中文名稱：Calcein-AM/PI活細胞/死細胞雙染試劑盒
英文名稱：Calcein-AM/PI Double Stain Kit
產(chǎn)品規(guī)格：500T
發(fā)貨周期：～3天
Calcein-AM是一種對活細胞進行熒光標(biāo)記的細胞染色試劑，發(fā)綠色熒光（Ex=490nm, Em=55nm）。因其在傳統(tǒng)的Calcein（鈣黃綠素）基礎(chǔ)上引入乙酰甲氧基甲酯（AM）基團，增加了疏水性，使其能夠輕易穿透活細胞膜。一旦進入細胞后，Calcein-AM（本身不發(fā)熒光）被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成膜非滲透性的極性分子Calcein，從而被滯留在細胞內(nèi)并發(fā)出強綠色熒光。與其它同類試劑（如BCECF-AM和CFDA)相比，由于Calcein, AM細胞毒性極低，是最適合用于活細胞染色的熒光探針，而且不會抑制任何的細胞功能，如增殖和淋巴球的趨化性。
由于死細胞缺乏酯酶，Calcein-AM僅用于對活細胞的細胞生存能力測試和短期標(biāo)記。因此，Calcein-AM常常與死細胞熒光探針如碘化丙啶（PI）等聯(lián)合使用，同時進行活細胞和死細胞的熒光雙重染色。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）不能穿過活細胞的細胞膜，僅能穿過死細胞膜的無序區(qū)域而到達細胞核，并嵌入細胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光（Ex=535 nm, Em=67 nm），因此PI僅對死細胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發(fā)，因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細胞和死細胞。而用545 nm激發(fā)，僅可觀察到死細胞。
本試劑盒的工作原理就在于Calcein-AM和PI的雙重染料，來進行活細胞和死細胞的雙重染色標(biāo)記，從而進行活細胞和死細胞水平的分析。根據(jù)我司優(yōu)化的實驗體系，單次就200μl細胞懸液進行染色。
注意事項
）由于Calcein-AM對濕度非常敏感，若是Calcein-AM溶液每次取完需要量后，必須緊緊密封蓋子。建議根據(jù)單次用量，分裝密封保存。Calcein-AM工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。
2）碘化丙啶（PI）有一定的致癌性，操作時一定要注意防護。若接觸到皮膚，需要立即用自來水清洗。
3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
儲存條件：-20℃，有效期2個月


Calcein-AM/PI活細胞/死細胞雙染試劑盒注意事項：
、懸浮細胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當(dāng)樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
PAF Cd4 （ mg）     Ohexadecyl（7，7，8，8d4）2Oacetylsnglyceryl3phosphorylcholine； Plateletactivating Factor Cd4； PAF Cd4
ABCHMINACA metabolite M5A （5 mg）     （（4hydroxycyclohexyl）methyl）Hindazole3carboxylic acid
ROS Brite 0     ROS Brite 0
MN252methyl derivative （0 mg）     7methoxy2methyl[2（4morpholinyl）ethyl]N[（S，2S，4R），3，3trimethylbicyclo[2。2。]hept2yl]Hindole3carboxamide； MN252methyl derivative
0（E），（Z）Conjugated Linoleic Acid （50 mg）     0E，Zoctadecadienoic acid； 0E，ZCLA； 0（E），（Z）Conjugated Linoleic Acid
5Chloro2[（E）2[phenyl（pyridin2     Jumonji HDM Inhibitor， JIB04
2shēng huà shì jì容量：RT克
(尿嘧啶)
5%度乳糖發(fā)酵管25毫升
4青基本硼醋 4Cycnophqnylboronic ccid
00毫克2～8℃
Barium7ipxenylaminesulfonate(本基基)本磺酸鋇鹽克BR
肝素鈉(系統(tǒng)適應(yīng)用)NA
PIPES,4二乙磺酸0克BR，98%
對乙酰胺基苯磺酰 NAcetylsulfanilyl chloride,98% 08 25G 通用試劑
糠偶酰 98% Furil 4
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC5B ELISA Kit
小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測試劑盒MousehighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T
人巨泌乳素免疫試劑盒 Human Macroprolactin ELISA Kit
Ratamyloidbetapeptide-40,Aβ-40ELISAKit大鼠β淀粉樣蛋白-40(Aβ-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞鈣交換體(NCX)蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒0/20次
MouseactivatedproteinC,APCELISA試劑盒小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素8結(jié)合蛋白(IL-8BP)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-8BP ELISA Kit
大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA檢測試劑盒RatIerleukin8,IL-8ELISAKit 96T/48T
人Spondin-2 免疫試劑盒 Human Spondin-2 ELISA Kit
Calcein-AM/PI活細胞/死細胞雙染試劑盒英文名稱MousePGEElisakit小鼠前列腺素E(PGE)規(guī)格：96T/48T
T噬菌體DNA分離試劑盒0次
Rabbitoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISA試劑盒兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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