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| 銷售商： 上海莼試生物技術(shù)有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
中文名稱：臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒
英文名稱：Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格：00T
發(fā)貨周期：～3天
本試劑盒各組分均以無菌形式提供，可直接用于細胞實驗。臺盼藍（Trypan Blue），一種偶氮、親水性酸性藍色染料，可透過死亡細胞和垂死細胞的細胞膜，將其染成藍色，而活細胞由于其細胞膜的完整性，可將臺盼藍排斥在外，因此，通過顏色的變化即可將活細胞（活細胞呈透明無色）和死細胞鑒別開來，基于此原理，本品廣泛用于細胞活性水平的常規(guī)評估。臺盼藍還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺盼藍與蛋白結(jié)合形成的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光。另外，臺盼藍（合適濃度）還常用來淬滅細胞表面的自熒光或者其他熒光信號。
使用方法
）對于懸浮細胞，離心收集細胞，對其充分清洗后，加入適量細胞重懸液重懸細胞制成單細胞懸液；對于貼壁細胞，先用胰酶消化細胞，再按照懸浮細胞的方法制備單細胞懸液。
2）取0.ml單細胞懸液，按照:比例與0.ml 0.4%臺盼藍染色液充分混勻，室溫染色3~0min。
【注】：因臺盼藍具有細胞毒性，染色時間過久會導(dǎo)致部分死細胞染色，干擾計數(shù)。通常染色3min即可。
3）取少量上述染色細胞加入血細胞計數(shù)板，于顯微鏡低倍鏡下計數(shù)，分別計算著色細胞（即損傷細胞和死細胞）和總細胞。
【注】：用移液槍加染色細胞時，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其完全覆蓋住整個小室。不可過量加液或者不足量。
【注2】：mm2方格內(nèi)細胞數(shù)通�？刂圃�20-50 cells，當細胞數(shù)超過200個，需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。
4）按照以下公式來計算細胞數(shù)目和活細胞百分比，
a，計算每ml細胞數(shù)目：Cells/ml=mm2大方格內(nèi)的平均細胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×04；【注】：此時的稀釋倍數(shù)為：步驟2所取的單細胞懸液與臺盼藍染色液混合后的稀釋倍數(shù)
b，總細胞數(shù)目：Total cells=（Cells/ml）×最初制備單細胞懸液的總體積
c，細胞活力值：Viability（%）=（總細胞數(shù)-總著色細胞數(shù)）/總細胞數(shù)×00
【注】：通常情況，健康的對數(shù)期培養(yǎng)細胞，活細胞至少占到95%。
儲存條件：室溫，有效期2年
臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒注意事項：
、懸浮細胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導(dǎo)致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
PAD Stop Solution （ ea） PAD Stop Solution
ZWEHDFMK， Caspase5抑制劑（氟） Caspase5 Inhibitor ZWEHDFMK
H9 （hydrochloride） （0 mg） N（2aminoethyl）5isoquinolinesulfonamide， dihydrochloride； Protein Kinase Inhibitor H9； H9 （hydrochloride）
Kasugamycin （hydrochloride） （0 g） 3O[2amino4[（carboxyiminomethyl）amino]2,3,4,6tetradeoxyαDarabinohexopyranosyl]Dchiroinositol, monohydrochloride
AcDEVDCMK （ mg） NacetylLαaspartylLαglutamylN[（S）（carboxymethyl）3chloro2oxopropyl]Lvalinamide； AcAspGluValAspCMK|Caspase3 Inhibitor III； AcDEVDCMK
GW 87X (0 mg) GW 87X, 6[2[5chloro2[(2,4digluorophenyl)methoxy]phenyl]cyclopentenyl]2pyridinecarboxylic acid
抗生素Ⅱ號培養(yǎng)基(Ph7.8～8.0)shēng huà shì jì容量：00克
3433胞苷5三鈉鹽(+4℃)Deoxythymidine triphosphate
微量可調(diào)移液器P00克保存：20℃
2甲基代 2Chloromethylpyridinium iodide,97% 3320 500G 通用試劑
L脯安醇 L(+)Prolinol 332
HYBRIDIZATIONCOCKTAIL,%formide雜交混合物,%甲先胺輕微混濁液體FROZENsigma
0882扶西汀相關(guān)物質(zhì)AFluoxetine Related CoMpound A;Nmetxyl3pxenyl3[(alpha,alpha,alpha(trifluoroMtolyl)oxy]propylaMine xy7nochloride
2xy7noxymetxyl4metxoxypxenylboronic acid 22633
2,6二煙酸 Methyl 2,6dichloronicotinate,97% 5288 250MG 通用試劑
髓過氧化物酶測試盒/MPO測試盒 比色法 00管/樣 國產(chǎn)
小鼠再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)ELISA試劑盒 ，英文名： REG3α ELISA Kit
猴超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測試劑盒MonkeyhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T
犬抗狂犬病毒(RV)抗體免疫試劑盒 Dog rabies virus(RV)aibody ELISA Kit
英文名稱ThromboxaneB2人血栓素(TXB2)規(guī)格：96T/48T
化線粒體NADH氧化酶活性定量檢測試劑盒20次
RatInsulin,INSELISA試劑盒大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素β(IL-B)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-B ELISA Kit
魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測試劑盒FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T
人,5-脫水葡萄糖醇/,5-脫水山梨(,5-AG)免疫試劑盒 Human ,5-anhydroglucitol(,5-AG)ELISA Kit
臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒英文名稱MouseCCL26ELISAKit小鼠CCL26規(guī)格：96T/48T
冰凍切片組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒50次
RatEotaxinELISA試劑盒大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin(Eotaxin/CCL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
英文名稱：Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格：00T
發(fā)貨周期：～3天
本試劑盒各組分均以無菌形式提供，可直接用于細胞實驗。臺盼藍（Trypan Blue），一種偶氮、親水性酸性藍色染料，可透過死亡細胞和垂死細胞的細胞膜，將其染成藍色，而活細胞由于其細胞膜的完整性，可將臺盼藍排斥在外，因此，通過顏色的變化即可將活細胞（活細胞呈透明無色）和死細胞鑒別開來，基于此原理，本品廣泛用于細胞活性水平的常規(guī)評估。臺盼藍還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺盼藍與蛋白結(jié)合形成的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光。另外，臺盼藍（合適濃度）還常用來淬滅細胞表面的自熒光或者其他熒光信號。
使用方法
）對于懸浮細胞，離心收集細胞，對其充分清洗后，加入適量細胞重懸液重懸細胞制成單細胞懸液；對于貼壁細胞，先用胰酶消化細胞，再按照懸浮細胞的方法制備單細胞懸液。
2）取0.ml單細胞懸液，按照:比例與0.ml 0.4%臺盼藍染色液充分混勻，室溫染色3~0min。
【注】：因臺盼藍具有細胞毒性，染色時間過久會導(dǎo)致部分死細胞染色，干擾計數(shù)。通常染色3min即可。
3）取少量上述染色細胞加入血細胞計數(shù)板，于顯微鏡低倍鏡下計數(shù)，分別計算著色細胞（即損傷細胞和死細胞）和總細胞。
【注】：用移液槍加染色細胞時，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其完全覆蓋住整個小室。不可過量加液或者不足量。
【注2】：mm2方格內(nèi)細胞數(shù)通�？刂圃�20-50 cells，當細胞數(shù)超過200個，需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。
4）按照以下公式來計算細胞數(shù)目和活細胞百分比，
a，計算每ml細胞數(shù)目：Cells/ml=mm2大方格內(nèi)的平均細胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×04；【注】：此時的稀釋倍數(shù)為：步驟2所取的單細胞懸液與臺盼藍染色液混合后的稀釋倍數(shù)
b，總細胞數(shù)目：Total cells=（Cells/ml）×最初制備單細胞懸液的總體積
c，細胞活力值：Viability（%）=（總細胞數(shù)-總著色細胞數(shù)）/總細胞數(shù)×00
【注】：通常情況，健康的對數(shù)期培養(yǎng)細胞，活細胞至少占到95%。
儲存條件：室溫，有效期2年
臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒注意事項：
、懸浮細胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導(dǎo)致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
PAD Stop Solution （ ea） PAD Stop Solution
ZWEHDFMK， Caspase5抑制劑（氟） Caspase5 Inhibitor ZWEHDFMK
H9 （hydrochloride） （0 mg） N（2aminoethyl）5isoquinolinesulfonamide， dihydrochloride； Protein Kinase Inhibitor H9； H9 （hydrochloride）
Kasugamycin （hydrochloride） （0 g） 3O[2amino4[（carboxyiminomethyl）amino]2,3,4,6tetradeoxyαDarabinohexopyranosyl]Dchiroinositol, monohydrochloride
AcDEVDCMK （ mg） NacetylLαaspartylLαglutamylN[（S）（carboxymethyl）3chloro2oxopropyl]Lvalinamide； AcAspGluValAspCMK|Caspase3 Inhibitor III； AcDEVDCMK
GW 87X (0 mg) GW 87X, 6[2[5chloro2[(2,4digluorophenyl)methoxy]phenyl]cyclopentenyl]2pyridinecarboxylic acid
抗生素Ⅱ號培養(yǎng)基(Ph7.8～8.0)shēng huà shì jì容量：00克
3433胞苷5三鈉鹽(+4℃)Deoxythymidine triphosphate
微量可調(diào)移液器P00克保存：20℃
2甲基代 2Chloromethylpyridinium iodide,97% 3320 500G 通用試劑
L脯安醇 L(+)Prolinol 332
HYBRIDIZATIONCOCKTAIL,%formide雜交混合物,%甲先胺輕微混濁液體FROZENsigma
0882扶西汀相關(guān)物質(zhì)AFluoxetine Related CoMpound A;Nmetxyl3pxenyl3[(alpha,alpha,alpha(trifluoroMtolyl)oxy]propylaMine xy7nochloride
2xy7noxymetxyl4metxoxypxenylboronic acid 22633
2,6二煙酸 Methyl 2,6dichloronicotinate,97% 5288 250MG 通用試劑
髓過氧化物酶測試盒/MPO測試盒 比色法 00管/樣 國產(chǎn)
小鼠再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)ELISA試劑盒 ，英文名： REG3α ELISA Kit
猴超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測試劑盒MonkeyhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T
犬抗狂犬病毒(RV)抗體免疫試劑盒 Dog rabies virus(RV)aibody ELISA Kit
英文名稱ThromboxaneB2人血栓素(TXB2)規(guī)格：96T/48T
化線粒體NADH氧化酶活性定量檢測試劑盒20次
RatInsulin,INSELISA試劑盒大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素β(IL-B)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-B ELISA Kit
魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測試劑盒FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T
人,5-脫水葡萄糖醇/,5-脫水山梨(,5-AG)免疫試劑盒 Human ,5-anhydroglucitol(,5-AG)ELISA Kit
臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒英文名稱MouseCCL26ELISAKit小鼠CCL26規(guī)格：96T/48T
冰凍切片組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒50次
RatEotaxinELISA試劑盒大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin(Eotaxin/CCL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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