細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒Ⅱ(AP)保存條件:-20℃冰凍保存。
保存期:一年
工作原理:
在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細(xì)胞的死亡,其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時(shí)間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活,細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產(chǎn)生與DNA斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將地高辛標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至3’-OH 末端,DIG-dUTP 結(jié)合在DNA斷點(diǎn)部位,可以通過生物素化抗地高辛抗體(Anti-DIG-Biotin)和 SABC-AP反應(yīng)后,加入顯色底物 BCIP/NBT予以顯示。凋亡的細(xì)胞核呈紫藍(lán)色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細(xì)胞。
試劑盒內(nèi)容:
.標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)ml
2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl
3.DIG-dUTP(×20)20μl
4.封閉液(Blocking Reagent)4ml
5.生物素化抗地高辛抗體(×00)20μl
6..SABC-AP(×00)20μl
7.Proteinase K(×200)50μl
8.BCIP/NBT 顯色劑(×20)0.2ml
9.抗體稀釋液4ml
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑詳細(xì)說明:
注意事項(xiàng)
. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿防護(hù)服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05,,不推薦用于檢測(cè)組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽(yáng)性,而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán),而影響檢測(cè)。可將胰酶消化后細(xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進(jìn)一步的損傷。
6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅,請(qǐng)不要固定樣品。
7. 因檢測(cè)細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測(cè)儀器不同,因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測(cè)均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對(duì)照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好。克服了國(guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨(dú)特的溶膠液/結(jié)合液配方,將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一,因此一個(gè)試劑盒可以運(yùn)用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購(gòu)買多種試劑盒的費(fèi)用,
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測(cè)pH值變化從而達(dá)到最佳結(jié)合效果,大大提高回收效率。
5.改進(jìn)的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
操作步驟:
、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的 完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Nervonic Ceramide (25 mg) N[(S,2R,3E)2hydroxy(hydroxymethyl)3heptadecenyl]Ztetracosenamide; NZtetracosenoylsphingosine|C24 Ceramide; Nervonic Ceramide
Acetyl fentanyld5 (hydrochloride) RM ( mg) Desmethyl fentanyld5|MCV d5|NIH 05d5; Nphenyl2,3,4,5,6d5N[(2phenylethyl)4piperidinyl]acetamide, monohydrochloride
VER009 (0 mg) 3(5chloro2,4dihydroxyphenyl)Nethyl4(4methoxyphenyl)Hpyrazole5carboxamide; VER009
Amifostine (hydrate) (00 mg) Ethyol|WR 2;
αEthylaminopentiophenone (hydrochloride) (0 mg) 2(ethylamino)phenylpentanone, monohydrochloride; αEthylaminopentiophenone (hydrochloride)
NTosylPhechloromethylketone NTosylPhechloromethylketone
血紅蛋白(豬血),英文名或英文縮寫:Hb,級(jí)別:BR,200u/g,規(guī)格:250克
0BocL本甘醇BOCLpxenylglycinol
GPDA甘酰脯酰對(duì)磺酸鹽克BR,99%
,4二同單二醇縮同 ,4Cyclohqxcnqdion Monoqthylqnq ccqtcl 9
2加醋酯 97% MqTHYL 2NcPHTHOcTq 8
FCA弗氏完全佐劑5克CP,99%
去氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基NA
Mesityloxide甲基異丁希甲酮00毫升BR,98%
32甲基 3Fluoro2methyl,98% 243 G 通用試劑
鋯/鋯四水合物/Zirconium sulfate tetrahydrate SP,98% 5克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠胰淀素(IAPP)ELISA試劑盒 ,英文名: IAPP ELISA Kit
兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 96T/48T
犬睪酮(T)免疫試劑盒 Canine Testoterone ELISA Kit
英文名稱HumanCyclinDELISAKit人細(xì)胞周期素D(CyclinD)規(guī)格:96T/48T
大量Lipofusin脂質(zhì)體細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒0次/00次
RatIerleukin23,IL-23ELISA試劑盒大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒 ,英文名: α2-AP ELISA Kit
大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA檢測(cè)試劑盒RatPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 96T/48T
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒Ⅱ(AP)人IV形膠原蛋白α3鏈(COL4A3)免疫試劑盒 Human COL4A3 ELISA kit
英文名稱MouseAmphiregulinELISAKit小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(AR)規(guī)格:96T/48T
冰凍切片半胱氨酸蛋白酶2(CASPASE-2)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒50次
Rat26Sproteasome,26SPSMELISA試劑盒大鼠26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
bio-equip.com
上海莼試生物技術(shù)有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology Co. Ltd. 專業(yè)服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,擁有分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)等方面的科研技術(shù)團(tuán)隊(duì),經(jīng)營(yíng)科研生化試劑、分析試劑、實(shí)驗(yàn)耗材,推出技術(shù)先進(jìn)、質(zhì)量穩(wěn)定的科研產(chǎn)品。為全國(guó)乃至于世界各地科研機(jī)構(gòu)、工業(yè)、電子、醫(yī)療、科技等領(lǐng)域的客戶,提供系統(tǒng)的產(chǎn)品資源及配套技術(shù)服務(wù)。推出十幾個(gè)種類產(chǎn)品線,部分產(chǎn)品接受定制服務(wù)!
公司著力立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,全力打造品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈!