MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒本試劑盒以MTT(高純度)作為指示劑,在經典操作步驟的基礎上,采用獨特的甲臜溶解液配方,可以直接溶解甲臜沉淀,無需去除原有的培養(yǎng)液。從而避免因去除培養(yǎng)液時甲臜被部分去除而引起的操作誤差。具有本底低,靈敏度高,線性范圍寬,操作簡單等特點。另外,本試劑盒還提供配套的一次性針頭過濾器和注射器,為實驗帶來更多的便利。
噻唑蘭(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT),也稱作溴化噻唑藍四氮唑,是一種黃色染料,已經普遍替代傳統(tǒng)的臺盼藍染色法或者放射性同位素插入法,用來檢測細胞的活力,細胞增殖以及細胞毒性分析。檢測原理在于:MTT是一種可接受氫離子的化合物染料,帶正電荷,具有細胞膜滲透性。活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠將外源進入的MTT還原成為水不溶性的深藍色MTT-甲臜結晶,而死細胞不具有此功能。甲臜結晶是不能穿透細胞膜,因此沉積在處于增殖且未受損傷的細胞內。甲臜結晶可用DMSO或者酸化的異丙醇溶解出來,酶標儀下測定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量與活細胞數目成正比,用以評估細胞存活狀況。
產品組份:
MTT粉末——————25mg
MTT溶劑——————5ml
甲臜溶解液————50ml
除菌套裝—————包
注意事項
)甲臜溶解液具有腐蝕性和毒性,使用時注意防護。
2)MTT有致癌性,應小心操作;MTT溶液需要無菌,因其對菌很敏感。MTT溶液不可4℃保存超過周,因其可能發(fā)生降解,導致檢測結果錯誤。
3)MTT法只能用來檢測細胞相對數和相對活力,但不能測定細胞絕對數。在用酶標儀檢測結果的時候,為了保證實驗結果的線性,MTT吸光度最好在0-0.7范圍內。
4)使用微孔板進行檢測,如果細胞培養(yǎng)時間比較長,需要注意蒸發(fā)的問題。一般情況,由于96孔板周圍一圈最容易蒸發(fā),建議棄用周圍一圈的方法,改加PBS,水或者細胞培養(yǎng)液等。也可通過將96孔板放在靠近培養(yǎng)箱內水源的位置,以減緩蒸發(fā)現象。
5)甲臜溶解液低溫或者常溫保存可能會產生沉淀,只需37℃水浴使其充分溶解,混勻后即可使用。
6)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
儲存條件:4℃,有效期年
以下是細胞生物學試劑詳細說明:
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于×05,,不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當,可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測。可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導致熒光的淬滅,請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用未經凋亡誘導處理的細胞作為對照,進行熒光補償的調節(jié)。
產品特點:
.離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好?朔藝a試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應。
3.獨特的溶膠液/結合液配方,將溶膠和結合兩種功能統(tǒng)一,因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產物清潔純化、酶切產物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用,
4.溶膠液/結合液調制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結合效果,大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結合范圍內。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
操作步驟:
、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
PAD4 (human recombinant) Assay Reagent (60 ul) PAD4 (human recombinant) Assay Reagent
ZATADFMK, Caspase抑制劑(氟) Caspase Inhibitor ZATADFMK
NU 7026 (5 mg) 2(4morpholinyl)4Hnaphtho[,2b]pyran4one; LY26|DNAPK Inhibitor II; NU 7026
Kanamycin A (sulfate) (5 g) Ophtalmokalixan; O3amino3deoxyαDglucopyranosyl(→6)O[6amino6deoxyαDglucopyranosyl(→4)]2deoxyDstreptamine, monosulfate
Caspase3/7 Inhibitor I ( mg) 5[[2(methoxymethyl)pyrrolidinyl]sulfonyl]Hindole2,3dione; Caspase3/7 Inhibitor I
Lovastatin (25 mg) Lovastatin, 2methylS,2,3R,7S,8S,8aRhexahydro3,7dimethyl8[2[(2R,4R)tetrahydro4hydroxy6oxo2Hpyran2yl]ethyl]naphthalenyl ester, butanoic acid
快速試驗瓊脂shēng huà shì jì容量:2~8℃00毫升
胞苷5’二鈉鹽NA
乙酸纖維素薄膜 O.D.
2,3二甲基咪... 2Chloro4,5dihydro,3dimethyl... 07 G 通用試劑
L2安基丁醋 L2cMinobutyric ccid;L2cMinonbutyric ccid;Butyrinq 22
HYBRIDIZATIONCOCKTAIL,0%formide雜交混合物,0%甲先胺微混濁液體FROZENsigma
203甲氧基胺3metxoxypropylamine
pxenOL,CRYSTALLINE結晶本酚超級白色固體COLD不sigma
3羥基氮雜環(huán)丁烷鹽... 3Hydroxyazetidine Hydrochloride,≥98.0% 626 250MG 通用試劑
比枯枯靈 Bicucullin (≥98%,HPLC) 20MG 標準品
小鼠早期生長應答因子(EGR)ELISA試劑盒 ,英文名: EGR ELISA Kit
腎上腺髓質素(ADM)ELISA檢測試劑盒Monkeyadrenomedullin,ADMELISAKit 96T/48T
犬類風濕因子(RF)免疫試劑盒 Canine rheumatoid factor(RF)ELISA Kit
英文名稱HumanPAIgG/M/AELISAKit人血小板抗體規(guī)格:96T/48T
化線粒體DNA萃取試劑盒20次
Ratinsulinaoaibodies,IAAELISA試劑盒大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素α(ILα)ELISA試劑盒 ,英文名: ILα ELISA Kit
人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA檢測試劑盒humanAi-thyroid-globulinaibody,ATGAELISAKIT 96T/48T
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)免疫試劑盒 Rat Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA kit
英文名稱Ratβ-ThromboglobulinELISAKit大鼠β血小板球蛋白(β-TG)規(guī)格:96T/48T
聚糖對甲酰胺(2-AB)熒光標記試劑盒20次
ELISAKitHSP-70人熱休克蛋白70規(guī)格:48T/96T
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上海莼試生物技術有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology Co. Ltd. 專業(yè)服務于生命科學領域,擁有分子生物學、醫(yī)學、藥學、化學等方面的科研技術團隊,經營科研生化試劑、分析試劑、實驗耗材,推出技術先進、質量穩(wěn)定的科研產品。為全國乃至于世界各地科研機構、工業(yè)、電子、醫(yī)療、科技等領域的客戶,提供系統(tǒng)的產品資源及配套技術服務。推出十幾個種類產品線,部分產品接受定制服務!
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