Hoechst 33258染色液Hoechst 33258，也稱(chēng)bisBenzimide H 33258或HOE 33258，是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低。Hoechst 33258染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33258也常用于普通的細(xì)胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。Hoechst 33258的最大激發(fā)波長(zhǎng)為346nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后，最大激發(fā)波長(zhǎng)為352nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為46nm。本Hoechst 33258染色液可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
使用說(shuō)明：
使用前用生理鹽水或PBS將Hoechst 33258染色液稀釋00倍，即為工作液。
. 對(duì)于固定的細(xì)胞或組織：
a. 對(duì)于細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33258染色。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33258染色。
b. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量Hoechst 33258工作液，覆蓋住樣品即可;對(duì)于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品3倍體積的工作液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對(duì)于活細(xì)胞或組織：
a. 加入適當(dāng)量Hoechst 33258工作液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入mL工作液，對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入00μL工作液。
b. 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度下培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進(jìn)行熒光檢測(cè)。
儲(chǔ)存條件：-20℃避光，有效期一年。
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑詳細(xì)說(shuō)明：

中文名稱(chēng)	Hoechst 33258染色液
英文名稱(chēng)
規(guī)格	mL

注意事項(xiàng)
. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿防護(hù)服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05，，不推薦用于檢測(cè)組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞，建議適用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不當(dāng)，可能引起假陽(yáng)性，而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán)，而影響檢測(cè)�？蓪⒁让赶�化后細(xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止進(jìn)一步的損傷。
6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅，請(qǐng)不要固定樣品。
7. 因檢測(cè)細(xì)胞的類(lèi)型、凋亡誘導(dǎo)劑種類(lèi)、使用的檢測(cè)儀器不同，因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同，因此建議每次檢測(cè)均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對(duì)照，進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好�？朔�了國(guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液，不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽，不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨(dú)特的溶膠液/結(jié)合液配方，將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一，因此一個(gè)試劑盒可以運(yùn)用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況，節(jié)省了需購(gòu)買(mǎi)多種試劑盒的費(fèi)用，
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色，便于觀察溶膠效果和監(jiān)測(cè)pH值變化從而達(dá)到最佳結(jié)合效果，大大提高回收效率。
5.改進(jìn)的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性，即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。 、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的  完全細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。000～2000g 離心 min，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
NacetylSgeranylgeranylLCysteine （0 mg）     NacetylS（3，7，，tetramethyl2E，6E，0E，hexadecatetraenyl）Lcysteine； AGGC； NacetylSgeranylgeranylLCysteine
HPGDS Inhibitor I （5 mg）     6（3fluorophenyl）N[（2,2,2trifluoroethyl）4piperidinyl]3pyridinecarboxamide
Farnesyl Thiosalicylic Acid Amide （50 mg）     2[[（2E，6E）3，7，trimethyl2，6，0dodecatrienyl]thio]benzamide； Salirasib Amide|FTS Amide； Farnesyl Thiosalicylic Acid Amide
Batimastat （0 mg）     BB； （2R,3S）N4hydroxyN[（S）2（methylamino）2oxo（phenylmethyl）ethyl]2（2methylpropyl）3[（2thienylthio）methyl]butanediamide
Ponceau S （sodium salt） （00 g）     3hydroxy4[2[2sulfo4[2（4sulfophenyl）diazenyl]phenyl]diazenyl]2，7naphthalenedisulfonic acid， tetrasodium salt； Acid Red ； Ponceau S （sodium salt）
DiaEasy Dialyzer (0 ml) MWCO 3.5 kDa     DiaEasy Dialyzer (0 ml) MWCO 3.5 kDa
4nitnopxenol對(duì)硝基酚5克BS，%
GDX　04(聚二本多孔小球)NA
N叔丁氧羰基L天冬酰，英文名或英文縮寫(xiě)：BocLasparagine，級(jí)別：BR，98.5%，規(guī)格：25克
,2,4本三羧臘酐 ,2,4Bqnzqnqtriccrboxylic cnhydridq 22307
每速 C MITOMYCIN C 0
Fuchsinacid復(fù)紅克BR，%
5巰基乙�；�2胺THIONALIDE
mToluicacid3甲基本酸5克超，87%
52硝基 5Fluoro2nitro,98%  G 通用試劑
核糖霉素/威斯塔霉素/維生霉素/威他霉素/威斯他霉素/Ribostamycin Sulfate salt USP級(jí)，660U/mg 5/25克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat monocyte chemotactic protein 2 (MCP-2/CCL8) ELISA Kit 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒
Humanmelanoma-associatedaigen,MAGEELISAKit 人黑色素瘤相關(guān)抗原(MAGE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor26SPSMELISAKit大鼠26S蛋白酶體規(guī)格：48T/96T
飲料甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次
MouseL-SelectinELISAKit小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 ，英文名： IFN-α ELISA Kit
大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)ELISA檢測(cè)試劑盒RatprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 96T/48T
人I 型膠原蛋白(COL I)免疫試劑盒 Human Collagen Type I,COL I ELISA Kit
英文名稱(chēng)MouseFGF9ELISAKit小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9FGF9規(guī)格：96T/48T
Hoechst 33258染色液冰凍切片半胱氨酸蛋白酶-4(CASPASE-4)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒50次
Rat6-keto-prostaglandinFa,6-K-PGFaELISA試劑盒大鼠6同前列腺素Fa(6-keto-PGFa)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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