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| 銷售商： 上海莼試生物技術(shù)有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
中文名稱：Hoechst 33342/PI雙染試劑盒
英文名稱：Hoechst 33342/PI Double Stain Kit
產(chǎn)品規(guī)格：00T
發(fā)貨周期：～3天
Hoechst 33342/PI雙染試劑盒Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒（Hoechst 33342/PI Double Stain Kit）采用Hoechst 33342和碘化丙啶（PI）雙染的方法以區(qū)分凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞的試劑盒。其檢測原理是：細(xì)胞核熒光染料Hoechst 33342可以穿透細(xì)胞膜，嵌入雙鏈DNA后釋放藍(lán)色熒光。對于正常細(xì)胞，其可少許進入細(xì)胞膜使其染上低藍(lán)色。而凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞膜通透性增強，從而使得進入凋亡細(xì)胞內(nèi)的Hoechst 33342明顯多于正常細(xì)胞，熒光強度比正常細(xì)胞要高。另外，細(xì)胞發(fā)生凋亡時染色質(zhì)會固縮，從而使得染料能更有效和聚集的結(jié)合于DNA，并且凋亡細(xì)胞膜上的p-糖蛋白泵功能受損而不能有效的將Hoechst 33342排除到細(xì)胞外使其在細(xì)胞內(nèi)的積累增加，這些特征都使得凋亡細(xì)胞經(jīng)染色后熒光會比正常細(xì)胞明顯增強。但細(xì)胞核熒光染料PI不能穿透細(xì)胞膜完整的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞，即活細(xì)胞對PI染料拒染而對于壞死細(xì)胞，其細(xì)胞膜的完整性在早期即已喪失，可被PI染色。
經(jīng)上述兩種染料雙染后，使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測時，正常細(xì)胞為弱紅色熒光＋弱藍(lán)色熒光，凋亡細(xì)胞為弱紅色熒光＋強藍(lán)色熒光，壞死細(xì)胞為強紅色熒光＋弱藍(lán)色熒光。
本試劑盒染色快速方便，可用一步法或者兩步法進行染色。使用流式細(xì)胞儀檢測時，無需稀釋等配制過程，也無需再準(zhǔn)備其它任何溶液。本試劑盒足夠檢測00個樣品，每個樣品的細(xì)胞數(shù)量可達(dá)05-06個。
注意事項
) Hoechst 33342、PI對人體有害，請注意適當(dāng)防護；
2) Hoechst 33342、PI需避光，整個實驗過程盡量避光操作；
3) 熒光染料均存在淬滅情況，建議染色后需盡快檢測；
4) Hoechst 33342 與細(xì)胞孵育時間不宜過長，一般控制在20min以內(nèi)。太長容易引起該染料的發(fā)射光譜由藍(lán)光向紅光遷移，導(dǎo)致紅色熒光和藍(lán)色熒光比例改變。
5) 如果用于組織樣品檢測，則必須把組織消化制備成單細(xì)胞懸浮液后才可以進行檢測。
6) 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
儲存條件：-20℃，有效期2個月
注意事項：
、懸浮細(xì)胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當(dāng)樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
NnonanoylLHomoserine lactone （0 mg） N[（3S）tetrahydro2oxo3furanyl]nonanamide； C9HSL； NnonanoylLHomoserine lactone
Sinomenine （hydrochloride） （500 mg） Cucoline|NSC 02； （9a,a,a）7,8didehydro4hydroxy3,7dimethoxymethylmorphinan6one, monohydrochloride （:）
EDANS標(biāo)記的Asp天冬氨酸 FMOCAsp（EDANS）OH
Psoralidin （5 mg） 3，9dihydroxy2（3methyl2butenyl）6Hbenzofuro[3，2c][]benzopyran
norMephedrone （hydrochloride） （0 mg） 2amino（4methylphenyl）propanone， monohydrochloride； Mephedrone Metabolite|NSC 607； norMephedrone （hydrochloride）
ATRA； Tretinoin； NSC 28； Vitamin A Acid； alltrans Retinoic Acid； NSC 25 Retinoic acid
四乙酰呋核糖，英文名或英文縮寫：,2,3,5TetraOacetylβDribofuranose，級別：，98%，規(guī)格：0毫升
LThreonine 5g Sigma分裝
DDM月桂�；溠刻擒�500毫克高，98%
甜菜減言醋鹽 Bqtcinq xy7nochloridq;Lycinq xy7nochloridq;Oxynqurinq xy7nochloridq;TriMqthyl glycocoll xy7nochloridq;CcrboxyN,N,NtriMqthylMqthcncMiniuM
4錄α奈酚，英文名或英文縮寫：4CN，級別：IND，規(guī)格：克
S基L半胱安醋 SMqthylLcystqinq 44
3metxoxycarbonyl5nitnopxenylboronic acid 208
R(+)α甲基芐胺 (R)(+)αMethylbenzylamine,98% 869 25ML 通用試劑
DL精酸鹽酸鹽/鹽酸DL精酸/DLArginine HC BR，99% 25克 國產(chǎn)/進口
小鼠乙酰輔酶A(acetyl-CoA)ELISA試劑盒 ，英文名： acetyl-CoA ELISA Kit
小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-40)ELISA檢測試劑盒Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-40ELISAKit 96T/48T
人膠原交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒 Human pyridinoline,PYD ELISA Kit
Ratai-thrombieceptor,AELISAKit大鼠抗凝血酶受體(A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白H3-K4乙�；瘷z測試劑盒0/20次等
Mouseai-endothelialcellaibody,AECAELISA試劑盒小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素33(IL-33)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-33 ELISA Kit
大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA檢測試劑盒Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit 96T/48T
人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)免疫試劑盒 Human LAT ELISA Kit
英文名稱MouseEpinephrineELISAKit小鼠(Epinephrine)規(guī)格：96T/48T
Hoechst 33342/PI雙染試劑盒TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB間接檢測試劑盒(含HRP二抗)20次
RabbitLysozyme,LZMELISA試劑盒兔溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
英文名稱：Hoechst 33342/PI Double Stain Kit
產(chǎn)品規(guī)格：00T
發(fā)貨周期：～3天
Hoechst 33342/PI雙染試劑盒Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒（Hoechst 33342/PI Double Stain Kit）采用Hoechst 33342和碘化丙啶（PI）雙染的方法以區(qū)分凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞的試劑盒。其檢測原理是：細(xì)胞核熒光染料Hoechst 33342可以穿透細(xì)胞膜，嵌入雙鏈DNA后釋放藍(lán)色熒光。對于正常細(xì)胞，其可少許進入細(xì)胞膜使其染上低藍(lán)色。而凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞膜通透性增強，從而使得進入凋亡細(xì)胞內(nèi)的Hoechst 33342明顯多于正常細(xì)胞，熒光強度比正常細(xì)胞要高。另外，細(xì)胞發(fā)生凋亡時染色質(zhì)會固縮，從而使得染料能更有效和聚集的結(jié)合于DNA，并且凋亡細(xì)胞膜上的p-糖蛋白泵功能受損而不能有效的將Hoechst 33342排除到細(xì)胞外使其在細(xì)胞內(nèi)的積累增加，這些特征都使得凋亡細(xì)胞經(jīng)染色后熒光會比正常細(xì)胞明顯增強。但細(xì)胞核熒光染料PI不能穿透細(xì)胞膜完整的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞，即活細(xì)胞對PI染料拒染而對于壞死細(xì)胞，其細(xì)胞膜的完整性在早期即已喪失，可被PI染色。
經(jīng)上述兩種染料雙染后，使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測時，正常細(xì)胞為弱紅色熒光＋弱藍(lán)色熒光，凋亡細(xì)胞為弱紅色熒光＋強藍(lán)色熒光，壞死細(xì)胞為強紅色熒光＋弱藍(lán)色熒光。
本試劑盒染色快速方便，可用一步法或者兩步法進行染色。使用流式細(xì)胞儀檢測時，無需稀釋等配制過程，也無需再準(zhǔn)備其它任何溶液。本試劑盒足夠檢測00個樣品，每個樣品的細(xì)胞數(shù)量可達(dá)05-06個。
注意事項
) Hoechst 33342、PI對人體有害，請注意適當(dāng)防護；
2) Hoechst 33342、PI需避光，整個實驗過程盡量避光操作；
3) 熒光染料均存在淬滅情況，建議染色后需盡快檢測；
4) Hoechst 33342 與細(xì)胞孵育時間不宜過長，一般控制在20min以內(nèi)。太長容易引起該染料的發(fā)射光譜由藍(lán)光向紅光遷移，導(dǎo)致紅色熒光和藍(lán)色熒光比例改變。
5) 如果用于組織樣品檢測，則必須把組織消化制備成單細(xì)胞懸浮液后才可以進行檢測。
6) 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
儲存條件：-20℃，有效期2個月
注意事項：
、懸浮細(xì)胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當(dāng)樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
NnonanoylLHomoserine lactone （0 mg） N[（3S）tetrahydro2oxo3furanyl]nonanamide； C9HSL； NnonanoylLHomoserine lactone
Sinomenine （hydrochloride） （500 mg） Cucoline|NSC 02； （9a,a,a）7,8didehydro4hydroxy3,7dimethoxymethylmorphinan6one, monohydrochloride （:）
EDANS標(biāo)記的Asp天冬氨酸 FMOCAsp（EDANS）OH
Psoralidin （5 mg） 3，9dihydroxy2（3methyl2butenyl）6Hbenzofuro[3，2c][]benzopyran
norMephedrone （hydrochloride） （0 mg） 2amino（4methylphenyl）propanone， monohydrochloride； Mephedrone Metabolite|NSC 607； norMephedrone （hydrochloride）
ATRA； Tretinoin； NSC 28； Vitamin A Acid； alltrans Retinoic Acid； NSC 25 Retinoic acid
四乙酰呋核糖，英文名或英文縮寫：,2,3,5TetraOacetylβDribofuranose，級別：，98%，規(guī)格：0毫升
LThreonine 5g Sigma分裝
DDM月桂�；溠刻擒�500毫克高，98%
甜菜減言醋鹽 Bqtcinq xy7nochloridq;Lycinq xy7nochloridq;Oxynqurinq xy7nochloridq;TriMqthyl glycocoll xy7nochloridq;CcrboxyN,N,NtriMqthylMqthcncMiniuM
4錄α奈酚，英文名或英文縮寫：4CN，級別：IND，規(guī)格：克
S基L半胱安醋 SMqthylLcystqinq 44
3metxoxycarbonyl5nitnopxenylboronic acid 208
R(+)α甲基芐胺 (R)(+)αMethylbenzylamine,98% 869 25ML 通用試劑
DL精酸鹽酸鹽/鹽酸DL精酸/DLArginine HC BR，99% 25克 國產(chǎn)/進口
小鼠乙酰輔酶A(acetyl-CoA)ELISA試劑盒 ，英文名： acetyl-CoA ELISA Kit
小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-40)ELISA檢測試劑盒Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-40ELISAKit 96T/48T
人膠原交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒 Human pyridinoline,PYD ELISA Kit
Ratai-thrombieceptor,AELISAKit大鼠抗凝血酶受體(A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白H3-K4乙�；瘷z測試劑盒0/20次等
Mouseai-endothelialcellaibody,AECAELISA試劑盒小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素33(IL-33)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-33 ELISA Kit
大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA檢測試劑盒Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit 96T/48T
人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)免疫試劑盒 Human LAT ELISA Kit
英文名稱MouseEpinephrineELISAKit小鼠(Epinephrine)規(guī)格：96T/48T
Hoechst 33342/PI雙染試劑盒TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB間接檢測試劑盒(含HRP二抗)20次
RabbitLysozyme,LZMELISA試劑盒兔溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
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