中文名稱：Calcein-AM/PI活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒
英文名稱：Calcein-AM/PI Double Stain Kit
產(chǎn)品規(guī)格：500T
發(fā)貨周期：～3天
Calcein-AM是一種對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑，發(fā)綠色熒光（Ex=490nm, Em=55nm）。因其在傳統(tǒng)的Calcein（鈣黃綠素）基礎(chǔ)上引入乙酰甲氧基甲酯（AM）基團(tuán)，增加了疏水性，使其能夠輕易穿透活細(xì)胞膜。一旦進(jìn)入細(xì)胞后，Calcein-AM（本身不發(fā)熒光）被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成膜非滲透性的極性分子Calcein，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)并發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。與其它同類試劑（如BCECF-AM和CFDA)相比，由于Calcein, AM細(xì)胞毒性極低，是最適合用于活細(xì)胞染色的熒光探針，而且不會(huì)抑制任何的細(xì)胞功能，如增殖和淋巴球的趨化性。
由于死細(xì)胞缺乏酯酶，Calcein-AM僅用于對(duì)活細(xì)胞的細(xì)胞生存能力測(cè)試和短期標(biāo)記。因此，Calcein-AM常常與死細(xì)胞熒光探針如碘化丙啶（PI）等聯(lián)合使用，同時(shí)進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞的熒光雙重染色。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）不能穿過(guò)活細(xì)胞的細(xì)胞膜，僅能穿過(guò)死細(xì)胞膜的無(wú)序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核，并嵌入細(xì)胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光（Ex=535 nm, Em=67 nm），因此PI僅對(duì)死細(xì)胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發(fā)，因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞。而用545 nm激發(fā)，僅可觀察到死細(xì)胞。
本試劑盒的工作原理就在于Calcein-AM和PI的雙重染料，來(lái)進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞的雙重染色標(biāo)記，從而進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞水平的分析。根據(jù)我司優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)體系，單次就200μl細(xì)胞懸液進(jìn)行染色。
注意事項(xiàng)
）由于Calcein-AM對(duì)濕度非常敏感，若是Calcein-AM溶液每次取完需要量后，必須緊緊密封蓋子。建議根據(jù)單次用量，分裝密封保存。Calcein-AM工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。
2）碘化丙啶（PI）有一定的致癌性，操作時(shí)一定要注意防護(hù)。若接觸到皮膚，需要立即用自來(lái)水清洗。
3）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2個(gè)月


Calcein-AM/PI活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒注意事項(xiàng)：
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時(shí)間的影響，因此當(dāng)樣品較多時(shí)測(cè)定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
Nitrotyrosine EIA Antiserum （500 dtn）     Nitrotyrosine EIA Antiserum
Limonin     diδlactone Limonoic Acid； （2aR,4aR,4bR,5aS,8S,8aS,0aR,0bR,aS）8（3furanyl）decahydro2,2,4a,8atetramethylH,Hoxireno[d]pyrano[4’,3’:3,3a]isobenzofuro[5,4f][2]benzopyran4,6,（2H,5aH）trione
（）WIN 55，23 （mesylate） （0 mg）     [（3S）2，3dihydro5methyl3（4morpholinylmethyl）pyrrolo[，2，3de]，4benzoxazin6yl]naphthalenylmethanone， methanesulfonate； （）WIN 55，23 （mesylate）
（±）4HDoHE （00 ug）     （±）4hydroxy5E，7Z，0Z，Z，Z，Zdocosahexaenoic acid； 4hydroxy Docosahexaenoic Acid； （±）4HDoHE
IWP2V2 （5 mg）     N（6methyl2benzothiazolyl）2[[3，4，6，7tetrahydro4oxo3（phenylmethyl）thieno[3，2d]pyrimidin2yl]thio]acetamide； Inhibitor of Wnt Production2V2； IWP2V2
AEC Substrate Buffer     AEC Substrate Buffer
乳糖復(fù)發(fā)酵管培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫升
2.5雙(4聯(lián)本基).3.4噁二唑NA
神經(jīng)酸酶(梭菌)25克
2.6二基本酚 2,6Dimqthylphqnol 26
頭孢曲松鈉5克RT
Dieetonealcohol醇25克BR，98%
2甲氧西林鈉metxicillin wo7ium (AS)
4(2,5Dimetxylpxenylcarbamoyl)pxenylboronic acid 302
二酸,6己二醇酯 ,6Hexanediol diacrylate,80% 00 25G 通用試劑
叔丁醇鉀/KtB AR，97%， 25克 進(jìn)分
小鼠乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(CHAT)ELISA試劑盒 ，英文名： CHAT ELISA Kit
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子a(SDF-a/CXCL2)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseSomalcellderivedfactora,SDF-aELISAKit 96T/48T
人降脂素(Adipsin)免疫試劑盒 Human Adipsin ELISA Kit
RatAi-thyroid-globulinaibody,ATGA/TGABELISAKit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白H3-K56(mono/di)甲基化檢測(cè)試劑盒0/20次等
MouseAi-glucoprotein20,GP20ELISA試劑盒小鼠抗核膜糖蛋白20抗體(gp20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素33(IL33)ELISA試劑盒 ，英文名： IL33 ELISA Kit
人原鈣黏素(PCDH)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanprotocadherin,PCDHELISAKit 96T/48T
大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)免疫試劑盒 Rat Ai-thyroid-globulin aibody,ATGA/TGAB ELISA KIT
英文名稱RatHighsensitivityC-ReactiveProteinELISA大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)規(guī)格：96T/48T
Calcein-AM/PI活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒酒類L-蘋果酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitCOMP人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白規(guī)格：48T/96T

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