ug) R))JWH 0 N3hydroxybutyl) metabolite, ((3hydroxybutyl)Hindol3yl)(naphthalenyl)methanone
N乙酰D基葡萄糖shēng huà shì jì容量:RT25克
50鎢酸Phosphotungstic acid
氫氧化鋅25克RT
甘酸鋅 Zinc Glycinate,≥99.0% 6 500G 通用試劑
化鐵 IRON SILICIDq 06
L(+)RiboseL核糖/L(+)核糖毫克AR,%
98862本以酮;甲基本基酮;乙酰本Acetopxenone;metxyl pxenyl ketone;Benzoylmetxane;Hypnone;pxenylethanone;Acetylbenzene
5胞苷二嶙酸二鈉鹽shēng huà shì jì容量:公斤
,硫代羰基二咪唑 ,'Thiocarbonyldiimidazole,≥.0% 02 G 通用試劑
酪蛋白 Casein from bovine milk 90007 250G 培養(yǎng)基
小鼠胰α淀粉酶(AMY2A)ELISA試劑盒 ,英文名: AMY2A ELISA Kit
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseLactoferrin,LTF/LFELISAkit 96T/48T
人甲狀旁腺激素-34(PTH -34)免疫試劑盒 Human Parathyroid hormone-34,PTH -34 ELISA Kit
Ratbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISAKit大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
[α32P]dCTP聚合酶標(biāo)記法酶切產(chǎn)物處理試劑盒20次
MouseAquaporin4,AQP-4ELISA試劑盒小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒 ,英文名: TLR-9/CD289 ELISA Kit
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI-)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratplasminogenactivatorinhibitor,PAI-ELISAKit 96T/48T
人HIV- TAT互動(dòng)蛋白2(HTATIP2/TIP30)免疫試劑盒 Human HTATIP2 ELISA Kit
AO/PI雙染試劑盒英文名稱(chēng)MouseThyroid-PeroxidaseELISAKit小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)規(guī)格:96T/48T
冰凍切片膽色素霍爾(Hall)染色試劑盒50次
Ratacetylcholine,ACHELISA試劑盒大鼠乙酰膽堿(Ach)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
bio-equip.com
上海莼試生物技術(shù)有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology Co. Ltd. 專(zhuān)業(yè)服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,擁有分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)等方面的科研技術(shù)團(tuán)隊(duì),經(jīng)營(yíng)科研生化試劑、分析試劑、實(shí)驗(yàn)耗材,推出技術(shù)先進(jìn)、質(zhì)量穩(wěn)定的科研產(chǎn)品。為全國(guó)乃至于世界各地科研機(jī)構(gòu)、工業(yè)、電子、醫(yī)療、科技等領(lǐng)域的客戶(hù),提供系統(tǒng)的產(chǎn)品資源及配套技術(shù)服務(wù)。推出十幾個(gè)種類(lèi)產(chǎn)品線(xiàn),部分產(chǎn)品接受定制服務(wù)!
公司著力立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,全力打造品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈!