中文名稱：CCK-8試劑盒
英文名稱：Cell counting KIT-8
產(chǎn)品規(guī)格：00T|500T|500T*0
發(fā)貨周期：～3天
本試劑盒為MTT法的替代方法，是一種基于WST(水溶性四唑鹽，化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒�？捎糜谒幬锖Y選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗。
使用說明：
一、制作標準曲線(測定細胞具體數(shù)量時)
、先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量，然后接種細胞。
2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度，一般要做3-5個細胞濃度梯度，每組3-6個復孔。
3、接種后培養(yǎng)至細胞貼壁，然后加CCK-8試劑培養(yǎng)一定時間后測定OD 值，制作出一條以細胞數(shù)量為橫坐標(X 軸)，OD 值為縱坐標(Y 軸)的標準曲線。根據(jù)此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數(shù)量(試用此標準曲線的前提是實驗的條件要一致，便于確定細胞的接種數(shù)量以及加入CCK-8后的培養(yǎng)時間。)
二、細胞活性檢測
、在96孔板中接種細胞懸液(00μL/孔)。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預培養(yǎng)(在37℃,5% CO2的條件下)。
2、向每孔加入0μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數(shù))。
3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育-4小時。
4、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。
5、如果暫時不測定OD值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入0μL 0.M的HCl或者%SDS(W/V)溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在24小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。


CCK-8試劑盒注意事項：
、懸浮細胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
NacetylSgeranylgeranylLCysteine （5 mg）     NacetylS（3，7，，tetramethyl2E，6E，0E，hexadecatetraenyl）Lcysteine； AGGC； NacetylSgeranylgeranylLCysteine
JW 55 （25 mg）     N[4[[[[tetrahydro4（4methoxyphenyl）2Hpyran4yl]methyl]amino]carbonyl]phenyl]2furancarboxamide
Oxamflatin （0 mg）     Nhydroxy5[3[（phenylsulfonyl）amino]phenyl]2Epenten4ynamide； Metacept 3； Oxamflatin
Fostriecin （00 ug）     Antibiotic CI0|NSC 33|Phosphotrienin； 5,6dihydro6[（E,3R,4R,6R,7Z,9Z,E）3,6,trihydroxy3methyl4（phosphonooxy）,7,9,tridecatetraenyl]2Hpyran2one, monosodium salt
Ponceau S （sodium salt） （50 g）     3hydroxy4[2[2sulfo4[2（4sulfophenyl）diazenyl]phenyl]diazenyl]2，7naphthalenedisulfonic acid， tetrasodium salt； Acid Red ； Ponceau S （sodium salt）
DiaEasy Dialyzer (0 ml) MWCO 3.5 kDa     DiaEasy Dialyzer (0 ml) MWCO 3.5 kDa
4Chloromercuribenzoicacid對錄高本酸500克AR，99%
GDX　203(聚二本多孔小球)NA
NCBZL酸，英文名或英文縮寫：ZLAlanine，級別：特，98.5%，規(guī)格：5克
，2，4，5四本 ,2,4,5Tqtrcmqthylbqnzqnq
米諾滌爾 Minoxidil 30
Furaltadone他酮KUBR，98%
5三十二烷基甲基錄化銨Tridodecyl metxyl ammonium chloride
3fluoroa,adimetxyl5(trifluorometxyl)2Thiopxeneacetic acid 06030
三(二基)膦 Tris(dimethylamino)phosphine,97% 08260 5ML 通用試劑
N酰L半胱安醋;Lα酰安基β巰基炳醋;N酰3巰基炳安醋 NccqtylLcystqinq;LαccqtcMidoβMqrccptopropionic ccid;Nccqtyl3Mqrccptoclcninq
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒 ，英文名： IGFBP-4 ELISA Kit
小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISA檢測試劑盒MouseEmbryonicStemMESPU30,M30ELISAKit 96T/48T
人甲狀腺素抗體免疫試劑盒 Human Thyroxine aibody ELISA Kit
RatAquaporin5,AQP-5ELISAKit大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白H4-K2乙�；瘷z測試劑盒0/20次等
MouseAi-ypsin,ATELISA試劑盒小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠α抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA試劑盒 ，英文名： AACT ELISA Kit
大鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA檢測試劑盒RatCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 96T/48T
人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)免疫試劑盒 Human ICE protease-activating factor,IRAP ELISA Kit
CCK-8試劑盒英文名稱MouseCTELISAKit小鼠降鈣素(CT)規(guī)格：96T/48T
冰凍切片半胱氨酸蛋白酶-3(CASPASE-3)活性原位熒光染色檢測試劑盒50次
Rat5-Nucleotidase,5-ELISA試劑盒大鼠5核苷酸酶(5-)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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