中文名稱(chēng)：細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒I(POD)
英文名稱(chēng)：
產(chǎn)品規(guī)格：20T
發(fā)貨周期：～3天
工作原理：
在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來(lái)觀(guān)察細(xì)胞的死亡，其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚，時(shí)間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活，細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA被切割，出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口，并產(chǎn)生與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將地高辛標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH末端，DIG-dUTP結(jié)合在DNA斷點(diǎn)部位，可以通過(guò)生物標(biāo)記的抗地高辛抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后，再結(jié)合鏈酶親和素-過(guò)氧化物酶(SABC)，然后加入顯色底物DAB予以顯示。凋亡的細(xì)包核呈黃色，從而可以在顯微鏡下觀(guān)察到著色的凋亡細(xì)胞。
試劑盒內(nèi)容：
．標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)ml
2．末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl
3．DIG-dUTP(×20)20μl
4．封閉液(Blocking Reagent)4ml
5．生物素化抗地高辛抗體(× 00)20μl
6．SABC(× 00)20μl
7．Proteinase K(×200)50μl
8．抗體稀釋液 4ml
保存條件：-20℃冰凍保存。
保存期：一年


細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒I(POD)注意事項(xiàng)：
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時(shí)間的影響，因此當(dāng)樣品較多時(shí)測(cè)定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
PA Assay Enzyme Mixture （ ea）     PA Assay Enzyme Mixture
伏立諾他     SAHA （0 mg）
Benzamideoxime （500 mg）     Nhydroxybenzenecarboximidamide； NSC 999； Benzamideoxime
Desomorphine （5 mg）     d； 4,5αepoxymethylmorphinan3ol
PB22 Npentanoic acid metabolite （0 mg）     5（3（（quinolin8yloxy）carbonyl）Hindolyl）pentanoic acid； PB22 Npentanoic acid metabolite
MicrocystinLR (00 ug)     CyanoginosinLR, MicrocystinLR, Toxin T  (Microcystis aeruginosa)
AEBSFAEBSF蛋白組學(xué)級(jí)50MG307COLD
6284408葡MegluMine (AS)
(癸基)基化，英文名或英文縮寫(xiě)：Decyltrimetxylammonium bromide，級(jí)別：超，99%，規(guī)格：5克
beta蒎(28℃) (S)()bqtcPinqnq 3
流醋 LqcD(II) SULFcTq
GlyGlyLen甘酰甘酰L亮酸克BR，98%
輕氧化內(nèi);苛性?xún)?nèi) wo7ium xy7noxidq; wo7ium hydrctq; Whitq ccustic; 0
4Chloro2metxylpxenylboronic acid 20902
2芐胺 2Chlorobenzylamine,% 899 25G 通用試劑
D葡萄糖二鈉/葡萄糖二鈉鹽/葡萄糖酸二鈉鹽/GPNa2 生物技術(shù)級(jí)，98%， 克 進(jìn)分
小鼠載脂蛋白H(APOH)ELISA試劑盒 ，英文名： APOH ELISA Kit
猴可溶性血管細(xì)胞粘附分子(sVCAM-)ELISA檢測(cè)試劑盒Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule,sVCAM-ELISAKit 96T/48T
犬結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)免疫試劑盒 Canine connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit
英文名稱(chēng)HumahrombomodulinELISAKit人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
化線(xiàn)粒體凍存液(酶學(xué)和膜結(jié)構(gòu)保護(hù))50毫升
RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素β前體(pro-ILB)ELISA試劑盒 ，英文名： pro-ILB ELISA Kit
大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測(cè)試劑盒RatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 96T/48T
人SWI/SNF相關(guān), 基質(zhì)關(guān)聯(lián),肌動(dòng)蛋白依賴(lài)染色質(zhì)調(diào)控因子,亞家族c,成員(SMARCC)免疫試劑盒 Human SMARCC ELISA Kit
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒I(POD)英文名稱(chēng)MouseNoradrenalinELISAKit小鼠去甲(Noradrenalin)規(guī)格：96T/48T
TSH-BETA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次
Rabbitnuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISA試劑盒兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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