中文名稱：細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒
英文名稱：CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit
產(chǎn)品規(guī)格：500T
發(fā)貨周期：～3天
細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE對細(xì)胞進(jìn)行示蹤及增殖檢測的試劑盒，由CFDA,SE粉末、溶劑及相關(guān)細(xì)胞染色緩沖液組成，該試劑盒主要工作原理為：CFDA, SE具有細(xì)胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當(dāng)通過被動運(yùn)輸穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活細(xì)胞后，可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE），后者可發(fā)強(qiáng)烈的綠色熒光，不能穿透細(xì)胞膜，能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上，同時過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動擴(kuò)散回到細(xì)胞外培養(yǎng)基內(nèi)，被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標(biāo)記的時間可達(dá)數(shù)月，因此非常適用于細(xì)胞群落分析。
CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中，CFSE 標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細(xì)胞中，熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半，通過流式細(xì)胞儀（FL通道）根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同，可檢測出未分裂細(xì)胞，分裂一次（/2的熒光強(qiáng)度），二次（/4的熒光強(qiáng)度），三次（/8的熒光強(qiáng)度），以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFSA，SE可檢測分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細(xì)胞染色的功能。CFDA, SE最常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測，也可用于成纖維細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞，造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測。
CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，Ex=494nm，Em=52nm，除了流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞增殖外，還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。
本品為CFDA，SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒，包含配制CFDA，SE儲存液所需的溶劑和細(xì)胞標(biāo)記用的染色緩沖液，簡化了實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備工作。另，CFDA,SE標(biāo)記細(xì)胞一般5min即可完成，對于不同細(xì)胞，需要自行摸索最佳標(biāo)記時間。按照每個樣本的標(biāo)記體積為2ml計算。

注意事項(xiàng)：
、懸浮細(xì)胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當(dāng)樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
NS398 （0 mg）     N[2（cyclohexyloxy）4nitrophenyl]methanesulfonamide； NS398
AcLeuLeuarginal， hemisulfate， AcLeuLeuArginal     Leupeptin， hemisulfate （Microbial）
Apelin36 （ mg）     Apelin36
Ticagrelor （5 mg）     ARC 32XX|AZD 60|Brilinta|Brilique
4DAMP （25 mg）     4[（2，2diphenylacetyl）oxy]，dimethylpiperidinium， monoiodide； 4DiphenylacetoxyNmethylpiperidine methiodide； 4DAMP
5trans U6 (50 mg)     5,6trans U6, 5trans U6, 9,dideoxy9.alpha.,.alpha.methanoepoxyprosta5E,Edienoic acid
KANAMYCINSULFATE卡那霉素美國藥典級白色至米白色精細(xì)粉末RTsigma
對磺酰L精酸鹽酸鹽NapTosylLargineine metxyl estar xy7nochloride
M肉湯shēng huà shì jì容量：500克
2′脫氧胞苷5′... 2′Deoxycytidine 5′triphosphate dis... 0235 25MG 通用試劑
六二醇 Hqxcqthylqnq glycol 68
litxiumstearate十八酸25克FGC，4060目
草醋內(nèi);二醋內(nèi) wo7ium oxclctq;qthcnqdioic ccid diwo7ium sclt;Oxclic ccid wo7ium sclt 60
4Fluoro3nitnopxenylboronic acid pinacol ester 70
蘆薈大黃素 Aloeemodin (≥98%,HPLC) 2 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
D組酸/D2基3(4咪唑基)酸/D組織酸/D甘噁啉5閃酸/DHistidine BR，99% 5克 國產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠抑制素βA(INHβA)ELISA試劑盒 ，英文名： INHβA ELISA Kit
兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA檢測試劑盒RabbitEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 96T/48T
犬胱天蛋白酶2(Casp-2)免疫試劑盒 Canine Caspase 2,Casp-2 ELISA Kit
英文名稱HumancardiacoponinIELISAKit人心肌肌鈣蛋白I(cTNI)ELISAKit規(guī)格：96T/48T
化線粒體腫脹比色法測定試劑盒50次
RatIerleukin3,IL-3ELISA試劑盒大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human deoxypyridinoline / deoxypyridinoline (DPD) ELISA Kit 人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒
HumaniggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-,EM-ELISAKit 人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-(EM-)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCarbohydrateaigen9-9,CA9-9ELISA試劑盒人糖鏈抗原9-9(CA9-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體轉(zhuǎn)染試劑盒0次
HumansolubleFactor-relatedApoptosisligand,sFASL/Apo-ELISAKit人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)

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