中文名稱:
細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI)
英文名稱:Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:20 rxn
發(fā)貨周期:~3天
細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI)Annexin V-FITC/PI細(xì)胞凋亡檢測試劑盒是用FITC標(biāo)記了的Annexin V作為探針,來檢測細(xì)胞早期凋亡的發(fā)生,可用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀或其他熒光檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。
其檢測原理為:在正常的活細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphotidylserine,PS)位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在早期凋亡的細(xì)胞中,PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-Ⅴ(膜聯(lián)蛋白-V)是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與PS高親和力結(jié)合?赏ㄟ^細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。
另外,本試劑盒中還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用來區(qū)分存活的早期細(xì)胞和壞死或晚期凋亡細(xì)胞。PI是一種核酸染料,它不能透過正常細(xì)胞或早期凋亡細(xì)胞的完整的細(xì)胞膜,但可以透過凋亡晚期和壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此,將Annexin V與PI聯(lián)合使用時(shí),PI 則被排除在活細(xì)胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡細(xì)胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞同時(shí)被FITC 和PI 結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽性(Annexin V+/PI+)。
儲(chǔ)存條件:4℃,有效期一年。
注意事項(xiàng):
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例,也受作用時(shí)間的影響,因此當(dāng)樣品較多時(shí)測定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色,需避光保存,長時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí),請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
Oleyloxyethyl Phosphorylcholine (5 mg) O9Zoctadecenylethyleneglycol2Ophosphorylcholine; Oleyloxyethyl Phosphorylcholine
AcLeuLeuarginal, hemisulfate, AcLeuLeuArginal Leupeptin, hemisulfate (Microbial)
Apelin (25 mg) LglutaminylLarginylLprolylLarginylLleucylLserylLhistidylLlysylglycylLprolylLmethionylLprolylLphenylalanine; Apelin
Ticagrelor (0 mg) ARC 32XX|AZD 60|Brilinta|Brilique
Nimodipine (500 mg) ,4dihydro2,6dimethyl4(3nitrophenyl)3(2methoxyethyl) 5(methylethyl) ester, 3,5pyridinedicarboxylic acid; Admon|BAYe 96|Periplum; Nimodipine
5trans U440 (50 mg) 5,6trans U, 5trans U440, 9,dideoxy9.alpha.,.alpha.epoxymethanoprosta5E,Edienoic acid
LIGHTGREENSFYELLOWISH亮綠高級(jí)深紫紅色精細(xì)粉末RTsigma
53對(duì)兒價(jià)分藍(lán)Pxyleol BLUE
N本基代shēng huà shì jì容量:00克
5肌苷二三鈉鹽 Inosine5'diphosphate trisodium salt 86 500MG 通用試劑
己糖激酶(20℃) HqXOKINcSq 900
litxiumoxalate乙二酸公斤AR
0020對(duì)本二;對(duì)酞酸;松油本二pPhthalic acid;Benzene,4dicarboxylic acid;Tephthol
Propylgallate沒食子酸酯50毫克BR
馬尿酸鈉 Sodium hippurate,≥99% 5329 25G 通用試劑
tertButyl bromide,98% 50 00G 通用試劑
小鼠原激活的蛋白激酶/MAP激酶(Mapk/Erk2/Mapk/Prkm)ELISA試劑盒 ,英文名: Mapk/Erk2/Mapk/Prkm ELISA Kit
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA檢測試劑盒MouseSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 96T/48T
人谷氨酸[NMDA]受體亞基ε-2(-2)抗體免疫試劑盒 Human -2 Aibody ELISA Kit
RatGlycatedhemoglobinAc,AcELISAKit大鼠糖化血紅蛋白Ac(Ac)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ATP酶法冰凍切片動(dòng)物肌肉組織分型染色試劑盒20次
MouseHistamine,HISELISA試劑盒小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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英文名稱MouseCCL7ELISAKit小鼠CCL7規(guī)格:96T/48T
冰凍切片組織鈣交換體(NCX)蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒0/20次
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細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI)操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(完全培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
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