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細胞增殖示蹤熒光探針CFDA, SE，英文全稱Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，是一種可對活細胞進行熒光標記的細胞示蹤染料，不僅可用于細胞增殖的體外實驗，還可用于追蹤細胞在體內(nèi)的分裂增殖過程。
CFDA, SE是二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate，F(xiàn)DA）的衍生物，具細胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當通過被動運輸穿透細胞膜進入活細胞后，可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester，CFSE），可發(fā)強烈的綠色熒光，不能穿透細胞膜，能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細胞蛋白質(zhì)上，同時過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動擴散回到細胞外培養(yǎng)基內(nèi)，被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA, SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)月，因此非常適用于細胞群落分析。
CFDA, SE標記細胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，CFSE 標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀（FL通道）根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次（/2的熒光強度），二次（/4的熒光強度），三次（/8的熒光強度），以及更多分裂次數(shù)的細胞。CFSA，SE可檢測分裂次數(shù)多達八次甚至更多。經(jīng)CFDA, SE標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。CFDA, SE最常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可用于成纖維細胞，自然殺傷細胞，造血祖細胞等其他細胞的增殖檢測。
CFDA, SE標記細胞呈綠色熒光，Ex=494nm，Em=52nm，除了流式細胞儀檢測細胞增殖外，還可用熒光酶標板定量活細胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。本品以粉末形式提供，需用DMSO制備儲存液后再使用。
注意事項
）不同的細胞其細胞內(nèi)酯酶活性不同，因此染色效果具有差異性。
2）熒光染料均存在淬滅問題，染色過程需盡量避光。
3）為了您的健康，實驗操作時請穿實驗服和帶一次性手套。
以下是細胞生物學試劑詳細說明：
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05，，不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞，建議適用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不當，可能引起假陽性，而用細胞刮子會造成細胞粘連成團，而影響檢測。可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導致熒光的淬滅，請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同，因而流式檢測的熒光補償也不同，因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導處理的細胞作為對照，進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點：
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好�？朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液，不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽，不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方，將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一，因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況，節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用，
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色，便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結(jié)合效果，大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性，即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000～2000g 離心 min，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
PAD Ammonia Detector （ ea） PAD Ammonia Detector
AcWEHDAFC， Caspase5熒光底物 Caspase5 Substrate WEHDAFC
H9 （hydrochloride） （25 mg） N（2aminoethyl）5isoquinolinesulfonamide， dihydrochloride； Protein Kinase Inhibitor H9； H9 （hydrochloride）
Kasugamycin （hydrochloride） （5 g） 3O[2amino4[（carboxyiminomethyl）amino]2,3,4,6tetradeoxyαDarabinohexopyranosyl]Dchiroinositol, monohydrochloride
AcDEVDCMK （5 mg） NacetylLαaspartylLαglutamylN[（S）（carboxymethyl）3chloro2oxopropyl]Lvalinamide； AcAspGluValAspCMK|Caspase3 Inhibitor III； AcDEVDCMK
5Z),Z)Eicosadienoic Acid (5 mg) 5Z),Z)Eicosadienoic Acid, (5Z,Z)eicosadienoic acid
甘油5毫克2～8℃
633胞苷酸Cytidylic acid
氧化亞銅shēng huà shì jì容量：500克
4,5二基咪唑 4,5oimidazole,99.0% 7 5G 通用試劑
L鳥安醋言醋鹽 L(+)Ornithinq xy7nochloridq 34
HYBRIDIZATIONCOCKTAILS雜交混合物,50%甲先胺000MLFrozen
,2,3,5TetraOAcetylβL 00mg原裝 INALCO58/28
T7DNA聚合酶，英文名或英文縮寫：T7 DNA Polymerase，級別：BR，破壁率90%，規(guī)格：5克
醋洗石棉 csbqstos ccid wcshqd 3
CESIUMCHLORIDE錄化銫超級白色立方結(jié)晶RTsigma
小鼠再生基因蛋白a(REG-a)ELISA試劑盒 ，英文名： REG-a ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA檢測試劑盒MousecoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 96T/48T
人精脒/精胺N()-乙酰轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(SATL)免疫試劑盒 Human SATL ELISA Kit
RatAngiogenin,ANGELISAKit大鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞線粒體復合物IV蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒0/20次
mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISA試劑盒小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素β(IL-β)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-β ELISA Kit
大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA檢測試劑盒Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit 96T/48T
人STEAP家族成員(Steap)免疫試劑盒 human Steap ELISA Kit
英文名稱MousePAPELISAKit小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)規(guī)格：96T/48T
細胞增殖示蹤熒光探針TUBULIN蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次
RabbitOsteopoin,OPNELISA試劑盒兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
CFDA, SE是二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate，F(xiàn)DA）的衍生物，具細胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當通過被動運輸穿透細胞膜進入活細胞后，可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester，CFSE），可發(fā)強烈的綠色熒光，不能穿透細胞膜，能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細胞蛋白質(zhì)上，同時過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動擴散回到細胞外培養(yǎng)基內(nèi)，被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA, SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)月，因此非常適用于細胞群落分析。
CFDA, SE標記細胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，CFSE 標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀（FL通道）根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次（/2的熒光強度），二次（/4的熒光強度），三次（/8的熒光強度），以及更多分裂次數(shù)的細胞。CFSA，SE可檢測分裂次數(shù)多達八次甚至更多。經(jīng)CFDA, SE標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。CFDA, SE最常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可用于成纖維細胞，自然殺傷細胞，造血祖細胞等其他細胞的增殖檢測。
CFDA, SE標記細胞呈綠色熒光，Ex=494nm，Em=52nm，除了流式細胞儀檢測細胞增殖外，還可用熒光酶標板定量活細胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。本品以粉末形式提供，需用DMSO制備儲存液后再使用。
注意事項
）不同的細胞其細胞內(nèi)酯酶活性不同，因此染色效果具有差異性。
2）熒光染料均存在淬滅問題，染色過程需盡量避光。
3）為了您的健康，實驗操作時請穿實驗服和帶一次性手套。
以下是細胞生物學試劑詳細說明：
| 中文名稱 | 細胞增殖示蹤熒光探針 |
| 英文名稱 | CFDA, SE |
| 規(guī)格 | 25mg |
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05，，不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞，建議適用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不當，可能引起假陽性，而用細胞刮子會造成細胞粘連成團，而影響檢測。可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導致熒光的淬滅，請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同，因而流式檢測的熒光補償也不同，因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導處理的細胞作為對照，進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點：
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好�？朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液，不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽，不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方，將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一，因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況，節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用，
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色，便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結(jié)合效果，大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性，即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。
操作步驟：
、貼壁細胞的消化①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000～2000g 離心 min，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
PAD Ammonia Detector （ ea） PAD Ammonia Detector
AcWEHDAFC， Caspase5熒光底物 Caspase5 Substrate WEHDAFC
H9 （hydrochloride） （25 mg） N（2aminoethyl）5isoquinolinesulfonamide， dihydrochloride； Protein Kinase Inhibitor H9； H9 （hydrochloride）
Kasugamycin （hydrochloride） （5 g） 3O[2amino4[（carboxyiminomethyl）amino]2,3,4,6tetradeoxyαDarabinohexopyranosyl]Dchiroinositol, monohydrochloride
AcDEVDCMK （5 mg） NacetylLαaspartylLαglutamylN[（S）（carboxymethyl）3chloro2oxopropyl]Lvalinamide； AcAspGluValAspCMK|Caspase3 Inhibitor III； AcDEVDCMK
5Z),Z)Eicosadienoic Acid (5 mg) 5Z),Z)Eicosadienoic Acid, (5Z,Z)eicosadienoic acid
甘油5毫克2～8℃
633胞苷酸Cytidylic acid
氧化亞銅shēng huà shì jì容量：500克
4,5二基咪唑 4,5oimidazole,99.0% 7 5G 通用試劑
L鳥安醋言醋鹽 L(+)Ornithinq xy7nochloridq 34
HYBRIDIZATIONCOCKTAILS雜交混合物,50%甲先胺000MLFrozen
,2,3,5TetraOAcetylβL 00mg原裝 INALCO58/28
T7DNA聚合酶，英文名或英文縮寫：T7 DNA Polymerase，級別：BR，破壁率90%，規(guī)格：5克
醋洗石棉 csbqstos ccid wcshqd 3
CESIUMCHLORIDE錄化銫超級白色立方結(jié)晶RTsigma
小鼠再生基因蛋白a(REG-a)ELISA試劑盒 ，英文名： REG-a ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA檢測試劑盒MousecoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 96T/48T
人精脒/精胺N()-乙酰轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(SATL)免疫試劑盒 Human SATL ELISA Kit
RatAngiogenin,ANGELISAKit大鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞線粒體復合物IV蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒0/20次
mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISA試劑盒小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素β(IL-β)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-β ELISA Kit
大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA檢測試劑盒Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit 96T/48T
人STEAP家族成員(Steap)免疫試劑盒 human Steap ELISA Kit
英文名稱MousePAPELISAKit小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)規(guī)格：96T/48T
細胞增殖示蹤熒光探針TUBULIN蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次
RabbitOsteopoin,OPNELISA試劑盒兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
手機版：細胞增殖示蹤熒光探針
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