中文名稱：細(xì)胞凋亡檢測試劑盒Ⅱ(AP)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：20T
發(fā)貨周期：～3天
細(xì)胞凋亡檢測試劑盒Ⅱ(AP)保存條件：-20℃冰凍保存。
保存期：一年
工作原理：
在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細(xì)胞的死亡，其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚，時(shí)間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活，細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割，出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口，并產(chǎn)生與DNA斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將地高辛標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至3’-OH 末端，DIG-dUTP 結(jié)合在DNA斷點(diǎn)部位，可以通過生物素化抗地高辛抗體(Anti-DIG-Biotin)和 SABC-AP反應(yīng)后，加入顯色底物 BCIP/NBT予以顯示。凋亡的細(xì)胞核呈紫藍(lán)色，從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細(xì)胞。
試劑盒內(nèi)容：
.標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)ml
2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl
3.DIG-dUTP(×20)20μl
4.封閉液(Blocking Reagent)4ml
5.生物素化抗地高辛抗體(×00)20μl
6..SABC-AP(×00)20μl
7.Proteinase K(×200)50μl
8.BCIP/NBT 顯色劑(×20)0.2ml
9.抗體稀釋液4ml

注意事項(xiàng)：
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時(shí)間的影響，因此當(dāng)樣品較多時(shí)測定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
Palmitoyl Serinol （00 mg）     N[2hydroxy（hydroxymethyl）ethyl]hexadecanamide； Palmitoyl Serinol
DL62 （hydrochloride） （0 mg）     （3,4dimethoxyphenyl）2（ethylamino）pentanone, monohydrochloride
Skyrin （ mg）     2，2’，4，4’，5，5’hexahydroxy7，7’dimethyl[S，’bianthracene]9，9’，0，0’tetrone； Amentoflavone|Endothianin|Rhodophyscin； Skyrin
TCPOBOP （50 mg）     2,2’[,4phenylenebis（oxy）]bis[3,5dichloro]pyridine
PP （Src Inhibitor） （5 mg）     （，dimethylethyl）3（4methylphenyl）Hpyrazolo[3，4d]pyrimidin4amine； AGL |EI 2； PP （Src Inhibitor）
MG262  ZLeuLeuLeuB(OH)2     MG262  ZLeuLeuLeuB(OH)2
L絲酸鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：HSerOmeoHCl，級(jí)別：特，98%，規(guī)格：5克
52’脫氧尿苷(20℃)Broxuridine
N6BenzoyladenineN(5H嘌呤6基)本甲先胺25克BR，98%
0酰葉醋 0ForMylfolic ccid 4
棕櫚醋酯 Mqthyl PclMitctq 90
etxylcaprate羊蠟酸乙酯00TCP，26.2%
08富馬酸;反二酸;;紫堇酸;，2二羧酸FuMaric Acid;Boletic acid;Lichenic acid;trans,2etxylenedicarboxylic acid
ZLAlanineNCBZL酸5克特，98.5%
對(duì)二甲基亞芐基羅... 4Dimethylaminobenzal rhodanine,≥98.0% 5364 0G 通用試劑
金 gold
小鼠真核翻譯起始因子2α激酶3(EIF2αK3)ELISA試劑盒 ，英文名： EIF2αK3 ELISA Kit
乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測試劑盒Monkeyacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 96T/48T
犬內(nèi)毒素(ET)免疫試劑盒 Canine endotoxin,ET ELISA Kit
英文名稱HumanInsulinELISAKit人胰島素(Insulin)ELISAKit規(guī)格：96T/48T
化微粒體0脂酶D(PhospholipaseD)總活性比色法定量檢測試劑盒20次
RatImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-7 ELISA Kit
魚類皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA檢測試劑盒FishCoisolELISAKit 96T/48T
人,4,5-三0酸肌醇(IP3)免疫試劑盒 Human inositol ,4,5,-isphosphate(IP3)ELISA kit
英文名稱MouseCCL24ELISAKit小鼠CCL24規(guī)格：96T/48T
冰凍切片組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法(SCHMORL)染色試劑盒50次
Ratepidermalgrowthfactorreceptor,EGFRELISA試劑盒大鼠表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
細(xì)胞凋亡檢測試劑盒Ⅱ(AP)8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)

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