Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection KitAnnexin V-PE/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是用紅色熒光染料PE（Phycoerythrin）標(biāo)記的Annexin V作為探針，來檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的發(fā)生，可用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀或其他熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。
其檢測(cè)原理為：在正常的活細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（phosphotidylserine，PS）位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在早期凋亡的細(xì)胞中，PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-Ⅴ（膜聯(lián)蛋白-V）是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力結(jié)合�？赏ㄟ^細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。
另外，本試劑盒中提供的7-AAD可用來區(qū)分存活的早期細(xì)胞和壞死或晚期凋亡細(xì)胞。7-AAD是一種核酸染料，同PI有著相似的熒光特性，但其發(fā)射光譜較PI窄，對(duì)其他檢測(cè)通道的干擾更小，在多色熒光分析中是PI的最佳替代品，可與Annexin V聯(lián)合使用。該染料不能透過正常細(xì)胞或早期凋亡細(xì)胞的完整的細(xì)胞膜，但可穿透晚期凋亡細(xì)胞或者壞死細(xì)胞并與其內(nèi)的DNA結(jié)合。因此將Annexin V-PE與7-AAD聯(lián)合使用時(shí)，7-AAD則被排除在活細(xì)胞（Annexin V-/7-AAD-）和早期凋亡細(xì)胞（Annexin V+/7-AAD-）之外，而晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞同時(shí)被Annexin V-PE和7-AAD結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽性（Annexin V+/7-AAD+）。
試劑盒組份：
重組人Annexin V/PE（rh Annexin V/PE）—————00μl
7-AAD Viability Staining Solution（20μg/ml）——200μl
4×Binding Buffer————————————————4ml
儲(chǔ)存條件：4℃，有效期一年。
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑詳細(xì)說明：

中文名稱	Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
英文名稱
規(guī)格	20T

注意事項(xiàng)
. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿防護(hù)服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05，，不推薦用于檢測(cè)組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞，建議適用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不當(dāng)，可能引起假陽性，而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán)，而影響檢測(cè)。可將胰酶消化后細(xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止進(jìn)一步的損傷。
6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅，請(qǐng)不要固定樣品。
7. 因檢測(cè)細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測(cè)儀器不同，因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同，因此建議每次檢測(cè)均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對(duì)照，進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好�？朔�了國(guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液，不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽，不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨(dú)特的溶膠液/結(jié)合液配方，將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一，因此一個(gè)試劑盒可以運(yùn)用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況，節(jié)省了需購買多種試劑盒的費(fèi)用，
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色，便于觀察溶膠效果和監(jiān)測(cè)pH值變化從而達(dá)到最佳結(jié)合效果，大大提高回收效率。
5.改進(jìn)的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性，即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。 、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的  完全細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。000～2000g 離心 min，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Parthenolide （50 mg）     2，3，6，7，7aS，8，0aS，0bRoctahydroaR，5dimethyl8methylene（4E）oxireno[9，0]cyclodeca[，2b]furan9（aH）one； Parthenolide
ZLEHDFMK， Caspase9抑制劑（氟）     ZLEHDFMK
NMPP （5 mg）     （，dimethylethyl）3（naphthalenylmethyl）Hpyrazolo[3，4d]pyrimidin4amine； PP Analog II； NMPP
4fluoro PV8 （hydrochloride） （0 mg）     4fluoro αPHPP|parafluoroPV8； （4fluorophenyl）2（pyrrolidinyl）heptanone, monohydrochloride
Trypsin Inhibitor （soybean） （250 mg）     SBTI|Kunitz Trypsin Inhibitor|MR 2Trypsin Inhibitor （soybean）
3 ,4 Methylenedioxyαpyrrolidinobutiophenone hydrochloride) (25 mg)     3’,4’MDαPBP|3’,4’MDPBP, 3 ,4 Methylenedioxyαpyrrolidinobutiophenone hydrochloride), (,3benzodioxol5yl)2(pyrrolidinyl)butanone, monohydrochloride
化亞銅00克
237芐基三丁基錄化銨Benzyltributylammonium chloride
三羥甲基基鹽酸鹽shēng huà shì jì容量：保存：20℃克
L賴酸乙酯 LLysine ethyl ester dihydrochloride,... 439 25G 通用試劑
異佛爾同二異青醋酯 isophoronq diisocycnctq 47
IPTG20MG/MLIPTG溶液超級(jí)透明無色溶液FROZENsigma
350普羅胺相關(guān)物質(zhì)BIoproMide Related CoMpound B;5(AcetylaMino)N,N'bis(2,3dixy7noxypropyl)2,4,6triiodoNmetxyl,3benzenedicarboxaMide
3Fluoro2formylpxenylboronic acid 87
酸乙酯 Ethyl Glycolate,98% 623507 5G 通用試劑
四丁基氫銨/氫四丁銨/四丁基硫氫酸銨/正四丁基氫基銨/TBAHS/IPCTBAHS AR，98%， 00/500克 國(guó)產(chǎn)
小鼠脂蛋白a(Lpa)ELISA試劑盒 ，英文名： Lpa ELISA Kit
猴抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA檢測(cè)試劑盒Monkeyai-livercellmembraneaibody,LMAELISAKit 96T/48T
犬凝聚素(CLU)免疫試劑盒 Dog clusterin,CLU ELISA Kit
英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP2ELISAKIT人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)規(guī)格：96T/48T
化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pCMV5-RUNX3)0微克
RatHyaluronicacid,HAELISA試劑盒大鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素5(IL-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒
Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection KitHumancross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISAKit 人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCaspase2,Casp-2ELISA試劑盒人胱天蛋白酶2(Casp-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
轉(zhuǎn)基因棉花MON5985品系試劑盒20次
Humansmallbreastepithelialmucin,SBEMELISAKit人小表皮粘蛋白(SBEM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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