5-溴脫氧尿嘧啶核苷目前常用的細胞增殖標記物有4種,DNA聚合酶α(DNA polymerase α),增殖細胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA),Ki-67和5-溴脫氧尿嘧啶核苷(Brdu)。其中Brdu為組織細胞非內(nèi)源性表達存在,應(yīng)用相對較廣。Brdu,也稱為溴化去氧尿苷,一種合成的胸苷類似物,在S期可替代胸腺嘧啶核苷選擇性結(jié)合到細胞DNA中。從而檢測細胞DNA合成和標記細胞分裂,凋亡等行為。在遺傳研究中Brdu可通過活體注射或細胞培養(yǎng)加載,然后使用抗Brdu的單克隆抗體進行特異性標記,ICC或IHC法染色法顯示增殖細胞。另外,還能同時結(jié)合其它細胞標記物,雙重染色,來判斷增殖細胞的種類,增殖速度等,對研究細胞動力學有著重要意義。
CAS:59-4-3
分子式:C9HBrN2O5
分子量:307.0
外觀:白色或類白色粉末
熔點:87~89℃
純度(Purity, HPLC):≥99%
溶解性:溶于M 氫氧化銨(50 mg/ml),水(高達0 mg/ml);溶于DMF,DMSO,水(加熱)(50-00 mg/ml)
儲存條件:-20℃,有效期2年
以下是細胞生物學試劑詳細說明:
中文名稱 |
5-溴脫氧尿嘧啶核苷 |
英文名稱 |
5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) |
規(guī)格 |
00mg |
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05,,不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當,可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測。可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導致熒光的淬滅,請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導處理的細胞作為對照,進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點:
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好?朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方,將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一,因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用,
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結(jié)合效果,大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
操作步驟:
、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Nimesulide (25 g) N(4nitro2phenoxyphenyl)methanesulfonamide; R805; Nimesulide
5ChloroN4(2(isopropylsulfonyl)phenylN2(2methoxy4(4methylpiperazinyl)piperidinyl)phenyl)pyrimidine2,4diamine NVPTAE4
,dihydroketotetranor Prostaglandin Fα (50 ug) 9α,αdihydroxyoxo2,3,4,5tetranor prostanoic acid; ,dihydroketotetranor Prostaglandin Fα
JWH 0 N(2fluorohexyl) isomer (500 ug) JWH 0 N(2fluorohexyl) analog; ((2fluorohexyl)Hindol3yl)(naphthalenyl)methanone
Stattic (50 mg) 6nitro,dioxidebenzo[b]thiophene; STAT3 Inhibitor V; Stattic
Prostaglandin B2d4 (5 mg) PGB2d4, Prostaglandin B2d4, 9oxoShydroxyprosta5Z,8(),Etrienoic3,3,4,4d4 acid
Paraffinwithceresin石蠟50毫升AR,99%
37多多胺Polyetxylenepolyamines
CN3錄吡脲00克BR,98%
2,4二 2,4Dihydroxybenzoic acid,97% 8986 25G 通用試劑
十七醋;珠光脂醋 Hqptcdqccnoic ccid;Hqptcdqcylic ccid 206
LProlineL氫化酸25克BR,99%
2086己酸6BroMohexanoic acid;6BroMocaproic acid
CampyCefex添加劑shēng huà shì jì容量:卷
2,2(2,5二苯基硫... 2,5Bis(5tertbutylbenzoxazol2... 6 5G 通用試劑
胰酶大豆瓊脂 Tryptic Soy Agar (TSA) Null 500G 培養(yǎng)基
小鼠胰脂肪酶(PL)ELISA試劑盒 ,英文名: PL ELISA Kit
小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA檢測試劑盒MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit 96T/48T
人堿性胎兒蛋白(BFP)免疫試劑盒 Human basic fetoprotein,BFP ELISA Kit
RatApolipoproteinE,Apo-EELISAKit大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組蛋白H3-K79乙;瘷z測試劑盒0/20次等
Mouseai-Monocyteaibody,AMAELISA試劑盒小鼠抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒
Humaniegrin-linkedkinase,ILK-ELISAKit 人整合素連接激酶(ILK-)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
5-溴脫氧尿嘧啶核苷HumanCalreticulin,CELISA試劑盒人鈣網(wǎng)蛋白(C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達細胞克隆凍存試劑盒50次
Humansolubleierleukin-receptorⅡ,IL-sRⅡELISAKit人白介素可溶性受體Ⅱ(IL-sRⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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