中文名稱：細(xì)胞增殖示蹤熒光探針
英文名稱：CFDA, SE
產(chǎn)品規(guī)格：25mg
發(fā)貨周期：～3天
CFDA, SE，英文全稱Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞示蹤染料，不僅可用于細(xì)胞增殖的體外實(shí)驗(yàn)，還可用于追蹤細(xì)胞在體內(nèi)的分裂增殖過程。
CFDA, SE是二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate，F(xiàn)DA）的衍生物，具細(xì)胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當(dāng)通過被動(dòng)運(yùn)輸穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活細(xì)胞后，可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester，CFSE），可發(fā)強(qiáng)烈的綠色熒光，不能穿透細(xì)胞膜，能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上，同時(shí)過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動(dòng)擴(kuò)散回到細(xì)胞外培養(yǎng)基內(nèi)，被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)月，因此非常適用于細(xì)胞群落分析。
CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中，CFSE 標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中，熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半，通過流式細(xì)胞儀（FL通道）根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同，可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞，分裂一次（/2的熒光強(qiáng)度），二次（/4的熒光強(qiáng)度），三次（/8的熒光強(qiáng)度），以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFSA，SE可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。CFDA, SE最常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè)，也可用于成纖維細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞，造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測(cè)。
CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，Ex=494nm，Em=52nm，除了流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖外，還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。本品以粉末形式提供，需用DMSO制備儲(chǔ)存液后再使用。


細(xì)胞增殖示蹤熒光探針注意事項(xiàng)：
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時(shí)間的影響，因此當(dāng)樣品較多時(shí)測(cè)定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
Nordihydroguaiaretic Acid （500 mg）     4，4’（2，3dimethyl，4butanediyl）bis，2benzenediol； NDGA； Nordihydroguaiaretic Acid
Celebrex， Celebra， Celecox， SC58635     Celecoxib
Milrinone （0 mg）     ，6dihydro2methyl6oxo[3，4’bipyridine]5carbonitrile； Primacor |WIN ，203； Milrinone
5fluoro SDB006 （ mg）     Nbenzyl（5fluoropentyl）Hindole3carboxamide
Apafant （ mg）     3[4（2chlorophenyl）9methyl6Hthieno[3，2f][，2，4]triazolo[4，3a][，4]diazepin2yl]（4morpholinyl）propanone； WEB 2086； Apafant
Coenzyme Q0 ( g)     Ubiquinone|CoQ|NSC |Ubidecarenone, Coenzyme Q0, 2[(2E,6E,E,E,E,22E,26E,3E,34E)3,7,,,,23,27,3,35,39decamethyl2,6,,,,22,26,3,34,tetracontadecaenyl]5,6dimethoxy3methyl2,5cyclohexadiene,4dione
液體硫酸鹽培養(yǎng)基(不含瓊脂)00克
蛋白胨水培養(yǎng)基Peptone Water Medium
抗生Ⅶ號(hào)培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：25克
肌酸鹽酸鹽 Sarcosine methyl ester hydrochloride,... 50 5G 通用試劑
三錄化典 Iodinq trichloridq 86244
LARGININEMONOxy7noCHLORIDEL精酸鹽酸鹽美國(guó)藥典級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma
三聚全 sTrioxcnq
6Fluorpyridine2boronic acid 66
升麻醇3OβD吡... Cimigenol3OβDxylpyranoside (≥98... 暫不提供 0MG 標(biāo)準(zhǔn)品
L賴酸鹽酸鹽/(S)2,6二基己酸鹽酸鹽/L氫賴酸/LLysine HCL BR，99% 25克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒 ，英文名： INH-B ELISA Kit
小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseannexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit 96T/48T
人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒 Human Hpt/HP ELISA KIT
Ratai-IVIgGaibodyELISAKit大鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白H3-K23甲基化(mono/di)檢測(cè)試劑盒0/20次等
MouseannexinⅤ,ANX-ⅤELISA試劑盒小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat pregnancy associated plasma protein A (PAPP-A) ELISA Kit 大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒
HumanOsteoprotegerin,OPGELISAKIT 人骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCandidaAlbicans,C.albicansELISA試劑盒人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
細(xì)胞增殖示蹤熒光探針重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體轉(zhuǎn)染試劑盒0次
Humansolublefibrinmonomercomplex,SFMCELISAKit人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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